(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211407707.5 (22)申请日 2022.11.10 (71)申请人 郑州大学 地址 450001 河南省郑州市高新区科 学大 道100号 (72)发明人 赵永星　孙朋超　师梦晓　魏月茹　 郭凡凡　 (74)专利代理 机构 郑州优盾知识产权代理有限 公司 41125 专利代理师 冉珊敏 (51)Int.Cl. A61K 31/122(2006.01) A61K 47/61(2017.01) A61K 9/51(2006.01) A61K 45/06(2006.01)A61M 37/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 一种透明质酸-异甘草素偶联物、 溶解型微 针贴及制备方法和应用 (57)摘要 本发明属于高分子化学领域， 涉及药物制 剂， 特别是指一种透明质酸 ‑异甘草素偶联物、 溶 解型微针贴及制备方法和应用。 （1） 负载异甘草 素的透明质酸大分子长链的合成。 （2） 透明质酸 ‑ 异甘草素偶联物在水溶液中自组装包裹形成纳 米粒。 （3） 该偶联物具有一定的抗肿瘤活性， 可以 抑制小鼠黑 色素瘤B16细胞的增殖和迁移。 （4） 本 发明使用具有药理活性的透明质酸 ‑异甘草素纳 米粒作为溶解型微针针体的基质材料。 本发明使 用透明质酸 ‑异甘草素制备的微针可装载其他具 有抗肿瘤作用的药物， 不仅可以增加肿瘤部位的 药物含量， 减少药物对正常组织的副作用， 更能 起多重抗肿瘤的效果， 显著提高药物对皮肤黑色 素瘤的治 疗效果。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115487171 A 2022.12.20 CN 115487171 A 1.一种透明质酸 ‑异甘草素偶联物， 其具有如下 结构式： 式中n=1， 2， 3 ……。 2.根据权利要求1所述的透明质酸 ‑异甘草素偶联物， 其特征在于： 所述透明质酸的分 子量为3000Da~300kDa； 透明质酸 ‑异甘草素偶联物的接枝率在2~15%之间。 3.权利要求1或2的透明质酸 ‑异甘草素偶联物的制备 方法， 其特 征在于， 步骤如下： （1） 将透明质酸溶于第一溶剂中， 加入羧基活化剂和缩合剂进行活化反应； （2） 避光条件下将异甘草素溶于第二溶剂中， 然后缓慢滴加于步骤 （1） 所得的溶液中， 进行缩合反应， 透析， 冻干后得到 透明质酸 ‑异甘草素偶联物。 4.根据权利要求3所述的透明质酸 ‑异甘草素偶联物的制备方法， 其特征在于： 所述步 骤 （1） 中第一溶剂为水、 水和二甲基甲酰胺的混合溶液或水和甲醇的混合溶液中的任一种； 步骤 （2） 中第二溶剂为DMF或甲醇。 5.根据权利要求4所述的透明质酸 ‑异甘草素偶联物的制备方法， 其特征在于： 所述羧 基活化剂为4 ‑（4,6‑二甲氧基三嗪） ‑4‑甲基吗啉盐酸盐和/或1 ‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基) 碳二亚胺盐酸盐； 缩合剂为 4‑二甲氨基吡啶。 6.根据权利要求5所述的透明质酸 ‑异甘草素偶联物的制备方法， 其特征在于： 所述透 明质酸与异 甘草素的质量比为1:0.2~1。 7.一种溶解型微针贴， 其特征在于： 以权利要求1或2所述的透 明质酸‑异甘草素偶联物 作为针体材料。 8.权利要求7 所述的溶解型微针贴的制备 方法， 其特 征在于， 步骤如下： a. 将透明质酸 ‑异甘草素偶联物与水混匀， 超声溶解后， 自组装形成纳米粒， 除去空气 后作为针 体溶液； b. 配制被衬层溶液， 超声使其充分溶解并除去溶 液中的空气， 作为被 衬层浇注溶 液； c． 将步骤a的针体溶液加入微针模具， 真空处理5~15min， 离心5~15min， 再加入步骤b的 被衬层浇注溶 液， 离心10~30min使针体与被衬层充分黏 合， 即得溶解型微针贴。 9.根据权利要求8所述的溶解型微针贴的制备方法， 其特征在于： 所述针体溶液中透明 质酸‑异甘草素偶联物的浓度为0.04~0.8g/mL； 所述的被衬层溶液中的材料包括但不局限 于聚乙烯醇、 聚乙烯吡咯烷酮、 羟丙基甲基纤维素或乙基纤维素中的一种或多种。 10.权利要求7 所述的溶解型微针贴在制备治疗皮肤 黑色素瘤的药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115487171 A 2一种透明质酸 ‑异甘草素偶联物、 溶解型微针贴及制备方 法和 应用 技术领域 [0001]本发明属于高分子化学领域， 涉及药物制剂， 特别是指一种透明质酸 ‑异甘草素偶 联物、 溶解型微针贴及制备 方法和应用。 背景技术 [0002]皮肤黑色素瘤 （CM） 是一种致死性较高的恶性皮肤肿瘤， 在过去的二十多年里， 皮 肤黑色素瘤的患病率处于明显的上升趋势。 其起病隐匿、 发展迅速、 易全身转移、 预后差且 长期生存率低。 常规治疗方法如手术、 放化疗和免疫治疗等均难以实现有效治疗。 对于CM的 治疗， 亟需探索 在有效消除原发性肿瘤的同时亦能抑制其扩散和转移的新策略和新方法。 [0003]透明质酸 （HA） 是细胞外基质的主要成分也是溶解型微针常用的材料之一， 其在人 体内与靶标蛋白结合后可以参与很多疾病的发生发展。 CD44（cluster  of  differentiation  44） 作为细胞表面的一类跨膜糖蛋白， 是HA最重要的受体之一。 此外， CD44在皮肤黑色素瘤细胞表面高度表达， 故可对HA进 行改造既保留其靶向功能又使其具有 一定的抗肿瘤活性。 [0004]异甘草素 （IS L） 是一种黄酮类化合物， 通过抑制肿瘤分裂和花生四烯酸代谢酶， 促 进肿瘤细胞凋亡、 自噬和活性氧 的产生， 抑制肿瘤新生血管生成等发挥多机制的抗肿瘤作 用。 ISL两个六元环之间通过三碳原子连接， 旋转 自由度较大， 与受体的诱导契合空间位阻 小。 但ISL水溶性差， 降解快， 生物利用度低。 专利申请201610340875.5中公开了一种甘草酸 基因递送纳米颗粒及其制备方法和应用， 提供了一种 可以递送至甘草酸基因的纳米粒， 该 纳米颗粒的直径为20~65nm， 该申请主要是解决基因转染中递送体系需要靠正电性转染材 料去递送的技术问题， 提供了一种易于获得FDA批准的递送体系。 但是该递送系统用于基因 治疗领域， 针对于恶性程度很高， 转移 性和侵袭性极强的皮肤黑色素瘤来说， 则需要既可以 杀死肿瘤细胞又能抑制其 转移的途径来实现更有效的治疗。 [0005]微针 （Mcironeedles，  MNs） 是由微米级别整齐排列的针体和被衬层组成的新型给 药系统， 具有传统经皮给药和注射给药的双重优点。 相较于传统经皮给药， 微针可以穿破皮 肤角质层， 促进小分子亲水性药物、 大分子生物药物等的透皮吸收。 相较于注射给药， 微针 不伤害血管和痛觉神经， 可由患者自主给药， 具有 更高的安全性和顺应性。 溶解型微针采用 生物可降解材料， 进入皮肤后完全溶解， 具有较好的生物相容性。 采用溶解型微针携带抗肿 瘤药物可以将药物直接递送进肿瘤组织内部更好的发挥治疗作用， 且不经过血液循环可以 减少药物对正常机体的副作用。 但目前所研发的溶解型微针本身均无药理活性， 仅作为递 送系统将药物透皮递送进入人体。 如何利用微针的优势制备既有微针的效果， 本身具有抗 肿瘤活性同时又可以装载其他抗肿瘤药物， 实现联合治疗、 多重治疗是本申请要解决的技 术问题。说　明　书 1/5 页 3 CN 115487171 A 3