(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210892637.0 (22)申请日 2022.07.27 (71)申请人 苏州大学 地址 215137 江苏省苏州市相城区济学路8 号 (72)发明人 陈华兵　邓益斌　翟艳华　刘明　 柯亨特　李厅　杨涛　杨一帆　 张芳蕊　 (74)专利代理 机构 苏州创元专利商标事务所有 限公司 3210 3 专利代理师 孙周强　陶海锋 (51)Int.Cl. A61K 33/36(2006.01) A61K 9/51(2006.01) A61K 9/08(2006.01)A61K 9/19(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (54)发明名称 一种砷剂蛋白质纳米制剂在肿瘤免疫协同 治疗相关方面的应用 (57)摘要 本发明公开了一种砷剂蛋白质纳米制剂在 肿瘤免疫协同治疗相关方面的应用。 本发明制备 的砷剂蛋白质纳米制剂粒径适中、 分散均匀， 具 有良好的肿瘤细胞毒性作用， 并诱导其发生免疫 原性细胞死亡， 可与免疫检查点疗法协同增强抗 肿瘤疗效。 本发 明提供的砷剂蛋白质纳米制剂 包 括亚砷酸锰、 二氧化锰与蛋白质， 其显著的优势 在于增强砷剂诱导的肿瘤细胞免疫源性细胞死 亡， 有效产生肿瘤相关抗原和损伤相关模式分 子， 从而发挥免疫治疗作用， 首次实现了砷剂化 疗及其免疫治疗的有机融合， 解决了砷剂在治疗 实体肿瘤中面临的抗肿瘤转移及抑制肿瘤复发 等治疗效果不理想的问题， 将化疗 药物砷剂拓展 至免疫治疗协同， 为提升砷剂的实体瘤治疗奠定 了物质和科 学基础。 权利要求书1页 说明书8页 附图7页 CN 115252645 A 2022.11.01 CN 115252645 A 1.砷剂蛋白质纳米制 剂或者砷剂蛋白质纳米制 剂冻干粉在制备抑制原位瘤、 转移瘤或 肿瘤复发的药物中的应用。 2.砷剂蛋白质纳米制剂或者砷剂蛋白质纳米制剂冻干粉在制备肿瘤免疫协同治疗药 物中的应用。 3.砷剂蛋白质纳米制剂或者砷剂蛋白质纳米制剂冻干粉在制备提高肿瘤免疫治疗效 果的药物中的应用。 4.根据权利要求1、 2或者3所述的应用， 其特征在于， 所述砷剂蛋白质纳米制剂的制备 方法包括以下步骤： 将金属离子水溶液与蛋白质水溶液混合得到 混合液1， 将砷剂药物水溶 液与混合液1混合得到混合液2， 然后调节混合液2的pH值， 搅拌反应后纯化， 得到砷剂蛋白 质纳米制剂； 将砷剂蛋白质纳米制剂溶液与冻干保护剂溶液混合， 冷冻干燥后得到砷剂蛋 白质纳米制剂冻干粉。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 调节混合液2的pH值为8～12， 然后20～55   ℃搅拌反应2～8 h； 纯化的方法为超滤或凝胶色谱分离 。 6.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述蛋白质为白蛋白、 转铁蛋白、 血红蛋 白、 低密度脂蛋白中的一种或几种； 所述砷剂药物为亚砷酸盐； 所述砷剂蛋白质纳米制剂的 载药量为1%～20%。 7.根据权利要求 4所述的应用， 其特 征在于， 亚砷酸 根与蛋白质的摩尔比为(5 0～300) :  1； 亚砷酸 根与金属离 子的摩尔比为(1～5)  : 1； 所述蛋白质水 溶液的浓度为2 ～20 mg/mL。 8.一种肿瘤免疫协同治疗药物， 其特征在于， 其活性成分为砷剂蛋白质纳米制剂与免 疫药物。 9.权利要求8所述肿瘤免疫协同治疗药物在制备抑制原位瘤、 转移瘤或肿瘤复发的药 物中的应用。 10.砷剂蛋白质纳米制剂或者砷剂蛋白质纳米制剂冻干粉在制备诱导肿瘤细胞发生免 疫原性细胞 死亡的药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115252645 A 2一种砷剂蛋白质纳米制剂在肿瘤免疫协同治疗相关方 面的 应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术， 具体涉及砷剂药物蛋白质纳米粒及其制备方法和应 用， 尤其是一种砷剂蛋白质纳米制剂在肿瘤免疫协同治疗相关方面的应用。 背景技术 [0002]三氧化二砷 （arsenic  trioxide， ATO） 的水溶液， 即亚砷酸注射液 （砷剂） ， 是用于 急性早幼粒细胞白血病的一线抗癌药物。 ATO参与胞内多种信号通路 并影响细胞功能， 诱导 细胞凋亡、 改变体内氧化还原状态、 参与调控分子伴侣蛋白的作用、 影响蛋白激酶和蛋白磷 酸酶、 抑制血管生成、 促进细胞分化。 随着ATO在治疗急性早幼粒细胞白血病中的成功， ATO 治疗其它 血液肿瘤和实体瘤的研究也逐渐受到关注。 研究发现， 砷剂对肝癌等实体瘤具有 一定的疗效， 但需要 更高的剂量才能达到治疗效果， 而高剂量砷剂易导致严重的毒副作用。 因此， 设计具有肿瘤 靶向性的砷剂纳米载体， 对降低三氧化二砷的毒副作用， 提高其在实体 瘤治疗中的疗效具有重要意义。 纳米药物载体(如聚合物胶 束、 脂质体、 介孔硅等)可对此改 善， 然而， 目前临床上还未有砷剂纳米药物的应用。 [0003]以蛋白质为基础的纳米载体作为临床转化载体由于具有较好的生物相容性和增 强的渗透和滞留效应而引起了广泛关注， 诸多蛋白质载体的纳米药物进入临床试验或临床 应用， 白蛋白结合 型紫杉醇纳米颗粒 （Abraxan eTM， 直径约130  nm） 和其他一些蛋白质基纳米 药物的临床应用成功证明了这一点。 白蛋白作为一种能量物质， 任何细胞在生长过程中都 需要摄取， 特别是生长较快的肿瘤细胞， 其表面表达了白蛋白结合受体gp60， 通过结合白蛋 白， 进一步结合另一蛋白cav eolin‑1， 通过结合这一蛋白跨越内皮细胞， 同时肿瘤细胞高表 达的SPARC蛋白可以结合白蛋白， 促进白蛋白在肿瘤部位的蓄积。 白蛋白的这一特性使白蛋 白作为一种药物载体在肿瘤诊断、 治疗和递送方面的应用广泛且具有探索性。 另外， 免疫原 性细胞死亡 （i mmunogenic  cell death， ICD） 是细胞的一种死亡形式， 通过释放肿瘤相关特 异性抗原以诱导生命体免疫系统产生免疫应答， 但是砷剂及砷剂纳米药物的ICD效应未见 报道。 发明内容 [0004]针对现有技术， 本发明的目的在于提供一种具有免疫协同治疗作用的砷剂药物蛋 白质纳米制剂及其制备 方法和应用。 [0005]为达到此发明目的， 本发明采用以下技 术方案： 砷剂蛋白质纳 米制剂或者砷剂蛋白质纳米制剂冻干粉在制备抑制原位瘤、 转移瘤 或肿瘤复发的药物中的应用。 [0006]砷剂蛋白质纳米制剂或者砷剂蛋白质纳米制剂冻干粉在制 备肿瘤免疫协同治疗 药物中的应用。 [0007]砷剂蛋白质纳米制剂或者砷剂蛋白质纳米制剂冻干粉在制 备提高肿瘤免疫治疗说　明　书 1/8 页 3 CN 115252645 A 3