(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210914287.3 (22)申请日 2022.08.01 (71)申请人 中国科学技术大学 地址 230026 安徽省合肥市包河区金寨路 96号 (72)发明人 白丽　白诗钰　吴伽蓝　 (74)专利代理 机构 中科专利商标代理有限责任 公司 11021 专利代理师 柴云峰 (51)Int.Cl. C12Q 1/02(2006.01) G01N 33/68(2006.01) A61K 45/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 Vam6 （Vps39） 作为靶点在药物筛选、 基因编 辑以及疾病治 疗中的应用 (57)摘要 本申请公开了以Vam6作为靶点的肿瘤免疫 治疗试剂的筛选方法， 其包括对iNKT细胞施用候 选试剂， 并用iNKT细胞活化剂分别处理施用与未 施用所述试剂的iNKT细胞， 并测量iNKT细胞的 Vam6的表达水平， 其中与未施用过候选试剂的 iNKT细胞相比， 施用过候选试剂的iNKT细胞的 Vam6的表达水平降低或增加表明所述候选试剂 为潜在的以Vam6作为靶点的肿瘤免疫治疗试剂。 本申请还公开了使用所述筛选方法初筛的试剂 用于筛选增强iNKT细胞抗肿瘤功能的试剂的方 法， 以及用于治疗肿瘤的药物组合物， 所述药物 组合物包含 所述筛选出的候选试剂， 以及包含所 含药物组合物的试剂盒。 权利要求书2页 说明书10页 附图3页 CN 115216514 A 2022.10.21 CN 115216514 A 1.一种以Vam6作为靶点的肿瘤免疫 治疗试剂的筛 选方法， 所述方法包括以下步骤： 对iNKT细胞施用候选试剂； 用iNKT细胞活化剂， 例如CD1d ‑PBS57四聚体， 处理施用过候选试剂的iNKT细胞和 未施 用过候选试剂的i NKT细胞； 测定施用和未施用过候选试剂的i NKT细胞的Vam6的表达水平； 其中与未施用过候选试剂的iNKT细 胞相比， 施用过候选试剂的iNKT细胞的Vam6的表达 水平降低或增 加表明所述 候选试剂为潜在的以Vam6作为靶点的免疫 治疗试剂， 其中所述iNKT细胞活化剂为能够活化iNKT细胞以促进iNKT细胞释放细胞因子， 例如 CD1d‑PBS57四聚体， α ‑半乳糖基神经酰胺( α ‑GalCer, α‑GC)及其类似物， 神经节苷脂GD3， 糖 磷脂酰肌醇， 磷脂酰乙醇胺， β ‑GalCer， iGb 3及其类似物4 ‑HO‑iGb3和4‑dh‑iGb3,以及其他 可被CD1d呈递的抗原， 携带iNKT细胞抗原的抗原递呈细胞， 以及表达在CAR ‑iNKT表面识别 肿瘤抗原的嵌合体受体。 2.权利要求1所述的方法， 其中所述iNKT细胞为未经修饰的野生型iNKT细胞或基因编 辑后的iNKT细胞， 例如CAR ‑iNKT。 3.权利要求1所述的方法， 其中所述Vam6的表达水平通过测量Vam6的活性或蛋白量或 测量Vam6基因的转录物的水平进行测定 。 4.一种筛选Vam6靶向抑制剂从而增强iNKT细胞抗肿瘤功能的试剂的方法， 其包括用权 利要求1‑3任一项所述的方法筛选出的候选试剂处理iNKT细胞， 然后将所述iNKT细胞用于 肿瘤治疗， 或者在所述候选试剂存在下将iNKT细胞用于肿瘤治疗， 判断iNKT细胞抗肿瘤功 能的变化， 其中和不经候选试剂处理的iNKT细胞相比， 经候选试剂处理的iNKT细胞的抗肿 瘤功能的提高表明所述 候选试剂为潜在的增强i NKT细胞抗肿瘤功能的试剂。 5.权利要求4所述的方法， 其中所述iNKT细胞为未经修饰的野生型iNKT细胞或经基因 编辑后的i NKT细胞， 例如CAR ‑iNKT。 6.通过权利要求1 ‑3任一项的方法筛选的试剂或权利要求4 ‑5任一项的方法筛选的试 剂。 7.权利要求6所述的试剂在制备治疗肿瘤的药物中的用途。 8.Vam6作为靶点在筛 选免疫治疗试剂的方法中的用途。 9.一种用于治疗肿瘤的药物组合物， 其包含权利要求6所述的试剂和iNKT细胞活化剂 和药学上可接受的载体， 其中所述iNKT细胞 活化剂为能够活化iNKT细胞以促进iNKT细胞释 放细胞因子， 例如CD 1d‑PBS57四聚体， α ‑半乳糖基神经酰胺( α ‑GalCer, α ‑GC)及其类似物， 神经节苷脂GD3， 糖磷脂酰肌醇， 磷脂酰乙醇胺， β ‑GalCer， iGb 3及其类似物4 ‑HO‑iGb3和4‑ dh‑iGb3,以及其他可被CD1d呈递的抗原， 携带iNKT细胞抗原的抗原递呈细胞， 以及表达在 CAR‑iNKT表面识别肿瘤抗原的嵌合体受体。 10.一种用于治疗肿瘤的试剂盒， 其包含权利要求9所述的药物组合物， 和任选地经修 饰使得Vam6表达水平降低的野生型iNKT细胞或基因编辑后的iNKT细胞， 例如CAR ‑iNKT， 其 中所述药物组合物和所述经修饰的i NKT细胞置 于不同的容器中。 11.权利要求7的用途、 权利要求9的药物 组合物或权利要求10的试剂 盒， 其中所述肿瘤 为包括实体瘤和非实体瘤， 包括但不限于： 鼻腔及鼻窦恶性肿瘤、 鼻咽癌、 口腔癌、 喉癌、 涎 腺肿瘤、 颅内肿瘤、 甲状腺癌、 舌癌、 肺癌、 食管癌、 贲门癌、 乳 腺癌、 纵膈肿瘤、 胃癌、 大肠癌、权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115216514 A 2乙状结肠和直肠癌、 肝癌、 胰腺癌与壶腹周围癌、 胆道癌、 小肠肿瘤、 肾癌、 前列腺癌、 膀胱 癌、 睾丸恶性肿 瘤、 阴茎癌、 子宫颈癌、 子宫内膜癌、 卵巢癌、 纤维组织细胞瘤、 横纹肌肉瘤、 滑膜肉瘤、 黑色素瘤、 骨肉瘤、 尤文氏肉瘤、 淋巴瘤、 多发性骨髓瘤、 白血病， 优选地， 所述肿 瘤为黑色素瘤。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115216514 A 3