(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211334390.7 (22)申请日 2022.10.28 (71)申请人 中国人民解 放军陆军特色医学中心 地址 400042 重庆市渝中区大坪长江支路 10号 申请人 重庆大学 (72)发明人 何勇　豆远尧　唐丽灵　王莉萍　 韩睿　王玉波　 (74)专利代理 机构 重庆双马智翔专利代理事务 所(普通合伙) 50241 专利代理师 顾晓玲 (51)Int.Cl. A61K 31/675(2006.01) A61K 31/506(2006.01) A61K 47/69(2017.01)A61K 9/52(2006.01) A61K 47/46(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C08G 12/08(2006.01) (54)发明名称 一种靶向肺癌耐药肿瘤的仿生载药体系及 其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种靶向肺癌耐药肿瘤的仿 生载药体系及其制备方法和应用， 该仿生载药体 系是将布加替尼药物锚定到COF纳米颗粒上得到 COF‑Brig纳米材料， 将奥希替尼药物包埋到COF ‑ Brig纳米材料的介孔结构中得到COF ‑Brig@Osi 纳米材料， 然后采用肺癌奥希 替尼耐药细胞的细 胞膜对COF ‑Brig@Osi纳米 材料进行包裹得到。 本 发明的载药体系一方面能实现对耐药肿瘤细胞 的主动靶向递送、 对抗肿瘤药物的按需释放， 极 大的提高了抗肿瘤药物在耐药肿瘤部位的浓度， 另一方面， 还能实现抗肿瘤药物在耐药细胞中的 级联响应性释放， 进 而达到增强抗肿瘤的效果。 权利要求书2页 说明书7页 附图6页 CN 115501239 A 2022.12.23 CN 115501239 A 1.一种靶向肺癌耐药肿瘤的仿生载药体系， 其特征在于： 是将布加替尼药物锚定到COF 纳米颗粒上得到COF ‑Brig纳米材料， 将奥希替尼药物包埋到COF ‑Brig纳米材料的介孔结构 中得到COF ‑Brig@Osi纳米材料， 然后采用肺癌奥希 替尼耐药细胞的细胞膜对COF ‑Brig@Osi 纳米材料进行包裹得到； 所述COF纳米颗粒的制 备方法包括如下步骤： (1)合成COP纳米颗粒： 以4,4' ‑二硫二酰 二苯甲醛、 1,3,5 ‑三(氨基甲基)苯三盐酸盐为原料， 采用三氟乙酸或醋酸作为席夫碱反应 的催化剂， 采用席夫碱型亚胺键连接方式合成含有二硫键的非晶共价有机聚合物COP纳米 颗粒； 重结晶法合 成高孔隙COF纳米颗粒： 将制备的C OP纳米颗粒分散到刻蚀液中， 在50 ‑120 ℃条件下充分反应后， 离心收集高介孔COF纳米颗粒， 洗涤去除残留反应物， 即得。 2.根据权利要求1所述的靶向肺癌耐药肿瘤的仿生载 药体系， 其特 征在于： COF‑Brig纳米材料的合成是利用COF纳米颗粒中的亚胺氮上的孤对电子通过氢键锚定 布加替尼药物分子； COF ‑Brig@Osi纳米材料的制备是通过BSA包埋的方法， 将奥希 替尼药物 包埋到COFs材料的介孔结构中； 采用物理挤压 的方法将肺癌奥希替尼耐药细胞的细胞膜包裹到COF ‑Brig@Osi纳米材 料表面。 3.权利要求1或2所述的仿生载 药体系的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)合成COP纳米颗粒： 以4,4' ‑二硫二酰二苯甲醛、 1,3,5 ‑三(氨基甲基)苯三盐酸盐为 原料， 采用三氟 乙酸或醋酸作为席夫碱反应的催化剂， 采用席夫碱型亚胺键连接方式合成 含有二硫键的非晶共价有机聚合物COP纳米颗粒； (2)重结晶法合成高孔 隙COF纳米颗粒： 将制 备的COP纳米颗粒分散到刻蚀液中， 在50 ‑ 120℃条件下充分反应后， 离心收集高介孔COF纳米颗粒， 洗涤去除残留反应物， 即得； (3)COF纳米颗粒装载Brigatinib药物:将布加替尼药物溶解到THF或无水乙醇溶液中， 再将COFs纳米颗粒加入布加替尼溶液中， 分散均匀， 搅拌、 充分反应， 反应完成后离心、 洗 涤， 去除残余的布加替尼药物， 得到 COF‑Brig纳米颗粒； (4)装载Osimertinib药物： 采用BSA或聚乙二醇捕获奥希替尼药物并包埋到COFs介孔 中： 向奥希替尼溶液中加入COF ‑Brig纳米颗粒， 分散均匀， 将分散液滴入到BSA溶液中， 搅 拌、 充分反应， 反应完成后离心、 洗涤去除残余的奥希替尼药物， 得到COF ‑Brig@Osi纳米材 料； (5)采用物理挤压的方法将肺癌奥希替尼耐药细 胞的细胞膜包裹到COF ‑Brig@Osi纳米 材料表面， 得到载 药体系COF ‑Brig@Osi‑M纳米颗粒。 4.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于： 步骤(1)中4,4' ‑二硫二酰二苯甲醛、 1,3,5‑三(氨基甲基)苯三盐酸盐的溶剂为乙腈， 向4,4' ‑二硫二酰二苯甲醛的乙腈分散溶 液中加入三氟乙酸， 搅拌、 充分反应； 再加入1,3,5 ‑三(氨基甲基)苯三盐酸盐的乙腈溶液， 室温充分反应， 离心收集产物， 用乙醇和N,N ‑二甲基乙酰胺洗涤去除残留的反应物， 获得 COP纳米颗粒； 所述催化剂为三氟乙酸， 三氟乙酸的用量为每0.01摩尔4,4' ‑二硫二酰二苯甲醛使用 400‑600 μL三氟乙酸， 优选每0.01摩尔4,4' ‑二硫二酰二苯甲醛使用450 ‑550 μL或者500 μL三 氟乙酸； 优选4,4' ‑二硫二酰二苯甲醛溶液的浓度为0.35 ‑0.55mM或0.4 ‑0.5mM， 1,3,5 ‑三(氨基权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115501239 A 2甲基)苯三盐酸盐溶 液的浓度为0.2 ‑0.4mM或0.25 ‑0.35mM； 优选4,4' ‑二硫二酰二苯甲醛与1,3,5 ‑三(氨基甲基)苯三盐酸盐的使用量比例为摩尔 比3:2。 5.根据权利要求3所述的制备 方法， 其特 征在于： 步骤(2)中， 将制备的COP纳米颗粒分散到刻蚀液中， 在50 ‑100℃或50 ‑90℃或60 ‑80℃条件下反应 12‑60h， 优选42 ‑54h或44‑52h或48h； 离心收集介孔COF纳米颗粒用乙醇洗涤去除残留反应 物； 所述刻蚀液包含： 10～40ml  N,N‑二甲基乙酰胺、 10～40ml  1,3,5‑三甲基苯、 0.5 ‑3ml 水和0.5‑2.5ml三氟乙酸， 其中N,N ‑二甲基乙酰胺、 1,3,5 ‑三甲基苯的体积比为： 1～4﹕1～ 4， 优选4﹕ 1； 水的体积优选2ml， 三氟乙酸的体积优选2ml； COP纳米颗粒与刻蚀液的用量比为COP纳米颗粒的质量与刻蚀液的体积比为1mg﹕40～ 60ml， 优选1mg﹕ 45～5 5ml或50ml。 6.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于： 步骤(3)中布加替尼药物与COFs纳米 颗粒的摩尔质量比为0.01～ 10mmol﹕ 1mg， 优选0.01～0.1mmol:1mg或0.01～0.05mmol:1mg 或0.02～0.05mmol:1mg； 步骤(3)中将COFs纳米颗粒加入布加替尼溶液中超声震荡至分散均匀， 搅拌过夜反应， 离心后采用乙醇洗涤。 7.根据权利要求3所述的制备 方法， 其特 征在于： 步骤(4)中， 所述奥希替尼溶液的溶剂为乙醇， 奥希替尼与COF ‑Brig纳米颗粒的摩尔质量比为 0.001～10mmol﹕ 1mg， 优选0.004～10mmol﹕ 1mg或0.004～1mmol﹕ 1mg或0.004～0.1mmol﹕ 1mg 或0.004～ 0.05mmol﹕ 1mg或0.004～ 0.02mmol﹕ 1mg， 向奥希替尼溶液中加入COF ‑Brig纳米颗 粒， 采用超声震 荡分散均匀， 将分散液滴入到BSA溶液中， 搅拌反应2 ‑10h， 反应完成后离心， 并用去离 子水洗涤去除残余的奥希替尼药物； 所述BSA溶液制备方法为： 将10mgBSA分散到1ml  2.5mMNaCl溶液中， 完全溶解后加入 200 μL0.1mMNaOH溶 液。 8.根据权利要求3所述的制备 方法， 其特 征在于： 步骤(5)中， 将COF‑Brig@Osi纳米颗粒和肺癌奥希替尼耐药细胞的细胞膜混合均匀， 用挤出机通过 纳米级聚碳 酸酯滤膜反复挤出混合物， 然后高速 离心获得COF ‑Brig@Osi‑M纳米颗粒； COF‑Brig@Osi纳米颗粒与肺癌奥希替尼耐药细胞的细胞膜的质量比为1:2～7， 优选1: 3～7或1:4～6或1:5； 优选所述纳米级聚碳酸酯滤膜的孔径为200nm； 所述高速离心为15000rpm下离心 10min。 9.权利要求1或2所述的仿生载药体系在递送布加替尼和奥希替尼抗肿瘤药物中的应 用或者在制备肿瘤治疗药物中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于： 所述肿瘤为肺癌， 优选非小细胞肺癌； 优 选所述肿瘤为奥希替尼获得性耐药 型。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115501239 A 3