(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211286490.7 (22)申请日 2022.10.20 (71)申请人 中国人民解 放军陆军 军医大学第一 附属医院 地址 400038 重庆市沙坪坝区高滩岩正 街 30号 (72)发明人 李壮　姚小红　付文娟　陈小情　 钮芹　王帅　卞修武　 (74)专利代理 机构 北京元本知识产权代理事务 所(普通合伙) 11308 专利代理师 黎昌莉 (51)Int.Cl. G01N 33/68(2006.01) G01N 33/574(2006.01) C12Q 1/6886(2018.01)A61K 45/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 HMGB1在胶质母细胞瘤TMZ化疗预后预测中 的应用 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一 种HMGB1在胶质母细胞瘤TMZ化疗预后预测中的 应用。 本专利以胶质瘤为模型， 通过TCGA和CGGA 数据库分析、 免疫组织化学方法、 酶联免疫反应 等方法， 深入探究HMGB1在替莫唑胺治疗中的作 用及机制， 以及胶质母细胞瘤中HMGB1的表达与 其恶性生物学行为之间的相关性， 发现高表达的 HMGB1促进了胶质母细胞瘤细胞的替莫唑胺耐药 能力， 并且 经过替莫唑胺治疗的胶质母细胞瘤患 者血清中的HMGB1表达量可指示预后。 本专利为 进一步提高替莫唑胺治疗效果， 改善GB患者预 后， 提供新视角与理论基础。 权利要求书1页 说明书7页 附图4页 CN 115469104 A 2022.12.13 CN 115469104 A 1.高迁移率族蛋白B1作为预后标记物在制备用于胶质母细胞瘤TMZ化疗的预后预测的 试剂盒中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述高迁移率族蛋白B1在胶质母细胞瘤胞 内低表达 。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述高迁移率族蛋白B1在胶质母细胞瘤胞 外高表达 。 4.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述胶质母细胞瘤包括原发性胶质母细胞 瘤和/或继 发性胶质母细胞瘤。 5.检测高迁移率族蛋白B1表达量的试剂在制备用于评估胶质母细胞瘤TMZ化疗疗效的 试剂盒中的应用。 6.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述检测高迁移率族蛋白B1表达量的试剂 为检测高迁移率族蛋白B1  mRNA或蛋白表达水平的试剂。 7.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述检测高迁移率族蛋白B1表达量的试剂 检测胞内和/或胞外的高迁移率族蛋白B1的表达量。 8.促进高迁移率族蛋白B1由胞内释放到胞外的试剂在制备提升胶质母细胞瘤TMZ化疗 疗效的药物中的应用。 9.用于检测胶质母细胞瘤细胞中高迁移率族蛋白B1表达量的试剂盒， 其特征在于， 所 述试剂盒含有用于检测所述预后标记物高迁移 率族蛋白B1的mRNA和/或蛋白表达水平的试 剂。 10.采用权利要求9所述的试剂盒检测胶质母细胞瘤细胞中高迁移率族蛋白B1表达量 的方法， 其特征在于， 所述方法为： (1)提取经过TMZ化疗的胶质母细胞瘤患者的血清标本， 采用权利要求7所述的试剂盒检测所述血清标本中HM GB1的表达量； 或(2)提取经过TMZ化疗 的胶质母细胞瘤患者的组织标本， 采用权利要求7所述的试剂盒检测所述组织标本中HM GB1 的表达量。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115469104 A 2HMGB1在胶质母细胞瘤TMZ化疗预后预测中的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一种HMGB1在胶质母细胞瘤TMZ化疗预后 预测中的应用。 背景技术 [0002]胶质母细胞瘤(Glioblastom a,GB)是一种具有高度异质性和侵袭性的原发恶性脑 肿瘤， 近年来， 胶质母细胞瘤的发病率呈现逐年增加的趋势， 但是针对其有效治疗的手段并 没有增加， 依然是手术切除后进行放化疗的标准治疗方案 ， 且加入替莫唑胺 (Temozolomide， TMZ)的化疗也仅使胶质母细胞瘤患者中位生存时间从12.1个月增加至 14.6个月， 并没有显著延长患者的生存时间。 并且TMZ长期应用易产生耐药性， 从而限制其 疗效。 鉴于GB的高致死性及对传统疗法的相对抵抗， 使得寻找更加有效且敏感的治疗靶点 提高替莫唑胺的治疗效果， 同时深入探究与GB治疗相关的深层机制具有重要意 义。 [0003]高迁移率族 蛋白B1(high  mobility  group protein 1， HMGB1)结构特殊， 是无前 导序列蛋白， 其出胞依赖于分泌型自噬的激活。 HMGB1是一种高度保守的核蛋白， 可作为结 构性的染色质结合因子弯曲DNA 起到维持染色质稳定的作用， 越来越多的研究表明， 在细胞 应激状态下其可被大量分泌至胞外间质作为损伤相关分子模式(Damage ‑associated   molecular  pattern， DAMP)发挥更为重要的作用， 如HMGB1在肿瘤血管生成、 侵袭转移以及 化疗耐药中发挥关键作用， 且越来越多的研究表明其特殊的分泌功能在调节细胞间的相互 作用， 塑造肿瘤微环境， 激活抗肿瘤 免疫以及肿瘤微环境与炎症反应的关系中发挥重要作 用。 在前期研究中发现GB中HMGB1含量丰富， 结合HMGB 1的特殊生物学特性， 合理认为HMGB 1 在GB中的研究具有重要病理生理学意 义。 [0004]HMGB1在肿瘤恶性生物学行为中具有两面性， 一方面其对于肿瘤具有促进作用， 如 Zong等人的研究发现肿瘤细胞释放的HM GB1对肿瘤部位的炎症反应以及肿瘤细胞的生长速 率具有一定的促进作用， Tang等人的研 究发现细胞外HMGB1可结合某些细胞表面受体激活 下游信号通路产生功能性的免疫反应， 刺激细胞黏附和迁移并促进细胞增殖和血管生成介 导恶性生物学行为。 另一方面， 在大量研究中认为其对于肿瘤具有明显的抑制作用， 如 Richard A DeMarco等人的研究发现HMGB1可以与IL ‑1/IL‑2家族成员协同促进NK细胞与单 核细胞的交互， 并且增强DC细胞的成熟， 进而增强免疫反应； Georg  Gdynia等人发现HMGB1 可以通过使胶质瘤细胞内产生巨大的泡状线 粒体导致明显的肿瘤细胞杀伤； 令人惊喜的是 James F.Curtin等人的研究发现HMGB1可以介导内源性的TLR2激活和脑肿瘤的消退抑制其 恶性生物学行为。 与此同时， HMGB1可以通过激活自然杀伤细胞(NK)、 树突状细胞(DC)、 巨噬 细胞介导免疫原性的细胞死亡， 进而增强抗肿瘤免疫反应， 增强化疗效果。 因此， HM GB1在肿 瘤中的生物学功能复杂， 作用多样， 靶向HMGB1的产生与释放， 不仅对炎症性疾病具有重要 意义， 而且对肿瘤的恶性生物学行为具有直观的调节作用， 通过肿瘤细胞死亡而释放的 HMGB1可能对肿瘤部位的局部炎症反应和肿瘤细胞生长速率都有调节作用， 这个较为新颖 的观点可能对肿瘤更为有效的潜在治疗方式具有深远影响。 正是因为HMGB1在生理背景与说　明　书 1/7 页 3 CN 115469104 A 3