(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211016196.4 (22)申请日 2022.08.24 (71)申请人 中国人民解 放军空军 军医大学 地址 710032 陕西省西安市新城区长乐西 路17号 (72)发明人 周四元　韩颖　刘道洲　成颖　 纪奇峰　刘苗　张邦乐　 (74)专利代理 机构 西安文盛专利代理有限公司 61100 专利代理师 佘文英 (51)Int.Cl. A61K 9/127(2006.01) A61K 31/7048(2006.01) A61K 47/24(2006.01) A61K 47/28(2006.01)A61P 35/00(2006.01) A61K 36/896(2006.01) (54)发明名称 以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的 制备方法及应用 (57)摘要 本发明公开了一种以重楼皂苷活性提取物 为膜材的脂质体的制备方法及应用。 以重楼皂 苷、 胆固醇和磷脂为原料， 利用重楼皂苷具有类 固醇结构的特点， 将重楼皂苷活性提取物作为脂 质体膜材， 制备脂质体， 该脂质体具有溶血性低、 安全性高、 成膜性好、 稳定性优的特点。 本发明制 备的以重楼皂苷活性提取物为膜材的新型脂质 体能高效富集于肿瘤细胞并抑制肿瘤细胞增殖， 利用重楼皂苷具有糖基结构和抗肿瘤的药理作 用， 提高脂质体的抗肿瘤效应 。 权利要求书1页 说明书4页 附图4页 CN 115429759 A 2022.12.06 CN 115429759 A 1.一种以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制备方法， 其特征是采用乙醇提取 ‑ 柱层析方法分离得到重楼皂苷活性提取物， 利用重楼皂苷具有类固醇的特点， 将重楼皂苷 活性提取物作为膜材， 采用薄膜水化 ‑超声法制备脂质体； 准确称取重楼皂苷活性提取物、 胆固醇和磷脂， 溶解于适量无水甲醇/二氯甲烷中； 45℃水浴中减压旋转蒸发去除有机溶 剂， 形成薄而均匀的脂膜； 脂膜干燥后， 注入适量氮气以保护脂膜， 加 入pH 7.4PBS， 55℃水 浴中水化， 超声功率3 00W下超声3mi n， 即得以重楼皂苷活性 提取物为膜材的脂质体。 2.如权利要求1所述的以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制备方法， 其特征是 以重量计皂苷： 胆固醇： 磷脂＝2:1:10， 以体积计无 水甲醇： 二氯甲烷 ＝1:1。 3.如权利要求1所述的以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制备方法制成的脂质 体在制备治疗肿瘤疾病药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115429759 A 2以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制备方 法及应用 技术领域 [0001]本发明涉及 生物制药领域， 具体涉及以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制 备方法。 背景技术 [0002]在目前抗肿瘤的治疗方法中， 单一靶点的药物治疗很难满足治疗需求， 临床试验 结果显示， 多靶点抑制剂在治疗方面优于单靶点抑制剂， 不仅能减少传统治疗的毒副作用， 还能摆脱单靶点治疗可能带来的耐药性。 [0003]中药重楼具有清热解毒、 消肿止痛、 凉肝定惊的药理作用， 重楼常被 组成方剂用于 癌症的治疗， 可改善耐药性及病人的生命质量。 以重楼为主组成的止痛抗癌丸， 对癌症晚期 有较好的止痛效果。 [0004]重楼皂苷是重楼的主要有效成分， 占其总化合物的80％以上， 重楼皂苷提取物中 含有多种活性的单体甾体皂苷， 包括重楼皂苷 I、 重楼皂苷 II、 重楼皂苷VI、 重楼皂苷V II等， 可以通过促凋亡、 抗炎、 抗血管生成、 抑制肿瘤细胞信号转导等多种机制抗肿瘤， 其抗肿瘤 效应大大优于单一的活性单体。 [0005]然而， 重楼皂苷静注溶血作用强、 口服吸收差， 导致重楼皂苷成药性差， 临床应用 严重受限。 重楼皂苷具有类固醇的结构， 具有与胆固醇类似的调节磷脂流动性的作用， 可以 作为脂质体制备的膜材。 重楼皂苷还含有糖基结构， 能通过GLUT1被肿 瘤细胞摄取， 脂质体 被肿瘤细胞摄取后， 释放出 的重楼皂苷 能抑制肿瘤细胞的增殖， 可与所载药物协同治疗肿 瘤， 是一种高效治疗肿瘤的新型脂质体。 发明内容 [0006]本发明的目的是提供一种以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制备方法及 应用， 用于抗肿瘤治疗。 重楼皂苷具有类固醇结构， 将重楼皂苷作为脂质体膜材制备脂质 体， 能降低重楼皂苷的溶血性， 提高重楼皂苷的成药性和安全性。 同时， 重楼皂苷具有糖基 结构和抗肿瘤的药 理作用， 能通过GLUT1高效富集于肿瘤细胞内， 释放的多种重楼皂苷活性 单体分子可通过多种机制抑制肿瘤 细胞的增殖。 [0007]本发明的技术方案是： 一种以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制 备方法， 采用乙醇提取 ‑柱层析方法分离得到重楼皂苷活性提取物， 利用重楼皂苷具有类固醇的特 点， 将重楼皂苷活性提取物作为膜材， 采用薄膜水化 ‑超声法制备脂质体。 准确称取重楼皂 苷活性提取物、 胆固醇和磷脂(皂苷： 胆固醇： 磷脂＝2:1:10， w/w/w)， 溶解于适量无水甲醇/ 二氯甲烷(1:1， v/v)中。 45℃水浴中减压旋转蒸发去除有机溶剂， 形成薄而均匀的脂膜。 脂 膜干燥后， 注入适量氮气以保护脂膜， 加 入pH 7.4PBS， 55℃水浴中水化， 超声3min(超声功 率300W)， 即得以重楼皂苷活性 提取物为膜材的脂质体。 [0008]本发明利用重楼皂苷具有糖基结构， 促进重楼皂苷经由肿瘤细胞表面的GLUT1转 运体高效富集于肿瘤细胞内， 释放的多种重楼皂苷活性单体能通过多种机制抑制肿瘤细胞说　明　书 1/4 页 3 CN 115429759 A 3