(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210805452.1 (22)申请日 2022.07.10 (71)申请人 西南大学 地址 400715 重庆市北碚区天生路2号 (72)发明人 许志刚　韩琳琳　许姬明　叶孟婕　 康跃军　 (51)Int.Cl. A61K 41/00(2020.01) A61K 31/7004(2006.01) A61K 9/107(2006.01) A61K 47/18(2006.01) A61K 47/26(2006.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (54)发明名称 一种超稳定的吲哚箐绿前药纳米胶束的制 备和应用 (57)摘要 本发明公开了一种超稳定的吲哚箐绿前药 纳米胶束的制备和应用， 制备方法包括以下步 骤： （1） 双硒交联剂 （DSe11） 的制备； （2） 利用合成 的DSe11可以交联含有羟基的药物吲哚箐绿和甘 露糖， 最终形成前药胶束 （IMs） ， 用于杀伤癌细 胞。 制备出的纳米胶束具有粒径超稳定、 较高载 药量以及低毒副作用等优势， 并且引入了交联剂 和甘露糖可以有效调节吲哚箐绿分子之间的距 离， 一定程度上解决了吲哚箐绿聚集荧光猝灭的 难题， 合成的纳米胶束会根据肿瘤 环境的氧化还 原条件断裂双硒键并释放药物， 不仅能将吲哚箐 绿递送到肿瘤微环境中， 释放的糖类也可以起到 协同光热治疗的目的， 从而最大程度的抑制肿 瘤， 在肿瘤治 疗方面有广阔的应用前 景。 权利要求书1页 说明书4页 附图4页 CN 115154602 A 2022.10.11 CN 115154602 A 1.一种超稳定的吲哚箐绿前 药纳米胶束的制备， 其特 征在于， 包括以下步骤： （1） 为了防止氧气对反应造成影响， 在氩气中完成整个反应且进行避光处理； 将一定量 的NaBH4溶于去离子水中， 随后滴加一定量的Se， 搅拌10分钟后， 再次滴加一定量的Se并继 续搅拌15分钟， 得到棕红色的Na2Se2； 在四氢呋喃中逐滴溶解一定量的11 ‑溴‑1‑十一醇， 随 后与Na2Se2混合； 所得液体用二氯化物 萃取两次， 用无水硫酸钠干 燥， 除去溶剂后， 将 残余物 通过体积比为 4:1的二氯乙烷 ‑乙酸乙酯进行硅胶色谱以进一 步纯化， 得到P Se11‑OH； （2） 为了防止氧气对反应造成影响， 在氩气中完成整个反应且进行避光处理； 将一定量 的PSe11‑OH溶解在四氢呋喃中得到PSe11‑OH溶液， 将一定量氯甲酸对硝基苯酯溶解在四氢 呋喃中得到氯甲酸对硝基苯酯溶液； 将氯甲酸对硝基苯酯溶液滴加到PSe11‑OH溶液中， 随后 滴入DIPEA； 将反应在黑暗中在室温下搅拌2 4小时， 反应结束后， 抽滤除去白色固体， 真空旋 转蒸发除去 溶剂得到黄 色液体， 加入50 mL乙醚洗涤黄 色液体， 最后收集上清液， 除去乙醚得 到棕色固体D Se11； （3） 为了防止氧气对反应造成影响， 在氩气中完成整个反应且进行避光处理； 先加入一 定量的无水二甲基亚砜DMSO， 然后加 入甘露糖Man并滴加吲哚箐绿ICG， 得到Man ‑ICG溶液； 将DSe11和三乙胺TEA溶解在无水DMSO中得到DSe11‑TEA溶液， 然后将DSe11‑TEA溶液滴加到 Man‑ICG溶液中得到混合物， 并将混合物在55℃的条件下搅拌12小时； 最后， 将混合物在 MWCO = 3500的透析袋中用去离 子水进行透析以获得纳米胶束IMs。 2.根据权利要求1所述的一种 超稳定的吲哚箐绿前药纳米胶束的制备， 其特征在于： 所 述步骤 （1） 中， Na2Se2与11‑溴‑1‑十一醇的摩尔比为1:2.5~1:3.5。 3.根据权利要求1所述的一种 超稳定的吲哚箐绿前药纳米胶束的制备， 其特征在于： 所 述步骤 （2） 中， P Se11‑OH与氯甲酸对硝基苯酯的摩尔比为1:2~1:5。 4.根据权利要求1所述的一种 超稳定的吲哚箐绿前药纳米胶束的制备， 其特征在于： 所 述步骤 （3） 中， Man ‑ICG溶液中的吲哚箐绿ICG和甘露糖Man的摩尔浓度范围分别为0.3～1.2   mmol·L‑1和0.3～1.2  mmol·L‑1； DSe11‑TEA溶液中的DSe11和三乙胺TEA的摩尔 浓度范围分 别为3～5 mmol·L‑1和6～8 mmol·L‑1。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115154602 A 2一种超稳定的吲哚箐 绿前药纳米胶束 的制备和应用 技术领域 [0001]本发明涉及高分子化学药物及部分生物领域， 具体涉及到一种超稳定的吲哚箐绿 前药纳米胶束的制备和应用。 背景技术 [0002]癌症是目前危害人类健康的重大疾病， 被称作是世界上第二大致死原因， 是21世 纪阻碍预期寿命增长的主要因素。 国际癌症研究中心 （International  Agency for  Research  on Cancer, IARC） 发布的最新癌症报告显示， 在134个国家中， 癌症是导致过早 死亡 （即30~69岁死亡） 的第一或第二大原因。 由于不同国家的医疗技术和卫生基础设施方 面的显著差异， 不同国家的癌症发病率和死亡率也存在着显著差异， 如何预防和控制癌症 已成为当前世界各国政府的卫生战略重点之一。 目前 的治疗方法中， 传统的治疗方法有手 术治疗、 放射治疗、 化学治疗等， 近年来迅速发展的新型治疗方法有靶向治疗、 免疫治疗、 光 动力治疗等。 单一治疗方法治疗癌症十分有限， 多种治疗方法联合治疗癌症是当今的大趋 势。 [0003]光热治疗 （PTT） 是新兴起的癌症治疗方法， 是通过某种特定波长的近红外光照射 具有光热转化能力的光热剂， 将光能转换成热能在肿瘤部位杀死肿瘤细胞或间接引起肿瘤 细胞凋亡， 从而抑制肿瘤生长。 光热治疗所使用的近红外光具有极强的组织穿透力， 能杀死 肿瘤细胞但对正常组织的损伤较小。 与传统治疗方法相比， 光热疗法具有不良反应小、 特异 性高、 可重复治疗等优点， 并能够 有效抑制肿瘤转移。 吲哚箐绿 （IC G） 为第四代 光热剂， 与之 前几代无机光热剂相比， ICG具有生物安全性良好与可 降解性等优点， 但是其缺点为不稳 定， 容易聚集而导 致荧光猝灭， 如何制备 稳定的ICG的纳米前 药是当今的趋势所向。 [0004]与正常细胞相比， 肿瘤细胞需要消耗大量的葡萄糖才能生长， 因此限制肿瘤细胞 使用的葡萄糖数量可以延缓肿瘤的生长。 但正常细胞也需要葡萄糖才能够进 行正常的生理 活动， 如何抑制肿瘤细胞 的生长而不影响正常的细胞是个需要解决的问题。 有研究人员发 现， 通过对小鼠使用甘露糖作为营养补充剂， 甘露糖能够减缓肿瘤生长和增强化疗对多种 癌症小鼠模型的疗效。 [0005]本发明着手于改善吲哚箐绿的不稳定性， 通过交联剂DSe11交联吲哚箐绿和甘露 糖， 甘露糖形成的三维空间网络可有效改善ICG分子间的距离， 可在一定程度上缓解ICG的 聚集猝灭效应， 增强ICG的稳定性， 本发明将含有羟基的药物通过交联剂交联起来， 到达肿 瘤微环境中， 由于癌细胞中较高的谷胱甘肽GSH浓度的刺激， 释放出药物， 进而抑制肿瘤的 生长。 该前药将推动光疗前药 的发展， 为如何解决吲哚箐绿的集中猝灭效应提供一定的参 考。 发明内容 [0006]本发明所解决的技术问题提供一种超稳定的吲哚箐绿前药纳米胶束的制备方法， 通过二硒键桥联甘露糖和吲哚箐绿制备了超稳定的前药胶束， 研究在肿瘤细胞内氧化还原说　明　书 1/4 页 3 CN 115154602 A 3