(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211068987.1 (22)申请日 2022.08.30 (71)申请人 沈阳医学院附属中心医院 地址 110001 辽宁省沈阳市铁西区南七西 路5号沈阳医学院附属中心医院 (72)发明人 王晓萍　 (74)专利代理 机构 沈阳晨创科技专利代理有限 责任公司 210 01 专利代理师 张晨 (51)Int.Cl. A61K 47/54(2017.01) A61K 47/34(2017.01) A61K 47/32(2006.01) A61K 47/60(2017.01) A61K 47/58(2017.01)A61K 47/68(2017.01) A61K 47/69(2017.01) A61K 31/337(2006.01) A61K 31/7105(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种肿瘤干细胞分级靶向聚离子复合物胶 束 (57)摘要 本申请针对肿瘤干细胞生长信号通路及调 控肿瘤干细胞程序性凋亡， 构建肿瘤干细胞生长 调节基因及线粒体集成靶向自组装聚离子复合 物胶束， 选用三苯基膦 ‑多西紫杉醇偶联物TPP ‑ DTX和两嵌段共聚物PLA ‑SS‑PEI制备胶束， 以 anti‑PTK7为靶向分子修饰载药胶束PSPT表面， 经与基因药物miR ‑31形成胶束复合物。 胶束复合 物与聚合物胶束按照一定的浓度比共孵育得到 最终的种瘤干细胞分级 靶向聚离 子复合物胶束。 权利要求书1页 说明书4页 CN 115463222 A 2022.12.13 CN 115463222 A 1.一种肿瘤干细胞分级靶向聚离子复合物胶束， 其特征在于， 所述聚离子复合物胶束 的制备方法为： (1)将两嵌段共聚物PSP与三苯基膦 ‑多西紫杉醇偶联物TPP ‑DTX共同溶解于无水甲醇 中， 旋转蒸发得到均匀薄膜， 将薄膜用双蒸水 经探头超声， 过膜得 载药胶束PSPT； (2)载药胶束PSPT与miR ‑31在水溶液中孵育得到共载miRNA与药物的共聚物胶束， 分别 以共聚物胶束与miRNA的复合 比、 复合物稳定性、 粒径和粒径分布、 ζ ‑电位因素优化确定 miRNA复合物胶 束的制备工艺； 将miRNA复合物胶 束与靶向分子抗体共孵育得到具有靶向肿 瘤干细胞的胶束复合物P SPTR； (3)胶束复合物PSPTR与聚合物胶束mPEG ‑b‑PSD共孵育得到最终的种瘤干细胞分级靶 向聚离子复合物胶束。 2.按照权利要求1所述肿瘤干细胞分级靶向聚离子复合物胶束， 其特征在于： 以粒径， ζ‑电位， 血清稳定性作为优化指标制得最终所述的聚离 子复合物胶束。 3.按照权利要求2所述肿瘤干细胞分级靶向聚离子复合物胶束， 其特征在于： 分别制备 两嵌断共聚物PSP， 载药胶束PSPT， 胶束复合物PSPTR， 聚离子复合物胶束mPSPTR以及相对应 的包载香豆素 ‑6荧光探针和FAM ‑miRNA的制剂作为 参比制剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115463222 A 2一种肿瘤干细胞分级靶向聚离 子复合物胶束 技术领域 [0001]本发明属于药物制剂领域， 特别提供一种肿瘤干细胞分级靶向聚离子复合物胶 束。 背景技术 [0002]肿瘤干细胞(TICs)靶向治疗成败的关键是具备高效、 安全、 稳定的载体。 复合物靶 向载体在到达肿瘤干细胞TICs过程中会遇到多重障碍， 包括： ①循环系统中巨噬细胞的吞 噬；②能否靶向到肿瘤组织并在肿瘤部位浓集； ③载体的粒径能否穿透过肿瘤组织到达深 部的肿瘤干细胞TICs。 Sun[1]等制备了PEG ‑b‑PLA嵌段共聚物包裹阿霉素和全反式维甲酸 (NPATRA/DOX)靶向至肿瘤干细胞TICs。 该制剂的粒径在150nm， 虽然其PEG外壳可保证纳米 粒在循环系统中稳定存在， 但由于其较大 的粒径无法有效跨过肿瘤组织致密的屏障， 因此 其无法高效的富集于肿 瘤干细胞TICs附近。 Wang[2]课题组制备了聚乙二醇 ‑环己亚胺甲基 丙烯酸乙酯修饰的聚酰胺 ‑胺树状大分子(PEG ‑PAEMA‑PAMAM)的“粒径可控式 ”纳米粒用于 递送抗肿瘤药物。 该聚合物在正常pH值下粒径约100nm， 在肿瘤偏酸的微环 境中， PAEMA中的 环己亚胺发生质子化， 由原本的疏水变为亲水， 迅速减小粒径(～10nm)具有 更高的穿透性。 然而， 由于没用靶向配体修饰故该制剂只能通过 “被动靶向 ”过程到达肿瘤细胞周围， 且大 部分药物只能在肿瘤细胞外蓄积而无法到达肿瘤内部。 即使药物进入肿瘤内部， 释放也较 为缓慢， 无法快速在肿瘤细胞内蓄积。 因此， 精准的控制粒径， 使其在循环系统中粒径较大 避免网状内皮系统的吞噬， 而在到达肿瘤组织时粒径较小且具备高效的肿瘤组织穿透性是 肿瘤干细胞TICs靶向治疗行之有效的治疗策略。 [0003]另外， 在载体外进行靶向配体修饰也是提高肿瘤干细胞TICs靶向性的有效途径。 肿瘤干细胞表面通常有CD44、 CD133高表达。 基于该理论， Jaafari[3]等人制备了CD44单抗修 饰的阿霉素脂质体(CD44 ‑Doxil)， 体外实验结果表明， 该制剂可显著增加肿瘤干细胞TICs 对载体的摄取， 增加阿霉素在肿瘤干细胞TICs中的蓄积 。 Panyam[4]课题组设计了CD133抗体 修饰的PLGA纳米粒递药系统(CD133NPs)用于体外细胞干细胞递送抗肿瘤药物紫杉醇， 结果 表明该纳米粒能有效靶向将药物递送至干细胞内。 然而， 这些受体虽在病灶部位细胞表面 有高表达但在体内其他正常组织和细胞表面也有表达， 这就使得靶向药物传递因缺乏特异 性而靶向效率低下。 因此， 寻找针对肿瘤干细胞表面特异性靶点对于肿瘤治疗具有非常重 要的意义。 [0004]蛋白酪氨酸激酶 ‑7(PTK7)已经被Science杂志证实在人三阴性乳腺癌(TNBC)、 卵 巢癌(OVCA)和非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤干细胞TICs呈现高度表达， 并与正常组织PTK7表 达量存在显著性差异[5,6]。 然而， 由于PTK7本身没有催化活性， 基于PTK7为靶点设计响应的 抑制剂并不现实。 但却为靶向于PTK7高表达的肿瘤干细胞TIC s提供了可能。 目前， 以PTK7为 靶点设计药物递送系统用于治疗肿瘤干细胞TICs的策略未 见国内外相关报道。 [0005]尽管采用上述策略可获得稳定的纳 米复合物递送系统并将药物递送到靶细胞。 然 而当复合物内吞进入细胞后， 却 面临由于复合物过于稳定所致的解离缓慢、 不能有效释放说　明　书 1/4 页 3 CN 115463222 A 3