(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210927574.8 (22)申请日 2022.08.03 (71)申请人 邹城市郭山岭生物科技 开发有限公 司 地址 273100 山东省济宁市邹城市看庄镇 郭山村村北 (72)发明人 刘超　孙金月　郭长青　 (74)专利代理 机构 济南泉城专利商标事务所 37218 专利代理师 陈娟 (51)Int.Cl. A61K 36/483(2006.01) A61P 1/16(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 131/00(2006.01) (54)发明名称 一种猪牙皂提取物的制备方法 (57)摘要 本发明属于中药提取物领域， 具体涉及一种 猪牙皂提取物的制备方法。 该方法通过以下步骤 实现： 将猪牙皂粉碎得粗粉采用超临界二氧化碳 萃取， 得超临界提取物； 将超临界提取后的猪牙 皂渣加正丁醇 ‑水的混合溶液， 然后加入纤维素 酶， 进行酶解， 酶解结束后， 灭酶； 将灭酶后的猪 牙皂渣中进行正己烷提取， 得正己烷提取物； 将 正己烷提取物同超临界提取物混合均匀得猪牙 皂提取物。 本发明通过超临界萃取、 正己烷提取 进行组合式提取， 能够将猪牙皂中的有效成分进 行最大程度的萃取， 得到的提取物活性优异， 能 够有效的抑制肝癌细胞生长与增殖。 权利要求书1页 说明书4页 CN 115227737 A 2022.10.25 CN 115227737 A 1.一种猪牙皂提取物的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： （1） 将猪牙皂粉碎得粗粉， 然后加入到萃取罐中， 加入夹带剂溶液， 浸润处理， 然后采用 超临界二氧化 碳萃取， 得超临界提取物； （2） 将超临界提取后的猪牙皂渣加正丁醇 ‑水的混合溶液， 然后加入纤维素酶， 进行酶 解， 酶解结束后， 灭酶； （3） 将灭酶后的猪牙皂渣中进行正己烷 提取， 得正己烷 提取物； （4） 将正己烷 提取物同超临界提取物混合均匀得猪牙皂提取物。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述夹带剂溶液为含有二 辛酯琥珀酸磺酸钠的95%乙醇溶液， 所述二辛酯琥珀酸磺酸钠在乙醇溶液中的浓度为1.5 ‑ 3%； 所述猪牙皂粗粉和夹带剂溶 液的质量比为1： 0.1 ‑0.15； 所述浸润处 理的时间为3 0min。 3.根据权利要求1或2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述超临界萃取的条 件为： 压力为20 ‑25MPa， 首先在30 ‑35℃下萃取15 ‑20min， 然后升温至40 ‑45℃下萃取100 ‑ 120min。 4.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤 （2） 中， 所述正丁醇 ‑水的比例为 10： 1； 所述正丁醇 ‑水的混合溶液的加入量为猪牙皂渣质量的2倍； 所述纤维素酶的加入量 占猪牙皂渣质量的2 %。 5.根据权利要求1或4所述的制备方法， 其特征在于， 步骤 （2） 中， 所述酶解为在30 ‑35℃ 下酶解1.5 h。 6.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤 （3） 中， 所述猪牙皂渣和正己烷的 料液比为1g： 10 ‑15mL。 7.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于， 步骤 （3） 中， 所述提取的时间为60 ‑ 90min。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115227737 A 2一种猪牙皂提取物的制备方 法 技术领域 [0001]本发明属于中药提取物领域， 具体涉及一种猪牙皂提取物的制备 方法。 背景技术 [0002]猪牙皂系豆科苏木亚科皂荚属  (Gleditsia  Linn.)植物皂荚  (Gleditsia   sinensisLain.)的不育果实， 性辛、 咸、 温、 归肺、 大肠经， 具有祛痰开窍、 消肿散结之功效。 该药被中国药典  (2005 年版)收录为常用药品之一， 同时被广泛应用于北京 同仁堂、 杭州 胡庆余堂、 广州陈李济等多家中华老字号药厂的二十余种药品中。 香港理工大学经过约4   年的研究发现， 猪牙皂的浓缩液具有抗癌特性， 可有效抑制血癌及数种人类固体肿瘤， 包括 肝癌、 前列腺癌、 乳癌等癌细胞的生长 。 [0003]临床上多种包含猪牙皂的药物对于肝癌的治疗具有很好的疗效， 例如皂苷胶囊对 肝癌等晚期恶性肿瘤具有确切治疗效果,  服用安全； 软肝消肿止痛膏用于临床治疗晚期肝 癌, 具有安全、 有效、 方便等优点。 大量研究也表明,猪牙皂皂苷提取物具有显著的抗肝癌 活性,Chow  等发现猪牙皂皂苷提取物具有明显的细胞毒作用， 能够抑制肝癌细胞Hep ‑G2  的增殖并诱导其凋亡； 汪红卫等研究表明， 猪牙皂正丁醇提取物 （总皂苷） 能够显著地抑制 人肝癌SMMC ‑7721 细胞的生长； 鸡胚尿囊膜试验表 明， 猪牙皂总皂苷能够减少纤维原细胞 生长因子  (VEGF)的合 成； 猪牙皂通过抑制肿瘤细胞周围血管的再生， 促进肝癌细胞的迅速 凋亡， 可作为治疗肿瘤的天然化疗药物。 [0004]目前， 对于猪牙皂的提取多针对皂苷、 多糖类 的有效成分， 并对其加以研究， 对于 猪牙皂中的其 他成分的利用率较低。 发明内容 [0005]针对现有技 术中存在的问题， 本发明提供了一种猪牙皂提取物的制备 方法。 [0006]本发明为了实现上述目的所采用的技 术方案为： 本发明提供了一种猪牙皂提取物的制备 方法， 包括以下步骤： （1） 将猪牙皂粉碎得粗粉， 然后加入到萃取罐中， 加入夹带剂溶液， 浸润处理， 然后 采用超临界二氧化 碳萃取， 得超临界提取物； （2） 将超临界提取后的猪牙皂渣加正丁醇 ‑水的混合溶液， 然后加入纤维素酶， 进 行酶解， 酶解结束后， 灭酶； （3） 将灭酶后的猪牙皂渣中进行正己烷 提取， 得正己烷 提取物； （4） 将正己烷 提取物同超临界提取物混合均匀得猪牙皂提取物。 [0007]进一步的， 步骤 （1） 中， 所述夹带剂溶液为含有二辛酯琥珀酸磺酸钠的95%乙醇溶 液， 所述二辛酯琥珀酸磺酸钠在乙醇溶液中的浓度为1.5 ‑3%； 所述猪牙皂粗粉和 夹带剂溶 液的质量比为1： 0.1 ‑0.15； 所述浸润处 理的时间为3 0min。 [0008]进一步的， 步骤 （1） 中， 所述超临界萃取的条件为： 压力为20 ‑25MPa， 首先在30 ‑35 ℃下萃取15 ‑20min， 然后升温至40 ‑45℃下萃取10 0‑120min。说　明　书 1/4 页 3 CN 115227737 A 3