(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211172122.X (22)申请日 2022.09.26 (71)申请人 广州医科 大学附属第三医院 （广州 重症孕产妇救治中心、 广州柔济医 院） 地址 510150 广东省广州市多宝路6 3号 (72)发明人 贺超　吴增晖　 (74)专利代理 机构 上海汉声知识产权代理有限 公司 3123 6 专利代理师 陈蕾　胡晶 (51)Int.Cl. A61K 9/127(2006.01) A61K 33/26(2006.01) A61K 47/46(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61K 31/192(2006.01) A61K 31/203(2006.01) (54)发明名称 一种治疗骨肉瘤的复合物及其制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种治疗骨肉瘤的复合物及 其制备方法， 所述制备方法包括以下步骤： 分别 制备全反式维甲酸与脂质体的复合物、 GA ‑Fe复 合物、 骨肉瘤细胞膜脂质体； 制备GA ‑Fe复合物的 水溶液； 将全反式维甲酸与脂质体的复合物、 骨 肉瘤细胞膜脂质体 混合均匀， 超声处理得到杂化 膜； 通过GA ‑Fe复合物的水溶液将杂化膜水化， 超 声处理， 过滤， 即得治疗骨肉瘤的复合物。 通过上 述制备方法制备的一种协同分化治疗和程序性 铁死亡的治疗骨肉瘤的复合物， 具有靶向骨肉瘤 诱导分化治疗并加强铁死亡的治疗效果， 为骨肉 瘤治疗提供了新方向。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 115501185 A 2022.12.23 CN 115501185 A 1.一种治疗骨肉瘤的复合物的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 分别制备全反式维甲酸与脂质体的复合物、 GA ‑Fe复合物、 骨肉瘤 细胞膜脂质体； 制备GA‑Fe复合物的水 溶液； 将全反式维甲酸与脂质体的复合物、 骨肉瘤细胞膜脂质体混合均匀， 超声处理得到杂 化膜； 通过GA‑Fe复合物的水 溶液将杂化膜水化， 超声处 理， 过滤， 即得治疗骨肉瘤的复合物。 2.根据权利要求1所述的治疗骨肉瘤的复合物的制备方法， 其特征在于， 所述全反式维 甲酸与脂质体的复合物通过以下步骤制备而得： 将全反式维甲酸与脂质体溶于氯仿中， 旋 转蒸发去除氯仿， 即得全反式维甲酸与脂质体的复合物。 3.根据权利要求2所述的治疗骨肉瘤的复合物的制备方法， 其特征在于， 所述脂质体为 卵磷脂； 全反式维甲酸与卵磷脂的质量比为1:(20～3 0)。 4.根据权利要求1所述的治疗骨肉瘤的复合物的制备方法， 其特征在于， 所述GA ‑Fe复 合物通过以下步骤制备而得： 将四水合氯化亚铁和聚乙烯吡咯烷酮加入至脱气去离子水中， 搅拌混合均匀， 得到混 合液； 将没食子酸溶液逐滴加入至所述混合液中， 在氮气气氛中进行搅拌， 超滤浓缩， 即得 GA‑Fe复合物。 5.根据权利要求4所述的治疗骨肉瘤的复合物的制备方法， 其特征在于， 所述GA ‑Fe复 合物制备 过程中： 四水合氯化 亚铁和聚乙烯吡咯烷酮的质量比为1:(3～4)； 没食子酸溶 液与混合液的质量比为1:(3 5～45)； 所述没食子酸溶 液的浓度为10mg/mL； 超滤浓缩中， 超滤的截留分子量 为10000Da。 6.根据权利要求1所述的治疗骨肉瘤的复合物的制备方法， 其特征在于， 所述骨肉瘤细 胞膜脂质体通过以下步骤制备而得： (1)、 培养并收集骨肉瘤 细胞， 收集所 得骨肉瘤 细胞用磷酸盐缓冲液冲洗细胞3～5次； (2)、 冲洗所得骨肉瘤细胞用含有苯甲基磺酰氟的去离子水在冰上裂解细胞10～15分 钟， 然后在液氮中冷冻并解冻， 重复3～5个 循环， 离心， 即得骨肉瘤 细胞膜脂质体。 7.根据权利要求6所述的治疗骨肉瘤的复合物的制备方法， 其特征在于， 所述含有苯甲 基磺酰氟的去离 子水中， 苯甲基磺酰氟的浓度为1mM 。 8.根据权利要求1所述的治疗骨肉瘤的复合物的制备方法， 其特征在于， 所述全反式维 甲酸与脂质体的复合物、 骨肉瘤 细胞膜脂质体混合后， 超声处 理得到杂化膜； 其中， 全反式维甲酸与脂质体的复合物、 骨肉瘤细胞膜脂质体混合 时， 全反式维甲酸与 脂质体的复合物、 与骨肉瘤 细胞膜脂质体中细胞膜蛋白的质量比为(20～ 25):1； 超声处理时间为10～15mi n， 超声处 理温度为37℃。 9.根据权利要求1所述的治疗骨肉瘤的复合物的制备 方法， 其特 征在于， 通过GA‑Fe复合物的水溶液将杂化膜水化， 超声处理10～15min， 通过100nm聚碳酸酯膜 挤压滤过8～12次， 即得治疗骨肉瘤的复合物。 10.一种采用如权利要求1 ‑9任一项所述制备 方法制备 所得的治疗骨肉瘤的复合物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115501185 A 2一种治疗骨肉瘤的 复合物及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明属于骨肉瘤治疗药物技术领域， 具体涉及 一种治疗骨肉瘤的复合物及 其制 备方法。 背景技术 [0002]骨肉瘤是儿童和青少年期最常见的原发骨恶性肿瘤， 年发病率约为3/100  万， 男 女发病率约为1.5∶ 1， 大约 80％～90％的骨肉瘤发生于四肢长管状骨干骺端， 尤其是股骨远 端、 胫骨近端和肱骨近端。 1970年以前， 对于无转移的肢体骨肉瘤一般采取截肢手术治疗， 其5年生存率不足20％。 近20年， 尽管国际诸多研究机构进行了大量的努力， 但骨肉瘤生存 率依然停滞不前。 开 发新的骨肉瘤治疗药物并引入新型的治疗理念和策略对于提高骨肉瘤 的治疗及预后尤为重要。 发明内容 [0003]本发明提供了一种治疗骨肉瘤的复合物， 通过构建特异性靶向骨肉瘤的兼具分化 治疗和铁死亡治疗作用的复合药物体系， 实现优异的骨肉瘤治疗效果； 此外， 本发 明还提供 了一种治疗骨肉瘤的复合物的制备 方法。 [0004]本发明第一方面 提供了一种治疗骨肉瘤的复合物的制备 方法， 包括以下步骤： [0005]分别制备全反式维甲酸与脂质体的复合物、 GA ‑Fe复合物、 骨肉瘤 细胞膜脂质体； [0006]制备GA‑Fe复合物的水 溶液； [0007]将全反式维甲酸与脂质体的复合物、 骨肉瘤细胞膜脂质体混合均匀， 超声处理得 到杂化膜； [0008]通过GA‑Fe复合物的水溶液将杂化膜水化， 超声处理， 过滤， 即得治疗骨肉瘤的复 合物。 [0009]在本发明的一实施例中， 所述全反式维甲酸与脂质体的复合物通过以下步骤制备 而得： 将全反式维甲酸与脂质体溶于氯仿中， 旋转蒸发去除氯仿， 即得全反式维甲酸与脂质 体的复合物。 [0010]在本发明的一实施例中， 所述脂质体为卵磷脂； 全反式维甲酸与卵磷脂的质量比 为1:(20～3 0)。 [0011]在本发明的一实施例中， 所述GA ‑Fe复合物通过以下步骤制备而得： [0012]将四水合氯化亚铁和聚乙烯吡咯烷酮加入至脱气去离子水中， 搅拌混合均匀， 得 到混合液； [0013]将没食子酸溶液逐滴加入至所述混合液中， 在氮气气氛中进行搅拌， 超滤浓缩， 即 得GA‑Fe复合物。 [0014]在本发明的一实施例中， 所述GA ‑Fe复合物制备 过程中： [0015]四水合氯化 亚铁和聚乙烯吡咯烷酮的质量比为1:(3～4)； [0016]没食子酸溶 液与混合液的质量比为1:(3 5～45)；说　明　书 1/5 页 3 CN 115501185 A 3