(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210919914.2 (22)申请日 2022.08.01 (71)申请人 深圳市人民医院 地址 518020 广东省深圳市罗湖区东门北 路1017号 (72)发明人 丁琳　李富荣　梁敏莉　 (74)专利代理 机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 张立娜 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 47/58(2017.01) A61K 39/00(2006.01) A61K 39/39(2006.01)A61P 35/00(2006.01) C08G 83/00(2006.01) C08L 87/00(2006.01) (54)发明名称 一种靶向树突状细胞促进抗原溶酶体逃逸 激活免疫系统的抗原递送载体其制备方法与应 用 (57)摘要 本发明公开了一种靶向树突状细胞促进抗 原溶酶体逃逸激活免疫系统的抗原递送载体其 制备方法与应用。 本发明提供了一种用于向体内 递送抗原的载体， 该载体是利用聚乙烯亚胺和甘 露糖对金属骨架材料进行功能化修饰所得的金 属骨架复合物。 本发明提供的抗原递送载体粒径 均一、 分散性好、 生物安全性高、 对抗原负载量 大， 展现出对树突状细胞的的高靶向性， 增加树 突状细胞对抗原的摄取， 促进树突状细胞的成 熟， 并促使抗原在树突状细胞内的交叉递呈， 能 够高效的激活CD4+和CD8+T细胞， 引起强烈的免 疫反应， 杀伤癌细胞。 该载体应用广泛， 可 实现对 单种、 多种抗原的包覆， 对常见肿瘤均具有杀伤 能力。 权利要求书2页 说明书10页 附图9页 CN 115300641 A 2022.11.08 CN 115300641 A 1.一种用于向体内递送抗原的载体， 其特征在于： 所述载体为利用聚乙烯亚胺和甘露 糖对金属骨架材 料进行功能化 修饰所得的金属骨架复合物。 2.根据权利要求1所述的载体， 其特征在于： 所述金属骨架复合物的形状为规则的多边 形立方体， 粒径在10 0‑120nm。 3.根据权利要求1或2所述的载体， 其特征在于： 所述载体按照包括如下步骤的方法制 备得到： (A1)将锌离 子与聚乙烯亚胺溶解于水中， 得到溶 液1； (A2)将2‑甲基咪唑溶于水中， 得到溶 液2； (A3)将所述溶液1进行磁力 搅拌， 在磁力搅拌下向所述溶液1中倒入所述溶液2， 保持磁 力搅拌反应10 ‑15min后将混合液在10000 ‑11000rpm转速下离心15min， 吸出上清后留沉淀 部分， 然后向沉淀中加水， 得到溶 液3； (A4)将D‑(+)‑甘露糖溶于水 得到溶液4； (A5)将所述溶液3进行磁力 搅拌， 在磁力搅拌下向所述溶液3中倒入所述溶液4， 保持磁 力搅拌反应25 ‑30min后将混合液在10000 ‑11000rpm转速下离心15min， 沉淀 经40‑45℃下真 空干燥， 即为所述载体； 其中， 所述溶液1中的锌离子、 聚乙烯亚胺、 所述溶液2中的2 ‑甲基咪唑和所述溶液4中 的D‑(+)‑甘露糖的配比为0.17mmoL的锌离子： 0.0833mmoL的聚乙烯亚胺： 11.8mmoL的2 ‑甲 基咪唑： 2.7 7mmoL的D‑(+)‑甘露糖。 4.一种用于向体内递送抗原的载体的制备 方法， 包括权利要求3中的步骤(A1) ‑(A5)。 5.一种负载有抗原和/或免疫佐剂的体内抗原递送系统， 按照包括如下步骤的方法制 备得到： (B1)将锌离 子与聚乙烯亚胺溶解于水中， 得到溶 液1； (B2)将如下1)和2)溶于水中， 得到溶 液2； 1)2‑甲基咪唑； 2)抗原和/或佐剂； (B3)将所述溶液1进行磁力 搅拌， 在磁力搅拌下向所述溶液1中倒入所述溶液2， 保持磁 力搅拌反应10 ‑15min后将混合液在10000 ‑11000rpm转速下离心15min， 吸出上清后留沉淀 部分， 然后向沉淀中加水， 得到溶 液3； (B4)将D‑(+)‑甘露糖溶于水 得到溶液4； (B5)将所述溶液3进行磁力 搅拌， 在磁力搅拌下向所述溶液3中倒入所述溶液4， 保持磁 力搅拌反应25 ‑30min后将混合液在10000 ‑11000rpm转速下离心15min， 吸出上清后留沉淀 部分， 沉淀经40 ‑45℃下真空干燥， 即为所述负载有抗原和 /或免疫佐剂的体内抗原递送系 统； 其中， 所述溶液1中的锌离子、 聚乙烯亚胺、 所述溶液2中的2 ‑甲基咪唑、 所述抗原和/或 佐剂， 以及所述溶液4中的D ‑(+)‑甘露糖， 配比为0.17mmoL的锌离子： 0.0833mmoL的聚乙烯 亚胺： 11.8mmoL的2 ‑甲基咪唑： 0.0052mmoL的抗原： 0.0000248mmoL的佐剂： 2.77mmoL的D ‑ (+)‑甘露糖。 6.一种负载有抗原和/或免疫佐剂的体 内抗原递送系统 的制备方法， 包括权利要求5中 步骤(B1) ‑(B5)。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115300641 A 27.如下任一中的应用： (C1)权利 要求1‑3中任一所述载体或权利 要求5所述递送系统在向体内递送抗原和/或 免疫佐剂中的应用； (C2)权利要求1 ‑3中任一所述载体在制备权利要求5所述 递送系统中的应用； (C3)权利要求1 ‑3中任一所述载体或权利要求5所述递送系 统在制备树突状细胞疫苗 中的应用； (C4)权利要求1 ‑3中任一所述载体或权利要求5所述递送系 统在制备免疫刺激剂中的 应用； (C5)权利要求1 ‑3中任一所述载体或权利要求5所述递送系 统在制备用于杀伤癌细胞 的产品中的应用。 8.根据权利要求1 ‑7中任一所述的载体或递送系统或方法或应用， 其特征在于： 所述抗 原选自如下任意一种或多种： 卵白蛋白、 肿瘤特异性抗原、 肿瘤干细胞抗原、 肿瘤细胞裂解 物； 和/或 所述免疫佐剂选自如下任意一种或多种： 细胞 ‑巨噬细胞集落刺激因子、 白细胞介素 ‑ l、 白细胞介素 ‑2、 干扰素 ‑γ、 Toll样受体激动剂、 细菌或其产物、 无机佐剂。 9.根据权利要求8所述的载体或递送系统或方法或应用， 其特征在于： 所述Toll样受体 激动剂为肽聚糖、 CpG ‑ODN、 咪喹莫特或瑞喹莫特； 所述细菌或其产 物为分枝杆菌、 短小棒状 杆菌、 百日咳杆菌或革兰阴性杆菌内毒素； 所述无机佐剂为氢 氧化铝、 明矾或磷酸铝。 10.如下任一产品： (D1)树突状细胞疫苗， 为将权利要求5所述 递送系统靶向树 突状细胞后所 得； (D2)免疫刺激剂， 为将权利要求5所述 递送系统与树 突状细胞共孵 育后所得； (D3)用于杀伤癌细胞的产品， 为将权利要求5所述递送系统与树突状细胞共孵育后， 再 将所述树突状细胞与T细胞共培 养后所得。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115300641 A 3