(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210852024.4 (22)申请日 2022.07.19 (71)申请人 上海大学 地址 200444 上海市宝山区上 大路99号 (72)发明人 文铁桥　孙阳阳　周海聪　刘芳　 (74)专利代理 机构 上海上大专利事务所(普通 合伙) 3120 5 专利代理师 顾勇华 (51)Int.Cl. A61K 31/7088(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C12N 15/12(2006.01) (54)发明名称 一种dcf1 mRNA用于制备抑制脑胶质瘤细胞 生长的药物的应用 (57)摘要 本发明提出了一种dcf1mRNA用于制备抑制 脑胶质瘤细胞生长的药物的应用， 采用体外合成 的dcf1mRNA抑制脑胶质 瘤细胞增殖并致脑胶质 瘤细胞死亡， 包括mRNA表达载体构建、 mRNA合成 与制备、 脑胶质瘤细胞生长抑制与凋亡。 本发明 提供的mRNA转染U251细胞后， 发现mRNA翻译成相 应蛋白质， 流式细胞仪检测、 荧光标记检测均证 实脑胶质瘤细胞显著性死亡。 本发 明在抑制脑胶 质瘤细胞生长促进脑胶质瘤凋亡上有良好的应 用。 权利要求书1页 说明书3页 附图3页 CN 115227707 A 2022.10.25 CN 115227707 A 1.一种dcf1mRNA用于制备抑制脑胶质 瘤细胞生长的药物的应用， 其特征在于： 在体外 合成dcf1mRNA， 具有5 ’帽子序列和3 ’polyA序列； 制备用于抑制脑胶质瘤细胞增殖并致脑胶 质瘤细胞死亡的药物。 2.根据权利要求1所述dcf1mRNA用于制备抑制脑胶质 瘤细胞生长的药物的应用， 其特 征在于： 由dcf1mRNA合成的DCF1蛋白质， 对脑胶质瘤 细胞生长抑制与致死作用。 3.根据权利要求1所述dcf1mRNA用于制备抑制脑胶质 瘤细胞生长的药物的应用， 其特 征在于： 体外合成 的鼠源dc f1mRNA， 通过对鼠源dc f1mRNA在5 ’端加帽子结构和3 ’端加尾结 构， 形成稳定mRNA， 对脑胶质瘤 细胞生长抑制与致死作用。 4.根据权利要求1所述dcf1mRNA用于制备抑制脑胶质 瘤细胞生长的药物的应用， 其特 征在于： 体外合成 的人源dc f1mRNA， 通过对人源dc f1mRNA在5 ’端加帽子结构和3 ’端加尾结 构， 形成稳定mRNA， 对脑胶质瘤 细胞生长抑制与致死作用。 5.根据权利要求1所述dcf1mRNA用于制备抑制脑胶质 瘤细胞生长的药物的应用， 其特 征在于： 通过对dcf1mRNA序列改变、 修饰， 对脑胶质瘤 细胞生长抑制与致死作用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115227707 A 2一种dcf1 mRNA用于制备抑制脑胶质瘤细胞生长的药物的 应用 技术领域 [0001]本发明涉及 一种脑胶质瘤细胞生长抑制的重大肿瘤疾病治疗， 属于生物医学技术 领域。 背景技术 [0002]恶性胶质瘤是目前较为常见、 致死率较高以及较难治疗的脑部恶性肿瘤， 其源自 神经上皮， 约占颅脑肿 瘤的40％～50％， 是最常见的颅内恶性肿 瘤。 据统计， 胶质瘤年发病 率为3～8人/10万人口， 并且与世界各国的生活水平医疗水平 等密切相关， 是成人中最具侵 略性、 最致命和最普遍的脑恶性肿瘤。 目前主要的治疗方法包括外科手术、 放射治疗、 化学 治疗， 但手术治疗后复发率高， 预后性差， 放射治疗、 化学治疗副作用往往超出患者 耐受力， 令人痛苦不堪， 即使实施外科手术加上放化疗， 患者术后的生存期仅为维持在14 ‑16个月， 目前缺乏有效的脑胶质瘤治疗方法。 [0003]mRNA药物被称为肿瘤治疗领域 的后起之秀。 将体外合成的mRNA分子送入细胞中， 利用细胞质内的自有核苷酸进行转录表达， 生成机体所需要的蛋白质， 从而达到治疗的作 用。 不像质粒DNA和病毒载体， mRNA不需要整合到宿主基因组中， 避免了插入基因突变的风 险。 而且进入细胞的外源性mRNA只有瞬时活性， 能够通过生理代谢完全降解， 因此从mRNA药 物入手有望实现肿瘤的有效治疗。 [0004]本发明前期研究表明Dcf1基因对脑胶质瘤细胞生长具有抑制作用， 并进一步研究 发现体外合成的dcf1  mRNA对脑胶质瘤细胞显著性抑制生长， 且至今未见任何dcf1  mRNA及 相关组成 成分用于脑胶质瘤的研究报道。 发明内容 [0005]为了解决现有技术问题， 本发明的目的在于克服已有技术存在的不足， 本发明提 出了一种dcf1  mRNA用于制备抑制脑胶质瘤细胞生长的药物的应用， 所述药物能抑制脑胶 质瘤细胞增殖并致脑胶质瘤细胞死亡， 制备dcf1  mRNA包括mRNA表达载体构建、 鼠源dcf1   mRNA、 人源dcf1  mRNA的体外合成及制备。 本发明提供的mRNA转染U251细胞后， 发现mRNA翻 译成相应蛋白质， 流式细胞仪检测、 荧光标记检测均证实脑胶质瘤细胞显著 性死亡。 本发明 在抑制脑胶质瘤 细胞生长促进脑胶质瘤凋亡 上有显著的优点。 [0006]为达到上述发明创造目的， 本发明采用如下技 术方案： [0007]一种dcf1  mRNA用于制备抑制脑胶质瘤细胞生长的药物的应用， 在体外合成dcf1   mRNA， 具有5 ’帽子序列和3 ’poly A序列； 制备用于抑制脑胶质瘤细胞增殖并致脑胶质瘤细 胞死亡的药物。 [0008]优选地， 由dcf1  mRNA合成的DCF1蛋白质， 对脑胶质瘤 细胞生长抑制与致死作用。 [0009]优选地， 体外合成的 鼠源dcf1  mRNA， 通过对鼠源dcf1  mRNA在5’端加帽子结构和 3’端加尾结构， 形成稳定mRNA， 对脑胶质瘤 细胞生长抑制与致死作用。说　明　书 1/3 页 3 CN 115227707 A 3