(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211145120.1 (22)申请日 2022.09.20 (71)申请人 中国食品药品检 定研究院 地址 102629 北京市大兴区华佗路31号 (72)发明人 崔博沛　宋丽芳　高秋爽　王茜　 吴星　高帆　刘明琛　毛群颖　 梁争论　 (74)专利代理 机构 北京君智知识产权代理事务 所(普通合伙) 11305 专利代理师 黄绿雯 (51)Int.Cl. A61K 35/768(2015.01) A61K 45/06(2006.01) A61K 31/5377(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 具备溶瘤作用的柯萨奇病毒B组5型及其应 用 (57)摘要 本发明提供CV ‑B5Faulkner株在制备人肺癌 肿瘤的药物中的应用， 特别是应用于提高肿瘤组 织内特异性T细胞、 NK细胞的百分率， 以及诱导肿 瘤内CD4+T细胞、 CD8+T细胞、 NK细胞的浸润。 本发 明还提供该毒株与 DNA‑PK抑制剂或与ATM抑制剂 的联用在制备治疗肿瘤的药物中的应用。 本发明 确认CV‑B5/Faulkner不感染正常肺组织细胞且 可以明显 杀伤肺癌细胞系。 对于体内溶瘤效果较 差的H460细胞， 通过联合使用DNA ‑PK抑制剂或 ATM抑制剂可 发挥明显的依赖ER应激的协同增强 作用。 本发明通过蛋白水平、 细胞水平和体内水 平实验证实了该病毒具备良好选择性、 靶向性和 治疗作用。 权利要求书1页 说明书12页 附图17页 CN 115518082 A 2022.12.27 CN 115518082 A 1.柯萨奇病毒B组5型在制备治疗肺癌肿瘤的药物中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于所述药物提高肿瘤组织内特异性T细胞、 NK 细胞的百分率。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在 于所述药物诱导肿瘤内CD4+T细胞、 CD8+T细胞、 NK细胞的浸润。 4.柯萨奇病毒B组5型Faulkner株与DNA ‑PK抑制剂的联用在制 备治疗肿瘤的药物中的 应用。 5.根据权利要求 4所述的应用， 其特 征在于所述DNA ‑PK抑制剂是NU74 41。 6.根据权利要求 4所述的应用， 其特 征在于药物应用于表达p5 3的肿瘤细胞的溶瘤。 7.柯萨奇病毒B组5型Faulkner株与ATM抑制剂的联用在制备治疗肿瘤的药物中的应 用。 8.根据权利要求7 所述的应用， 其特 征在于所述ATM抑制剂是 KU60019。 9.根据权利要求7 所述的应用， 其特 征在于药物应用于表达p5 3的肿瘤细胞的溶瘤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115518082 A 2具备溶瘤作用的柯萨奇病毒B组5型及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及 生物医药技术领域和靶向药物技术， 特别涉及一种具备溶瘤作用的柯 萨奇病毒B组5型， 还涉及所述病毒在制备 药物中的应用。 背景技术 [0002]溶瘤病毒是指一类可以利用病毒选择性在肿瘤细胞中复制进而溶解肿瘤细胞， 而 对正常组织无损伤的自然状态或基因改造过的病毒。 目前世界范围内共有四款溶瘤病毒 上 市， 用于治疗恶性 黑色素瘤、 头 颈部癌等。 [0003]肠道病毒(Enterovirus， EV)是引起婴幼儿手足口病、 疱疹性咽峡炎、 脱甲症、 心肌 炎、 无菌性脑膜炎等疾病的主要病原体， 根据其基因和抗原特性可以分为EV ‑A‑H、 J和鼻病 毒A‑C等12组。 EV的受体包括脊髓灰质炎病毒受体(PVR)、 细胞间黏附分子 ‑1(ICAM‑1)、 柯萨 奇病毒和腺病毒受体(CAR)、 衰变加速因子(DAF)、 清道夫受体2、 硫酸乙酰肝素等。 相关研究 已证实某些EV受体会过表达于某些肿瘤细胞的表面， 赋予了天然肠道病毒溶瘤作用和选择 杀伤作用。 目前已发现的具备溶瘤作用的肠道病毒包括柯萨 奇病毒A21(CV ‑A21)、 埃克病毒 7型(ECHO  7)、 脊髓灰质炎病毒(PV)、 柯萨奇病毒B组3型(CV ‑B3)等， 其中ECHO  7(商品名： )已在拉脱维亚等国批准上市用于治疗早期恶性黑色素瘤， CV ‑A21(商品名： )和PV都已进入临床试验 阶段。 不同种类的EV的受体不同， 例如PV可以利用高 表达的PVR感染并杀伤恶性胶质瘤细胞， CV ‑A21利用高表达的ICAM ‑1和DAF感染乳腺癌、 结 直肠癌、 胰腺癌等细胞系， 但对相应的正常组织无毒性或仅有弱毒性。 [0004]溶瘤病毒通过特异性受体感染宿主细胞后， 通过复制释放出大量病原体相关分子 模式和损伤相关分子模式， 激活固有免疫和适应性免疫应答， 产生大量细胞因子和趋化因 子， 并招募淋巴细胞改变肿瘤组织内的免疫抑制 状态。 柯萨奇病毒溶瘤作用和抗原检测试 剂研究(崔博沛， 2020年)筛选与评价了溶瘤柯萨奇病毒， 发现柯萨奇病毒B组5型(CV ‑B5)在 裸鼠荷瘤动物模型中具有治疗作用。 然而， 肿瘤细胞存在众多信号通路的异常活化， 使得病 毒的溶瘤作用被极大削弱， 目前尚缺乏该病毒联用特异性 通路的抑制剂方面的研究。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种对肺癌肿瘤具有治疗意义的溶瘤病毒， 并验证其与特异 性通路的抑制剂联用所 具备的效果。 [0006]基于此， 本发明提供CV ‑B5 Faulkner株在制备人肺癌肿瘤的药物中的应用， 所述 肿瘤还包括肝癌细胞、 胰腺癌细胞、 宫颈癌细胞等。 [0007]特别是应用于提高肿瘤组织内特异性T细胞、 NK细胞的百分率， 以及诱导肿瘤内 CD4+T细胞、 CD 8+T细胞、 NK细胞的浸润。 [0008]另一方面， 本发明还提供柯萨奇病毒B组5型Faulkner株与DNA ‑PK抑制剂的联用在 制备治疗肿瘤的药物中的应用。 [0009]根据一种优选的实施方式， DNA ‑PK抑制剂是NU74 41。说　明　书 1/12 页 3 CN 115518082 A 3