(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210869104.0 (22)申请日 2022.07.22 (71)申请人 广西壮族自治区农业科 学院 地址 530007 广西壮 族自治区南宁市大 学 东路174号 (72)发明人 唐雅园　何雪梅　孙健　易萍　 李昌宝　刘国明　盛金凤　韦珍　 陈茜　饶川艳　 (74)专利代理 机构 南宁市科典知识产权代理事 务所(普通 合伙) 4513 5 专利代理师 戴秋连 (51)Int.Cl. C08B 37/00(2006.01) A61K 31/715(2006.01) A61P 1/16(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 从火龙果茎中提取的活性多糖类化合物及 其制备方法和应用 (57)摘要 本发明属于多糖制备技术领域， 具体涉及从 火龙果茎中提取的活性多糖类化合物， 所述活性 多糖类化合物的组分化学 结构式为： 所述活性多糖类化合物 的分子量为134.282kDa； 所述活性多糖类化合物 为摩尔比为1.00:11.94:3.05的鼠李糖、 半乳糖 和半乳糖醛酸组成的化合物。 本发 明还提供上述 活性多糖类化合物的制备方法及其在抗肝癌药 物中的应用。 本发明制备活性多糖类化合物的步 骤简单， 且制备得到的活性多糖类化合物具有较 佳的抗肝癌活性。 权利要求书2页 说明书9页 附图5页 CN 115057949 A 2022.09.16 CN 115057949 A 1.从火龙果茎中提取的活性多糖类化合物， 其特征在于， 所述活性多糖类化合物的组 分化学结构式为： 所述活性多糖 类化合物的分子量 为134.282kDa； 所述活性多糖类化合物为摩尔比为1.00:11.94:3.05的鼠李糖、 半乳糖和半乳糖醛酸 组成的化 合物。 2.如权利要求1所述从火龙果茎 中提取的活性多糖类化合物的制备方法， 其特征在于， 包括以下步骤： (1)原料预处理： 取新鲜 的火龙果茎， 洗净， 去除有疤痕的果茎后切块， 打浆， 得火龙果 茎浆料， 按照固液比1 g:30‑50mL向火龙果茎浆料中加入体积分数为90％乙醇溶液， 过滤， 收 集固体物， 冷冻干燥， 得到预处 理火龙果茎粉末； (2)低共熔溶剂溶液制备： 将甜菜碱、 香叶醇按摩尔比为1.0 ‑1.5:3.0‑3.5的比例混合， 得到低共熔 溶剂， 向低共熔 溶剂加入蒸馏水， 得到低共熔 溶剂溶液， 备用； (3)多糖提取： 将步骤(1)得到的预处理火龙果茎粉末与步骤(2)得到的低共熔溶剂溶 液充分混合均匀， 得到混合物； 将混合物超声提取后， 在6000 ‑8000rpm/min条件下离心15 ‑ 20min， 收集和浓 缩上清液， 得到浓 缩液； (4)多糖醇沉： 向浓缩液中按照体积比1:3 ‑4， 加入无水乙醇并在4℃环境 中静置20 ‑24h 进行第一次醇沉， 过 滤， 得到火龙果茎粗多糖； (5)多糖分离： 采用离子交换柱对火龙果茎粗多糖进行初步分离， 按顺序依次以超纯水 及浓度为0.2M、 0.5M和1.0M的NaCl溶液进行梯度洗脱， 流速为1 ‑2mL/min； 根据洗脱曲线选 取质量最多的多糖组分洗脱峰段， 按峰对洗脱 液进行合并收集， 旋蒸浓缩后经3 ‑3.5kD超滤 膜透析3‑4天， 冷冻干燥备用； (6)多糖纯化： 按照固液比1g:40 ‑50mL向步骤(5)得到的质量最多的多糖组分加入超纯 水溶解， 通过全自动凝胶纯化系统进行纯化， 收集对称峰对应的收集液， 将收集液透析， 通 过旋转蒸发仪进行浓 缩， 得到火龙果茎多糖组分浓 缩液； (7)多糖二次醇沉： 向步骤(6)的火龙果茎多糖组分浓缩液中按照体积比1:3加入无水 乙醇并在4℃环境中放置16 ‑20h进行第二次醇沉， 过 滤， 收集沉淀物； (8)多糖干燥： 将步骤(7)收集的沉淀物冷冻干燥， 即得活性多糖 类化合物。 3.如权利要求2所述从火龙果茎 中提取的活性多糖类化合物的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(2)中， 甜菜碱、 香叶醇按摩尔比为1.2:3.2。 4.如权利要求2所述从火龙果茎 中提取的活性多糖类化合物的制备方法， 其特征在于：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115057949 A 2所述步骤(2)中， 向低共熔 溶剂加入蒸馏水， 得到含水量 为30％‑40％的低共熔 溶剂溶液。 5.如权利要求2所述从火龙果茎 中提取的活性多糖类化合物的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中， 将步骤(1)得到的预处理火龙果茎粉末与步骤(2)得到的低共熔溶剂溶液 按固液比为10 0‑120g:1L的比例充分 混合均匀。 6.如权利要求2所述从火龙果茎 中提取的活性多糖类化合物的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中， 浓 缩上清液至原溶 液体积的1/ 3‑1/4倍。 7.如权利要求2所述从火龙果茎 中提取的活性多糖类化合物的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中， 将混合物于 55‑65℃下超声提取6 0‑80min。 8.如权利要求1 ‑7任意一项所述从火龙果茎 中提取的活性多糖类化合物在抗肝癌药物 中的应用。 9.如权利要求8所述从火龙果茎中提取的活性多糖类化合物在抗肝癌药物中的应用， 其特征在于， 所述活性多糖 类化合物的浓度为10 0‑1000 μg/mL。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115057949 A 3