(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211507839.5 (22)申请日 2022.11.29 (71)申请人 济南大学 地址 250024 山东省济南市 市中区南 辛庄 西路336号 (72)发明人 孙春辉　胡爽　张丛丛　常莉　 刘昭莹　魏本杰　刘宏　 (74)专利代理 机构 山东誉丰合创知识产权代理 有限公司 37384 专利代理师 刘妍 (51)Int.Cl. C12N 5/0775(2010.01) C01G 49/02(2006.01) C01B 32/184(2017.01) B82Y 40/00(2011.01)B82Y 30/00(2011.01) B82Y 5/00(2011.01) (54)发明名称 rGO-FeOOH复合材 料在干细胞诱 导中的应用 (57)摘要 本发明公开了rGO ‑FeOOH复合材料在干细胞 诱导中的应用。 在氮气 保护下， 将FeCl2溶液缓慢 加入到GO溶液中， 进行水浴反应； 得到rGO ‑FeOOH 溶液， 离心洗涤得到rGO ‑FeOOH膜， rGO ‑FeOOH膜 的厚度为10 ‑100nm； rGO ‑FeOOH膜上的FeOOH长度 为1nm‑10μm。 本发明的rGO ‑FeOOH膜可用于制备 维持干细胞干性、 促进干细胞分化的培养体系、 加速干细胞的神经分化、 提高干细胞向神经元分 化的比例。 将rGO ‑FeOOH膜用于干细胞分化， 无需 外界施加刺激， 是一种简单、 高效的诱导间充质 干细胞神经分化的培 养方法。 权利要求书1页 说明书5页 附图8页 CN 115537392 A 2022.12.30 CN 115537392 A 1.rGO‑FeOOH复合材 料在如下1）~3） 至少一项中的应用： 1） 控制干细胞增殖、 维持干细胞干性； 2） 加速干细胞的神经分化； 3） 提高干细胞向神经 元分化的比例。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述rGO ‑FeOOH复合材料为rGO ‑FeOOH膜， 所述rGO‑FeOOH膜的厚度为10 ‑100nm； rGO‑FeOOH膜上的F eOOH长度为1nm ‑10 μm。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特 征在于， 所述rG O‑FeOOH膜由以下 方法制备： 在氮气保护下， 将FeCl2溶液缓慢加入到GO溶液中， 进行水浴反应； 得到rGO ‑FeOOH溶液， 离心洗涤得到rG O‑FeOOH膜。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特 征在于， 所述G O溶液的浓度为0.1mM ‑1M。 5.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述FeCl2溶液是将FeCl2·4H2O溶于超纯 水中配置而成； 所述F eCl2溶液的浓度为0.795g/mL。 6.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述FeCl2溶液与GO溶液的体积比为  2.7： 1； 所述水浴 反应的温度为15 ‑50℃。 7.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述培养体系的制备方法为： 将干细胞接 种于rGO‑FeOOH膜上， 添加干细胞增殖培 养液， 得到 培养体系。 8.根据权利要求1或7所述的应用， 其特征在于， 所述干细胞为间充质干细胞， 所述间充 质干细胞包括脂肪来源的间充质干细胞、 骨髓来源的间充质干细胞、 牙髓来源的间充质干 细胞或脐带来源的间充质干细胞。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115537392 A 2rGO‑FeOOH复合材料在干细胞诱导中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物工程技术领域， 具体涉及rGO ‑FeOOH复合材料在干细胞诱导中的 应用。 背景技术 [0002]干细胞是一类自我更新能力强、 具有多向分化潜能以及可塑性高的细胞， 在基因 治疗、 自身免疫疾病、 脑部和神经系统等疾病治疗中显示出巨大的临床 应用前景。 高效诱导 干细胞分化 为神经元是解决神经 元损伤和数量 不足的可靠方法。 [0003]目前诱导干细胞神经分化的方法有几种： 1)  化学方法， 如Woodbury利用 β ‑巯基乙 醇或二甲基亚砜和丁羟茴香醚等多种成分组合在一起， 在体外能诱导MS Cs向神经元样细胞 分化； 2) 生长因子处理， 如碱性 成纤维生长因子， 表皮生长因子， 血小板生长因子诱导干细 胞的神经分化； 3)  与神经细胞共培养； 4)  基因修饰， 如转染神经营养因子等。 这些方法有 的操作复杂， 有的是多种混合物共同作用的结果， 且诱导因子半衰期短， 价格昂贵， 不利于 临床治疗 ， 并且间充质干细胞很难在体外通过诱导进行神经分化。 申请号为 202210048527.6的专利公开了基于电磁感应产生的无线电信号加快神经干细胞向神经元 分化的方法， 将PDMS 旋涂在石墨烯‑镍片基底上， 作为基质， 诱导干细胞向神经元分化； 但此 诱导需要在电磁感应产生的无线电信号下进行。 因此， 亟需开发一种无需外界干扰的、 简 单、 高效的诱 导间充质干细胞神经分化的培 养方法。 [0004]rGO‑FeOOH是由氧化石墨烯 （GO） 和氯化亚铁在温和条件下制备得到， 该方法通过 在rGO表面自发地原位沉积FeOOH纳米粒子生成rGO ‑FeOOH， FeOOH的粒径在1nm ‑10 μm之间。 目前rGO‑FeOOH主要用于催化降解有机物等领域 （参见Low  temperature  preparation  of‑ FeOOH/reduced  graphene  oxide and its catalytic  activity  for the  photodegradation  of an organic dye， Guanbo  Huang等， Nanotechnology  24 (2013)  395601 (12pp)） ， 还未有利用rGO ‑FeOOH复合材料诱导间充质干细胞神经分化及 维持干细 胞干性方面的报道。 发明内容 [0005]针对上述现有技术， 本发明的目的是提供一种基于rGO ‑FeOOH复合材料诱导间充 质干细胞神经分化及维持干细胞干性的方法。 本发明利用rGO ‑FeOOH复合材料的介导来诱 导间充质干细胞神经分化。 [0006]为实现上述目的， 本发明采用如下技 术方案： 本发明提供rG O‑FeOOH复合材 料在如下1）~3） 至少一项中的应用： 1） 控制干细胞增殖、 维持干细胞干性； 2） 加速干细胞的神经分化； 3） 提高干细胞向神经 元分化的比例。 [0007]优选的， 所述rGO ‑FeOOH复合材料为rGO ‑FeOOH膜， 所述rGO ‑FeOOH膜的厚度为10 ‑说　明　书 1/5 页 3 CN 115537392 A 3