(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211229101.7 (22)申请日 2022.10.09 (71)申请人 宋杨一嫣 地址 430060 湖北省武汉市武昌区解 放路 238号武汉大 学人民医院 (72)发明人 宋杨一嫣 　曾俊芬　李丹　彭燕　 罗毅　沈秉正　张玲莉　 (74)专利代理 机构 北京润平知识产权代理有限 公司 11283 专利代理师 严政 (51)Int.Cl. A61K 9/107(2006.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 47/60(2017.01) A61K 47/69(2017.01)A61K 31/704(2006.01) A61K 31/4725(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C07D 475/04(2006.01) (54)发明名称 一种甲基莲心碱/阿霉素纳米 混合胶束及其 制备方法 (57)摘要 本发明涉及纳米制药技术领域， 公开了一种 甲基莲心碱/阿霉素纳米混合胶束及其制备方 法， 该方法包括以下步骤： (1)将两亲性聚合物与 1,1‑羰基二咪唑反应， 得到第一产物； (2)将第一 产物与经氨基化修饰后的叶酸反应， 得到中间物 A； (3)将第一产物进行氨基化修饰后， 与盐酸阿 霉素反应， 得到中间物B； (4)将甲基莲心 碱、 中间 物A、 中间物B与有机 溶剂混合， 得到混合液， 将水 与混合液混合并搅拌， 得到胶束原液； (5)将胶束 原液用水进行透析。 通过将甲基莲心碱和阿霉素 联用， 同时结合纳米给药系统(胶束)， 从而增强 了阿霉素对肿瘤细胞的生长抑制作用， 提高了肿 瘤细胞对阿霉素的敏感性， 降低了阿霉素的毒 性， 且能逆转肿瘤MDR作用。 权利要求书1页 说明书8页 附图5页 CN 115531310 A 2022.12.30 CN 115531310 A 1.一种甲基莲心碱/阿霉素纳米混合胶束的制备方法， 其特征在于， 该方法包括以下步 骤： (1)将两亲性聚合物与1,1 ‑羰基二咪唑反应， 得到第一产物； (2)将所述第一产物与经氨基化 修饰后的叶酸反应， 得到中间物 A； (3)将所述第一产物进行氨基化 修饰后， 与盐酸阿霉素反应， 得到中间物B； (4)将所述甲基莲心碱、 中间物A、 中间物B与有机溶剂混合， 得到混合液， 将水与所述混 合液混合并搅拌， 得到胶束原液； (5)将所述胶束原液用水进行透析。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 所述两亲性聚合物为脂肪醇聚 氧乙烯醚。 3.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述脂肪醇聚氧乙烯醚为十八烷醇聚氧乙 烯醚； 优选地， 所述十八烷醇聚氧乙烯醚的数均分子量 为4000～5000。 4.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(2)中， 所述氨基化修饰的叶酸按照以 下工序制备： 叶酸溶液与N‑羟基琥珀酰 亚胺在缩合剂的存在下反应， 得到混合物； 将所述混合物与乙二胺和吡啶反应， 然后分离纯化。 5.根据权利要求 4所述的方法， 其特 征在于， 所述叶酸溶 液的溶剂为 二甲基亚砜； 优选地， 所述缩合剂为 二环己基碳 二亚胺。 6.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(3)中， 所述第一产物进行氨基化修饰 的过程包括： 将第一产物、 肼、 三乙胺和二氯甲烷混合， 然后分离纯化。 7.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(4)中， 所述有机溶剂选自四氢呋喃、 乙腈和二甲基亚砜中的至少一种， 优选为 二甲基亚砜。 8.根据权利 要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(4)中， 所述甲基莲心碱、 中间物A和中 间物B的重量比为1～3： 1～3： 10； 优选地， 步骤(4)中， 所述搅拌的时间为1～4h 。 9.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(5)中， 所述透析所用的透析袋的截留 分子量为3500Da。 10.权利要求1 ‑9任意一项所述的方法制得的 甲基莲心碱 /阿霉素纳米混合胶束。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115531310 A 2一种甲基莲心碱/阿霉素纳米混合胶束及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及纳米制 药技术领域， 具体涉及一种甲基莲心碱/阿霉素纳米混合胶束 及其制备 方法。 背景技术 [0002]癌症(即恶性肿瘤)是目前世界上致死率最高的疾病之一， 化疗是治疗癌症的主要 手段。 在肿瘤的化疗中， 抗肿瘤药物存在着严重的副作用， 由于缺乏对肿瘤的选择性及多 药 耐药性， 容易导致疗效的下降及肿瘤的复发。 肿瘤耐药是指肿瘤细胞对化疗药物不敏感， 即 肿瘤细胞接触某种化疗药物后， 不仅对该药物产生耐药性， 而且对另一些未 曾接触与之化 学 结 构 和 作 用 机 制 完 全 不 同 的 药 物 也 产 生 交 叉 耐 药 ，表 现 为 多 药 耐 药 (multidrugresistance,MDR)。 [0003]经典的理论认为ABC(ATP ‑binding cassette)转运蛋白是细胞膜上的一种生物 泵， 影响药物在细胞内的蓄积， 其中表达最普遍且与肿瘤MDR的发生密切相关的为P ‑糖蛋白 (P‑gp)、 多药耐药相关蛋 白(MRP2)及乳腺癌耐药蛋 白(BCRP)。 这些转运蛋 白的过度表达将 会将抗癌药物转到细胞外， 降低细胞内的药物浓度， 导致MDR的发生； 同时研究显示凋亡因 子如Bcl ‑2、 Survivin、 NF ‑κB等的过度表达或促凋亡信号分子如Bax、 P53、 Capase ‑3、 Caspase‑8、 Caspase ‑9等的缺失都将导致肿瘤细胞产生耐药性。 克服肿瘤的MDR， 提高化疗 药物的疗效， 是当今癌症治疗的重要课题。 目前克服肿瘤MDR的策略主要包括： (1)对肿瘤药 物进行结构改造， 研制不易产生耐药性的抗癌药物； (2)应用基因治疗等生物 技术逆转MDR； (3)开发具有P‑gp抑制作用的化疗增敏剂。 其中， 基因治疗 药物体内不稳定， 易被肝脏破坏， 半衰期短， 较难达到肿瘤 而发挥药效； 而大部 分化疗增敏剂专属性差， 过度抑制P ‑gp而阻断 正常组织对化学药物的外排而产生较大的毒副作用， 未能应用于临床 。 因此， 研究者想到发 展纳米技术用于癌症治疗， 其中主要集中于纳米药物传递系统的开 发。 纳米给药系统， 能将 化疗药物包裹于载体材料中而避免MDR相关外排转运蛋白的识别、 结合和外排， 增加药物在 肿瘤细胞内的浓度， 提高肿瘤对化疗药物的敏感性， 降低化疗 药物对正常组织的毒副作用， 能作为一种新型的逆转MDR策略而被广泛的证明和认可。 克服肿瘤MDR的纳米给药系统包括 纳米粒脂质体、 胶束等。 [0004]盐酸阿霉素(Doxorubicin,Dox)是蒽环类抗肿瘤抗生素， 抗癌谱广， 疗效好， 是目 前临床上应用最多也是最成功的一种高效、 广谱的抗肿瘤药物之一。 主要用于治疗急性白 血病、 淋巴瘤、 乳 腺癌、 肺癌及 多种其他 实体肿瘤。 其主要作用机制是直接嵌入DNA核碱基对 之间， 干扰转录过程， 阻止mRNA的形成而产生抗肿瘤作用。 但阿霉素毒性较大， 对正常组织 和器官如心脏、 肾脏、 骨髓等具有明显的毒副作用。 尤其心脏毒性作用随着用药剂量的增 加， 心肌损伤的临床症状逐渐加重， 目前尚无有效的预防和治疗手段。 阿霉素的心脏毒性在 一定程度上大大 的限制了其抗肿瘤的作用的发挥， 如何降低阿霉素毒性， 开发抗肿瘤的治 疗策略是目前的当务之急。说　明　书 1/8 页 3 CN 115531310 A 3