(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210844207.1 (22)申请日 2022.07.18 (71)申请人 中山大学孙逸仙纪念医院 地址 510030 广东省广州市沿江西路107号 (72)发明人 苏士成　陆艺文　 (74)专利代理 机构 广州润禾知识产权代理事务 所(普通合伙) 44446 专利代理师 郑永泉 (51)Int.Cl. G01N 33/569(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/68(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61K 45/06(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 CD16+成纤维细胞在诊断、 预防和治疗单克 隆抗体耐药乳腺癌中的应用 (57)摘要 本发明公开了CD16+成纤维细胞在诊断、 预 防和治疗单克隆抗体耐药乳 腺癌中的应用。 基于 CD16+成纤维细胞在单克隆抗体敏感乳腺癌细 胞、 单克隆抗体耐药乳 腺癌细胞中的不同分布情 况， CD16+成纤维细胞可以作为一种标志物而应 用于乳腺癌单克隆抗体耐药性的预测、 诊断和/ 或预测乳腺癌单克隆抗体治疗疗效中， 有助于及 时判断不同个体的乳腺癌是否有潜在单克隆抗 体耐药性 或已存在单克隆抗体耐药性， 以便及时 调整、 给予适合的治疗策略， 延长患者生存期。 而 且， 通过干预肿瘤细胞VAV2 的表达， 可有效逆转 CD16+成纤维细胞引起的耐药， 改善乳腺癌个体 对单克隆抗体的反应， 提高乳 腺癌对单克隆抗体 治疗的敏感性， 提高乳腺癌的抗HER2靶向治疗效 果。 权利要求书1页 说明书17页 附图13页 CN 115372611 A 2022.11.22 CN 115372611 A 1.CD16+成纤维细胞作为乳腺癌单 克隆抗体治疗耐药 标志物的应用。 2.一种乳腺癌单 克隆抗体治疗耐药 标志物， 其特征在于， 为CD16+成纤维细胞。 3.CD16+成纤维细胞检测试剂在制备预测、 诊断乳腺癌单克隆抗体治疗耐药和 /或预后 乳腺癌单 克隆抗体治疗 疗效和/或预测乳腺癌 患者无病生存期的产品中的应用。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述乳腺癌为HER2阳性乳腺癌； 和/或， 所 述单克隆抗体包括曲妥珠 单抗和/或帕妥珠 单抗。 5.根据权利要求3 或4所述的应用， 其特征在 于， CD16+成纤维细胞检测试剂包含与CD16+ 成纤维细胞表面 抗原CD16发生 抗原抗体反应的抗体。 6.CD16+成纤维细胞在制备预测、 诊断乳腺癌单克隆抗体治疗耐药和 /或预后乳腺癌单 克隆抗体治疗 疗效和/或预测乳腺癌 患者无病生存期的产品中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述产品包括CD16+成纤维细胞检测试剂 盒。 8.一种预测、 诊断乳腺癌单克隆抗体治疗耐药和/或预后乳腺癌单克隆抗体治疗疗效 和/或预测乳腺癌患者无病生存期的试剂盒， 其特征在于， 包含与CD16+成纤维细胞表面抗 原CD16发生 抗原抗体反应的抗体。 9.乳腺癌结缔组织形成抑制剂在制备预防和/或治疗单克隆抗体耐药乳腺癌的产品中 的应用； 进 一步地， 乳腺癌结缔组织形成抑制剂包括CAFCD16 ‑SYK‑VAV2‑RhoA‑MLC2‑MRTF‑A 通路抑制剂； 进一步地， CAFCD16 ‑SYK‑VAV2‑RhoA‑MLC2‑MRTF‑A通路抑制剂包括CD16+成纤 维细胞抗原CD16的抑制剂、 SYK抑制剂、 VAV2抑制剂、 RhoA抑制剂、 MLC2抑制剂和/或MRTF ‑A 抑制剂； 进一步地， CD16+成纤维细胞抗原CD16 的抑制剂包括与CD16+成纤维细胞表面抗原 CD16结合的中和抗体和/或CD16+成纤维细胞抗原CD16  shRNA； 和/或， SYK抑制剂包括 SYKshRNA； 和/或， VAV2抑制剂 包括VAV2 shRNA； 和/或， RhoA抑制剂 包括RhoA shRNA； 和/或， MLC2抑制剂包括MLC2  shRNA； 和/或， MRTF ‑A抑制剂包括MRTF ‑A shRNA。 10.一种预防和/或治疗单克隆抗体耐药乳腺癌的产品， 其特征在于， 包含乳腺癌结缔 组织形成抑制剂； 和/或， 所述单克隆抗体包括曲妥 珠单抗和/或帕妥 珠单抗； 和/或， 所述乳 腺癌为HER2阳性乳腺癌。 进一 步地， 乳腺癌结 缔组织形成抑制剂包括 CAFCD16‑SYK‑VAV2‑RhoA‑MLC2‑MRTF‑A通路抑制剂； 进一 步地， CAFCD16‑SYK‑VAV2‑RhoA‑MLC2‑MRTF‑A通路抑制剂包括CD16+成纤维细胞抗原 CD16的抑制剂、 SYK抑制剂、 VAV2抑制剂、 RhoA抑制剂、 MLC2抑制剂和/或MRTF ‑A抑制剂； 进一步地， CD16+成纤维细 胞抗原CD16的抑制剂包括与CD16+成纤维细胞表面抗原CD16结合 的中和抗体和/ 或CD16+成纤维细胞抗原CD16  shRNA； 和/ 或， SYK抑制剂包括SYK  shRNA； 和/ 或， VAV2抑制剂 包括VAV2  shRNA； 和/或， RhoA抑制剂包括RhoA  shRNA； 和/或， MLC2抑制剂 包 括MLC2 shRNA； 和/或， MRTF ‑A抑制剂包括MRTF ‑A shRNA。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115372611 A 2CD16+成纤维细胞在诊断、 预防和治疗单克隆抗体耐药 乳腺癌 中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及肿瘤分子生物学领域， 更具体地， 涉及CD16+成纤维细胞在诊 断、 预防 和治疗单 克隆抗体耐药乳腺癌中的应用。 背景技术 [0002]乳腺癌已经成为全球发病率最高的恶性肿瘤。 传统的乳腺癌治疗手段以手术、 放 疗、 化疗及内分泌治疗为主。 但是化疗在杀伤肿瘤的同时， 损伤了机体的正常细胞， 具有显 著的副作用。 近年来， 单克隆抗体类药物(mAb)的出现解决了这一难题。 通过抗原 ‑抗体的特 异性结合， 单克隆抗体类药物 能够识别并结合肿瘤细胞独有的标志物， 从而特异性杀伤肿 瘤细胞而不损伤正常组织， 不仅能够有效控制肿瘤， 还大大减小了治疗的副作用， 是肿瘤治 疗领域的重大突破。 目前， 单克隆抗体药物已广泛应用于肿瘤、 自身免疫病、 移植物抗宿主 反应等多种疾病中。 [0003]尽管单克隆抗体类药物为肿瘤治疗带来新希望， 但仍有部分患者不能从治疗中获 益。 曲妥珠单抗是目前乳腺癌中应用最为广泛的单克隆抗体类药物， 其针对的靶点是表皮 生长因子受体2(human  epidermal  growth factor receptor 2,HER2)。 HER2阳性乳腺癌患 者约占乳 腺癌总体人数的15％～30％， HER2阳性乳 腺癌具有浸润性强、 进展 快速、 复发风险 高和预后差等临床特点。 针对HER2分子的靶向治疗能够大大改善这部分患者的生存预后。 但是， 乳腺癌在患者中具有异质性这一特征， 并非所有HER2阳性患者都能够从抗HER2靶向 治疗中获益。 对于靶向HER2治疗反应较差的患者， 这一治疗不仅延误宝 贵的治疗时间， 也带 来了不必要的不良反应和治疗费用。 值得注意的是， 目前除了HER2 蛋白的表达量及基因扩 增之外， 尚无其他能够有效预测抗HER2靶向治疗效果的分子标志物。 单一的判断手段势可 能会导致漏检、 误检风险增大， 无疑， 这非常不利于为乳腺癌患者尽早制定正确的治疗策 略， 以延长患者的生存期 。 在目前治疗方案多样化的背 景下， 如何为患者制定个体化的治疗 方案是乳腺癌治疗领域的重大挑战， 因此， 解决上述问题有重要的临床意 义。 发明内容 [0004]本发明旨在克服上述现有技术的至少一种不足， 提供一种CD16+成纤维细胞在诊 断、 预防和治疗单克隆抗体耐药乳腺癌中的应用， 通过CD16+成纤维细胞这一标志物， 便于 预测、 诊断患者能否从抗HER2靶向治疗中获益， 且通过中和或敲低CD16抗原、 以及干预乳 腺 癌细胞VAV2的表达， 能促进抗H ER2的单克隆抗体靶向治疗效果。 [0005]本发明的一个目的在于提供CD16+成纤维细胞作为乳腺癌单克隆抗体治疗耐药标 志物的应用。 [0006]本发明的再一目的在于提供一种乳腺癌单克隆抗体治疗耐药标志物， 为CD16+成 纤维细胞。 [0007]本发明的又一目的在于提供CD16+成纤维细胞检测试剂在制备预测、 诊断乳腺癌说　明　书 1/17 页 3 CN 115372611 A 3