(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210906564.6 (22)申请日 2022.07.29 (71)申请人 河南大学 地址 475000 河南省开封市顺河回族区明 伦街85号 (72)发明人 师冰洋　郑蒙　刘洋　刘润涵　 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 专利代理师 姚大雷 (51)Int.Cl. C07K 16/00(2006.01) C07K 14/00(2006.01) C12N 15/115(2010.01) A61K 45/00(2006.01) A61K 47/68(2017.01)A61P 3/00(2006.01) A61P 7/00(2006.01) A61P 25/00(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 37/02(2006.01) (54)发明名称 一种纳米蛋白降解工具、 应用及其制备方法 (57)摘要 本发明提供一种纳米蛋白降解工具、 应用及 其制备方法。 其中， 所述纳米蛋白降解工具包括： 第一降解工具、 第二降解工具和第三降解工具中 的一种或多种组合； 其中， 第一降解工 具由POI识 别基团与连接臂连接构成； 第二降解工具由POI 识别基团与纳米颗粒连接构成； 第三降解工具由 POI识别基团通过连接臂与纳米颗粒连接构成。 本发明实现了基于纳米 粒子的TPD ‑NP的组装， 使 得构建蛋白降解工具的合 成难度极大降低， 通过 “即插即用 ”模式， 实现海量与靶蛋白具有结合力 的化合物、 多肽、 抗体、 核 酸适配体能够升级成为 蛋白降解类药物， 进而进行转化医学/精准医学 的疗法开发。 TPD ‑NP的发明和其机制的探索， 大 大扩展了目前TPD工 具的范围， 并为TPD和纳米递 送领域提供了基础知识， 并且原则上可以在体内 降解多种人类疾病相关的细胞外/膜相关/细胞 内蛋白。 权利要求书2页 说明书20页 附图25页 CN 115043932 A 2022.09.13 CN 115043932 A 1.一种纳米蛋白降解工具， 其特征在于， 包括： 第一降解工具、 第二降解工具和第三降 解工具中的一种或多种组合； 其中， 所述第一降解工具由POI识别基团与连接臂连接构成； 所述第二降解工具由所述 POI识别基团与纳米颗粒连接构成； 所述第三降解工具由所述POI识别基团通过所述连接臂 与所述纳米颗粒 连接构成； 所述POI识别基团包括能与POI特异性结合的抗体、 蛋白、 多肽、 核酸 适配体或小分子 。 2.如权利要求1所述纳米蛋白降解工具， 其特 征在于， 所述第一降解工具中， 所述POI识别基团与所述连接臂构成一组连接单元； 所述第一降 解工具是 由多组以所述连接臂设于核心处， 以与所述连接臂连接的所述POI识别基团设于 外围的所述连接单 元组成的具有 多层结构的所述纳米蛋白降解工具； 所述第二降解工具是由所述纳米颗粒设于核心处， 并且以与 所述纳米颗粒连接的多个 所述POI识别基团设于 外围的连接单 元组成的具有 多层结构的所述纳米蛋白降解工具； 所述第三降解工具中， 所述POI识别基团通过所述连接臂与所述纳米颗粒连接； 所述第 三降解工具是由所述纳米颗粒设于核心处， 以与所述纳米颗粒连接的多组所述连接臂设于 中间层， 并且由与所述连接臂连接的所述POI识别基团设于外围的连接单元组成的具有多 层结构的所述纳米蛋白降解工具。 3.如权利要求1所述纳米蛋白降解工具， 其特 征在于， 所述连接臂包括亲 水聚合物、 疏 水聚合物和两亲性聚合物； 优选地， 所述连接臂的分子量 为0‑1000kDa； 优选地， 所述两亲性聚合物包括： 两亲性嵌段聚合物和所述亲水聚合物与疏水小分子 组成的两亲性聚合物， 以及所述疏 水聚合物与亲 水小分子组成的两亲性聚合物。 4.如权利要求3所述纳米蛋白降解工具， 其特征在于， 所述两亲性聚合物为链状/支化 分子结构的聚合物， 其至少存在一个具有亲 水性的分子端， 以及一个具有疏 水性的分子端； 优选地， 所述两亲性 聚合物为直链分子结构， 其一端为亲水性的分子端， 另一端为具有 疏水性的分子端。 5.如权利要求3所述纳米 蛋白降解工具， 其特征在于， 所述纳米颗粒包括表面单一纳米 颗粒和杂化纳米颗粒； 所述表面单一纳米颗粒包括亲 水性颗粒、 疏 水性颗粒和无机纳米颗粒； 所述杂化纳米颗粒为 通过杂化物质对所述表面单一纳米颗粒改性后的杂化纳米颗粒； 其中， 所述杂化物质为改性膜； 所述改性膜包括细胞膜、 外泌体、 油膜、 水凝胶和脂质 体； 优选地， 所述杂化纳米颗粒为通过所述改性膜包覆于所述表面单一纳米颗粒外表面构 成的颗粒， 以便于所述表面单一纳米颗粒在改性成为所述杂化纳米颗粒后， 能与所述亲水 聚合物或疏水聚合物的臂相连接， 或者与所述两亲性聚合物的臂相连接； 或者与所述POI识 别基团相连接； 所述纳米颗粒的粒径为5 ‑1000nm。 6.如权利要求5所述纳米蛋白降解工具， 其特 征在于， 所述第三降解工具中， 所述纳米颗粒为疏水性颗粒、 亲水性颗粒或所述表面单一纳米 颗粒外包覆有 所述改性膜， 且所述连接臂 为两亲性聚合物、 亲水聚合物或者疏水聚合物时，权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115043932 A 2所述连接臂与所述纳米颗粒的连接方式包括： 所述连接臂通过非共价键合于所述纳米颗粒 上， 或者， 通过 所述连接臂上修饰的活性基团共价键合于所述纳米颗粒 上。 7.如权利要求1所述纳米蛋白降解工具， 其特 征在于， 所述POI识别基团中的抗体为治疗性单克隆抗体、 多特异性抗体、 纳米抗体及前述抗体 衍生物或抗体偶联 药物； 所述多肽为具有POI特异性结合能力的多肽； 所述小分子为具POI特异性结合能力的小分子化 合物。 8.一种如权利要求1 ‑7任一项所述纳米蛋白降解工具， 在制备治疗和预防蛋白异常积 累疾病的药物、 疫苗、 递送载体中的应用； 其中， 所述蛋白异常积累疾病包括肿瘤、 免疫系统 疾病、 炎症和病原体感染、 神经 退行性疾病 、 血液系统疾病和代谢类疾病。 9.一种如权利要求1 ‑7任一项所述纳米蛋白降解工具， 在制备针对蛋白异常积累疾病 的检测产品/试剂盒 中的应用； 其中， 所述蛋白异常积累疾病包括肿瘤、 免疫系统疾病、 炎症 和病原体感染、 神经 退行性疾病 、 血液系统疾病和代谢类疾病。 10.一种如权利要求1 ‑7任一项所述纳米蛋白降解工具的制备 方法， 其特 征在于， 包括： 针对于所述第一降解工具和所述第二降解工具的制备， 包括： 将所述POI识别基团通过 非共价键合到所述纳米颗粒或连接臂上， 或者， 将所述POI识别基团基于活性基团通过共价 键合到所述纳米颗粒或连接臂上， 从而构成所述纳米蛋白降解工具； 针对于所述第三降解工具的制备， 包括： 先将所述POI识别基团与所述连接臂偶联， 构 成偶联中间体； 然后将所述偶联中间体连 接到所述颗粒核心部上， 构成所述第三降解工具； 或者， 先构建由连接臂作为外层且由纳米颗粒作为核心的纳米复合结构； 再将所述POI 识别基团与所述纳米颗粒的复合结构偶联， 构成所述纳米蛋白降解工具。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115043932 A 3