(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210887934.6 (22)申请日 2022.07.27 (71)申请人 西南大学 地址 400715 重庆市北碚区天生路2号 (72)发明人 薛鹏　何梦婷　余宏练　张蕾　 康跃军　 (51)Int.Cl. A61K 41/00(2020.01) A61K 9/51(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 47/24(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳米材 料的制备 (57)摘要 本发明涉及纳米材料的合 成领域， 将聚乙二 醇修饰的缺陷型纳米硫化铜上载在丝素金上， 得 到上载缺陷型硫化铜 纳米点的丝素金纳米材料。 包括以下步骤： （1） 首先在酸性环境下合成了丝 素金纳米材料， 然后合成聚乙二 醇修饰的缺陷型 硫化铜， 最后合成了上载缺陷型硫化铜的丝素金 纳米材料。 （2） 通过实验验证了纳米材料的成功 合成以及上载缺陷型硫化铜的丝素金纳米材料 具有多种酶反应活性， 其中金作为电子清除剂， 具有窄带隙能量的缺陷型硫化铜半导体能够更 快速地解离电子 ‑空穴对， 以促进超声触发的ROS 生成。 同时该纳米材料能够触发M1型巨噬细胞的 激活和治疗触发的免疫遗传细胞死亡， 在生物医 学领域， 及社会 经济的其他领域有着很大的应用 潜力。 权利要求书2页 说明书4页 附图4页 CN 115212307 A 2022.10.21 CN 115212307 A 1.上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳米材料的制备方法， 其特征在于， 包含以下步 骤： （1） 将硫粉加入到装有油胺的圆底烧瓶中， 在室温下搅拌15分钟后， 将溶液移至恒温磁 力搅拌器中， 在70℃下再次搅拌5 分钟； 接着， 加入含有乙酰丙酮铜的油胺和氯仿混合溶液， 在70℃下搅拌5 分钟； 离心收集产 物， 用乙醇/氯仿冲洗三次， 得到油胺包被的缺陷型硫化铜 纳米点； 最后， 将油胺包被的缺陷型硫化铜纳米点分散在氯仿中； （2） 将氨基聚乙二醇化二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺DSPE ‑PEG2000‑NH2加入到步骤 （1） 的含 有油胺包被的缺陷型硫化铜纳米点的氯仿中， 超声搅拌15  分钟， 然后在旋转蒸发器中， 在 60℃的真空条件下蒸发氯仿溶剂90分钟； 最后， 在烧瓶中加入去离子水， 超声20分钟后， 直 至得到的聚乙二醇化 缺陷型硫化铜纳米点完全分散， 将合成产物4℃保存备用； （3） 将蚕茧中的蚕蛹取 出， 其它部分切成1平方厘米左右的蚕茧碎片； （4） 将蚕茧碎片加入到质量浓度 为0.5%的碳酸钠 溶液中， 加热煮沸并持续30分钟， 溶解 出黄色胶状的丝胶蛋白和 棉花状的膨松固体， 膨松固体即为丝素蛋白； 最后， 使用二次水反 复冲洗丝素蛋白， 干燥过夜于 37℃的鼓风干燥箱中； （5） 将步骤 （4） 所得到的丝素蛋白浸没于氯化钙、 乙醇和水的溶液中； 将溶液置于在水 浴锅中将温度加热至90℃并持续2小时后得到溶解的丝素蛋白溶液； 然后通过抽滤装置去 除丝素蛋白溶液中的杂质， 并在截留量为3500  kDa透析袋中流水透析三天， 去除体系中的 钙离子和乙醇； 最终 获得的澄清丝素蛋白溶 液， 保存在4℃的冰箱中备用； （6） 在环境温度下与磁力搅拌下， 将均相氯金酸溶液添加到丝素蛋白水溶液中； 然后， 通过滴加1.5  wt%硝酸溶液将混合物的pH值提高到3； 避光搅拌24小 时， 产物溶液颜色逐渐 从黄色变为紫色； 最后， 将制备好的丝素金纳米材料使用截留量为3500  kDa透析袋在1  L去 离子水中进行12小时的纯化； （7） 将步骤 （6） 得到的丝素金纳米材料加入质量比为4:3的EDC/NHS并在室温下避光搅 拌30分钟； 然后， 在活化的丝素金纳米材料中引入步骤 （2） 的聚乙二醇化缺陷型硫化铜 纳米 点溶液并避光继续反应12小时； 最后， 离心洗涤获得上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳 米材料。 2. 根据权利要求1所述的上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳米材料的制备方法， 其 特征在于： 所述步骤 （1） 中硫粉在油胺中的浓度为5~6 mg/mL， 所述步骤 （1） 中含有乙酰丙酮 铜的油胺和氯仿混合溶液中乙酰丙酮铜的浓度为10~11 mg/mL， 含有乙酰丙酮铜的油胺和 氯仿混合溶 液中油胺和氯仿的体积比为1:4。 3.根据权利要求1所述的上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳米材料的制备方法， 其 特征在于： 所述 步骤 （2） 中D SPE‑PEG2000‑NH2与缺陷型硫化铜纳米点的质量比为10:1~5:1。 4.根据权利要求1所述的上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳米材料的制备方法， 其 特征在于： 所述 步骤 （5） 中 氯化钙、 乙醇和水的溶 液中摩尔比为1:2: 8。 5. 根据权利要求1所述的上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳米材料的制备方法， 其 特征在于： 所述 步骤 （6） 中丝素蛋白水 溶液的浓度为3~5 mg/mL。 6. 根据权利要求1所述的上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳米材料的制备方法， 其 特征在于： 所述 步骤 （6） 中 氯金酸溶 液的浓度为5~8 mM。 7. 根据权利要求1所述的上载缺陷型硫化铜纳米点的丝素金纳米材料的制备方法， 其权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115212307 A 2特征在于： 所述 步骤 （7） 中聚乙二醇化 缺陷型硫化铜纳米点溶 液的浓度为5~8 mM。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115212307 A 3