(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210831683.X (22)申请日 2022.07.15 (71)申请人 西电集团医院 地址 710082 陕西省西安市莲湖区丰登 路 97号 (72)发明人 金成　 (74)专利代理 机构 北京酷爱智慧知识产权代理 有限公司 1 1514 专利代理师 刘志刚 (51)Int.Cl. A61K 9/52(2006.01) A61K 47/34(2017.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 31/337(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种靶向肝癌干细胞的多功能纳米粒及其 制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种靶向肝癌干细胞的多功 能纳米粒及其制备方法， 所述制备方法包括如下 步骤： 向紫杉醇PLGA纳米粒悬液中添加EDC溶液 和NHS溶液并搅拌一段时间， 得到混合液； 向混合 液中添加CD133抗体溶液和穿膜肽溶液进行反 应； 待反应结束， 离心收集沉淀物、 洗涤、 冷冻干 燥， 即得所述靶向肝癌干细胞的多功能纳米粒； 本发明制备得到的多功能纳米粒能够对肝癌细 胞具有被动和主动靶向， 对肝癌细胞具有更加优 异毒性， 最大限度的提高了肝脏肝癌干细胞的选 择性和治疗效果； 此外， 本发明制备方法工艺简 单、 易于操作， 便 于生产。 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 CN 115192546 A 2022.10.18 CN 115192546 A 1.一种靶向肝癌干细胞的多功能纳米粒的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (a)向紫杉醇PLGA纳米粒 悬液中添加EDC溶 液和NHS溶 液并搅拌一段时间， 得到混合液； (b)向混合液中添加CD13 3抗体溶液和穿膜肽溶 液进行反应； (c)待反应结束， 离心收集沉淀物、 洗涤、 冷冻干燥， 即得所述靶向肝癌干细胞的多功能 纳米粒。 2.根据权利 要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(a)中， 紫杉醇PLGA纳米粒悬 液浓度为 4～6mg/ml； EDC溶 液和NHS溶 液浓度分别为 40～60mg/ml。 3.根据权利 要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(a)中， 紫杉醇PLGA纳米粒悬 液、 EDC溶 液和NHS溶 液的体积比为10 00∶(5～20)∶(5～ 20)。 4.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(a)中， 搅拌时间为15～ 30min， 搅拌温度为室温。 5.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(b)中， CD133抗体溶液浓度 为0.8～1.2mg/ml， 穿膜肽溶 液浓度为1.5～ 2.5mg/ml。 6.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(b)中， CD133抗体溶液和穿 膜肽溶液的添加量分别为混合液体积的0.8～1.2倍。 7.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(b)中， 反应温度2～6℃， 时 间为10～14h 。 8.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(c)中， 离心转速为25000～ 35000r/min， 时间为 4～6min。 9.根据权利要求1所述的制备 方法， 其特 征在于， 所述 步骤(b)中， 穿膜肽为 穿膜肽R9。 10.权利要求1～ 9任一所述的制备 方法制得的靶向肝癌干细胞的多功能纳米粒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115192546 A 2一种靶向肝癌干细胞的多功能纳米粒 及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及靶向治疗技术领域， 具体涉及 一种靶向肝癌干细胞的多功能纳米粒及 其制备方法。 背景技术 [0002]肝脏是人体重要器官之一， 参与体内消化、 排泄、 解毒和免疫调节等过程， 因此肝 脏也是人体最易受损的器官之一。 然而， 肝癌等疾病导致了大量的死亡， 严重威胁人类的健 康。 [0003]目前， 肝癌治疗的方法主要包括化学治疗、 放射疗法、 外科手术、 光动力学治疗等。 发展比较早且使用广泛的治疗方法是化学治疗和放射疗法， 其主要缺点在于： 治疗手段对 癌细胞的靶向性不高， 不能有效区分癌细胞和 正常细胞， 特别是化疗及一些蛋白质药物具 有很高的细胞毒性， 在治疗的同时也对正常机体器官造成很大损伤。 按照传统的给药方式， 小分子药物在体内随机分布， 真正蓄积到病患部位进而发挥药效的只是少 部分药物， 多数 都被代谢排出体外， 生物利用度很低。 [0004]靶向性药纳 米物传递是一种既可以提高治疗靶向性又比较容易实现的治疗途径， 主要依靠药物分子通过靶向特异性到达病变部位， 杀灭致病病毒、 修复受损组织或消除疾 病症状。 概括而言， 靶向性药物输送体系具有如下主要优点： 高度靶向性， 减少毒副作用； 增 加非水溶性药物在体内的分散量， 稳定药物在体内的存在； 浓集药物并能够调节药物的释 放速度； 改变药物给药途径， 如将 需要静脉注射的药物制成方便的口服药物等。 然而， 目前 关于体内靶向功能的药物载体成功用于临床报道极其少见， 导致靶向药物的临床 应用进展 缓慢。 [0005]有鉴于此， 特提出本发明。 发明内容 [0006]本发明的目的在于提供一种靶向肝癌干细胞的多功能纳 米粒及其制备方法， 该多 功能纳米粒能够对肝癌细胞具有被动和主动靶向， 对肝癌细胞具有更加优异毒性， 最大限 度的提高了肝脏肝癌干细胞的选择性和治疗效果。 [0007]为了实现本发明的上述目的， 特采用以下技 术方案： [0008]本发明第一方面提供一种靶向肝癌干细胞的多功能纳米粒的制备方法， 所述制备 方法包括如下步骤： [0009](a)向紫杉醇PLGA纳米粒悬液中添加EDC溶液和 NHS溶液并搅拌一段时间， 得到混 合液； [0010](b)向混合液中添加CD13 3抗体溶液和穿膜肽溶 液进行反应； [0011](c)待反应结束， 离心收集沉淀物、 洗涤、 冷冻干燥， 即得所述靶向肝癌干细胞的多 功能纳米粒。 [0012]在本发明中对紫杉醇P LGA纳米粒的制备方法不作严格限制， 可以通过本领域的常说　明　书 1/6 页 3 CN 115192546 A 3