(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210888949.4 (22)申请日 2022.07.27 (71)申请人 东北林业大 学 地址 150040 黑龙江省哈尔滨市香坊区和 兴路26号 (72)发明人 牛娜　姜伟　陈立钢　 (51)Int.Cl. A61K 47/02(2006.01) A61K 47/26(2006.01) A61K 31/704(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 49/08(2006.01) A61K 49/10(2006.01) C01B 25/32(2006.01) (54)发明名称 pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁-单宁酸的 制备及应用 (57)摘要 一种对pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单 宁的制备方法及其应用， 它涉及一种药物负载与 生物成像的方法。 本发明的目的是要解决一般药 物载体化疗效率低、 毒性大、 化疗药物未到达肿 瘤部位就过早释放， 无法实现较长时间的血液循 环的问题， 并且希望药物载体同时可作为磁共振 成像造影剂应用于肿瘤的临床诊断。 方法： 一、 纳 米改性羟磷灰石的合成； 二、 含盐酸阿霉素的纳 米改性羟磷灰石的合成； 三、 含盐酸阿霉素的纳 米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的合成。 本发明所制 备的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸不仅具有良 好的分散性和较低的生物毒 性， 还具有灵敏的pH 响应性， 可以实现较长时间的药物缓释和较好的 磁共振成像效果。 权利要求书2页 说明书4页 附图4页 CN 115154613 A 2022.10.11 CN 115154613 A 1.一种对pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的制备方法， 其特征在于它按以下步 骤制备的： 一、 纳米改性羟磷灰石的合成： 将硝酸钙、 硝酸锰、 聚丙烯酸和20mL～40mL蒸馏水混合 加入烧杯中在超声条件下充分溶解， 在400rpm～500rpm转速条件下磁力搅拌1h～2h， 向混 合溶液中加入5mL～15mL磷酸氢二铵水溶液， 滴加质量分数为25％～28％的氨水使混合体 系保持pH＝9～10， 将混合体系转移到圆底烧瓶中， 油浴加热到80℃～90℃， 在300rpm～ 400rpm转速条件下搅拌1h～1.5h， 室温继续搅拌12h～24h， 反应结束后静置陈化12h～24h， 用蒸馏水和乙醇交替洗涤3～4次， 离心收集沉淀， 在50℃～60℃条件 下真空烘干， 得到纳米 改性羟磷灰石； 步骤一中所述硝酸钙和硝酸锰的摩尔比为1： (0.01～0.25)； 步骤一中所述 混合溶液中钙离子、 锰离子的总和与磷酸根离子的摩尔比为1:(0.5～0.7)； 步骤一中所述 聚丙烯酸的分子量为～2000； 步骤一中所述聚丙烯 酸的质量与蒸馏水的体积比为1 g： (20mL ～40mL)； 二、 含盐酸阿霉素的纳米改性羟磷灰石的合成： 将步骤一中制备的纳米改性羟磷灰石、 盐酸阿霉素和10mL～30mL蒸馏水加入烧杯中在超声条件下混合， 在400rpm～500rpm转速条 件下黑暗中磁力搅拌48 h～72h； 步骤二中所述纳米改性羟磷灰石的质量与蒸馏水的体积比 为1g： (100mL～200mL)； 步骤二中所述盐酸阿霉素与纳米改性羟磷灰石的质量比为1： (10～ 20)； 三、 含盐酸阿霉素的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的合成： 向步骤二磁力搅拌48h～ 72h后的混合体系中加入100 μL～300 μL单宁酸水溶液和100 μL～300 μL氯化铁水溶液， 并快 速超声震荡， 加入氢氧化钠溶液调节混合体系pH＝8～8.5， 室温搅拌1h～2h后离心收集沉 淀， 在50℃～60℃下真空干燥， 得到了含盐酸阿霉素的纳米改性羟磷 灰石/铁‑单宁酸； 步骤 三中所述单宁酸和氯化铁的摩尔比为 1:(1～1.5)； 步骤三中所述纳米改性羟磷灰石的质量 与单宁酸的摩尔比为1g： (0.0 5mol～0.1mo l)。 2.根据权利要求1所述的一种对pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的制备方法， 其特征在于步骤一所述硝酸钙、 硝酸锰、 聚丙烯酸和20mL～40mL蒸馏水混合加入烧杯中在 超声条件下充分溶解， 在40 0rpm～500rpm转速条件下磁力搅拌1h～ 2h。 3.根据权利要求1所述的一种对pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的制备方法， 其特征在于步骤一所述 滴加质量分数为25％～ 28％的氨水使混合体系保持pH＝9 ～10。 4.根据权利要求1所述的一种对pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的制备方法， 其特征在于步骤一所述将混合体系 转移到圆底烧瓶中， 油浴加热到80℃～90℃， 在300rpm ～400rpm转速条件下搅拌1h～1.5 h。 5.根据权利要求1所述的一种对pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的制备方法， 其特征在于步骤二所述在40 0rpm～500rpm转速条件下黑暗中磁力搅拌48h～72h 。 6.根据权利要求1所述的一种对pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的制备方法， 其特征在于步骤三所述混合体系中加 入100 μL～300 μL单宁酸水溶液和100 μL～300 μL氯化 铁水溶液， 并快速超声 震荡， 加入氢 氧化钠溶 液调节混合体系pH＝8～8.5 。 7.对pH敏感的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸用于肿瘤诊断和治疗， 其特征在于它按以 下步骤完成的： 一、 含盐酸阿霉素的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸在不同pH环境中的缓释实验： 分别权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115154613 A 2将10mg～20mg含盐酸阿霉素的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸加入20～40mL  pH＝4.5和pH ＝7.4的缓冲溶液中， 在37℃条件下恒温振荡96h～144h， 每隔一段时间取3mL～5mL上清液 用可见分光光度法测定上清液中盐酸阿霉素 的含量， 同时补充相同体积的缓冲溶液， 为了 设置对照组， 将10mg～20mg未包覆铁 ‑单宁酸网络的含盐酸 阿霉素的纳米 改性羟磷灰石在 相同条件下进行缓释实验； 二、 检测含盐酸阿霉素的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸的磁共振成像效果： 分别将 10mg～20mg含盐酸阿霉素的纳米改性羟磷灰石/铁 ‑单宁酸加入20～40mL  pH＝4.5和pH＝ 7.4的缓冲溶液中， 在37℃条件 下恒温振荡4h～12h。 每隔一段时间取3mL～5mL上清液， 通过 ICP‑OES分析检测Mn2+的释放量， 并进行1T磁共振成像扫描。 未与含盐酸阿霉素的纳米改性 羟磷灰石/ 铁‑单宁酸混合的缓冲溶 液作为对照组置 于试管中， 进行1T磁共 振成像扫描。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115154613 A 3