(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210961161.1 (22)申请日 2022.08.11 (66)本国优先权数据 202210938251.9 202 2.08.05 CN (83)生物保 藏信息 CGMCC No.3600 2010.02.0 3 (71)申请人 武汉滨会生物科技股份有限公司 地址 430000 湖北省武汉市东湖新 技术开 发区高新大道666号武汉国家生物产 业基地项目B、 C、 D区研发楼B1栋2楼 B272-4室 (72)发明人 刘滨磊　倪鹏　 (74)专利代理 机构 武汉派富知识产权代理事务 所(普通合伙) 42305 专利代理师 章洪(51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 35/763(2015.01) A61K 47/18(2006.01) C12N 7/01(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C12R 1/93(2006.01) (54)发明名称 包封的溶瘤病毒遗传物质及其应用 (57)摘要 本申请公开了包封的溶瘤病毒遗传物质及 其应用。 本申请用脂质体包封 溶瘤病毒的遗传物 质构建一种脂质纳米颗粒。 利用该脂质纳米颗粒 进行抗肿瘤， 可以解决直接用溶瘤病毒系统给药 抗肿瘤的过程中由于病毒激活患者的先天和获 得免疫导致抗病毒的问题， 拥有更好的抗肿瘤效 果。 另外， 本申请公开了一种抗肿瘤用药的制备 方法， 该方法不仅降低了抗肿瘤用药生产批次的 批间差和外源因子污染的风险； 增强了抗肿瘤药 物的储存和运输稳定性； 有利于抗肿瘤药物注射 方式的进一 步拓展。 权利要求书1页 说明书9页 附图3页 CN 115227674 A 2022.10.25 CN 115227674 A 1.一种脂质纳米颗粒， 其包括以下组分： 编码溶瘤病毒的遗传物质； 所述溶瘤病毒包括重组溶瘤I或I I型单纯疱疹病毒； 以及 脂质体； 所述脂质体包括阳离 子脂质化合物与辅助分子的组合； 所述脂质体包封所述遗传物质以形成所述脂质纳米颗粒。 2.根据权利要求1所述的脂质纳米颗粒， 其中所述遗传物质为DNA或RNA的一种。 3.根据权利要求1所述的脂质纳米颗粒， 其中所述溶瘤病 毒为重组溶瘤I型或II型单纯 疱疹病毒， 其遗传物质为DNA。 4.根据权利要求1所述的脂质纳米颗粒， 其中所述溶瘤病毒为重组溶瘤II型单纯疱疹 病毒， 其遗传物质为DNA。 5.根据权利要求4所述的脂质纳米颗粒， 其中所述重组溶瘤单纯疱疹病毒包括重组人 GM‑CSF溶瘤II型单纯疱疹病毒， 其遗传物质为DNA。 6.根据权利要求1所述的脂质纳米颗粒， 其中所述阳离子脂质化合物包括十七烷 ‑9‑基 8‑((2‑羟乙基)(6 ‑氧代‑6‑(十一烷氧基)己基)氨基)辛酸酯、 (2,3 ‑二油酰基 ‑丙基)‑三甲 基铵‑氯盐中的一种或组合。 7.根据权利要求1所述的脂质纳米颗粒， 其中所述辅助分子包括二硬脂酰磷脂酰胆碱、 胆固醇及1,2 ‑二肉豆蔻酰 ‑rac‑甘油‑3‑甲氧基聚乙二醇20 00。 8.根据权利要求7所述脂质纳米颗粒， 其中所述阳离子脂质化合物和辅助分子的摩尔 比例是： 阳离子脂质化合物： 二硬脂酰磷脂酰胆碱： 胆固醇： 1,2 ‑二肉豆蔻酰 ‑rac‑甘油‑3‑ 甲氧基聚乙二醇20 00为(40～5 5)： (5～15)： (3 0～45)： (1～5)。 9.权利1～8任一项所述脂质纳米颗粒的制备方法， 包括： 溶瘤病 毒遗传物质的初提取； 所述溶瘤病毒为重组溶瘤I或II型单纯疱疹病毒； 溶瘤病毒遗传物质的纯化、 回收； 制备脂 质体溶液； 其中所述脂质体溶液包含的阳离子脂质化合物和辅助分子的摩尔比例与权利要 求8的比例一致； 以及用制备的脂质体溶液包封溶瘤病毒的遗传物质， 即得到所述的脂质纳 米颗粒。 10.权利要求1～8任一项所述脂质纳米颗粒在抗肿瘤的应用。 11.一种药物或疫苗， 其包含权利要求1～8任一项所述的脂质纳米颗粒及药学可接受 的辅料。 12.权利要求1 1所述药物或疫苗在抗肿瘤的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115227674 A 2包封的溶瘤病毒遗传物质及其应用 技术领域 [0001]本申请涉及采用溶瘤病毒抗肿瘤技术领域， 尤其涉及包封 的溶瘤病  毒遗传物质 及其应用。 背景技术 [0002]溶瘤病毒是一类具有复制能力的肿瘤杀伤型病毒， 采用溶瘤病毒来  抗肿瘤越来 越得到认可， 其原理是通过对自然界存在的一些致病力较弱  的病毒进行基因改造制成特 殊的溶瘤病毒， 利用靶细胞中抗病毒基因或  抑癌基因的失活或缺陷从而选择性地感染肿 瘤细胞， 在其内大量复制并  最终摧毁肿瘤细胞。 同时它还能激发免疫反应， 吸引更多免疫 细胞来继 续杀死残余癌细胞。 近几十年来， 溶瘤病毒治疗引起了广泛关注， 相关  研究取得 了巨大进 展。 [0003]单纯疱疹病毒， 包括I型单纯疱疹病毒和II型单纯疱疹病毒， 由于  其嗜肿瘤特性 而常被用来改造成溶瘤病毒， 它识别并选择性地感染肿瘤  细胞， 最终导致细胞溶胀而摧毁 肿瘤细胞， 但无法在正常机体细胞内复  制而不具有 杀伤作用， 理论上具有更高的抗肿瘤效 应和更低的副作用。 [0004]在溶瘤病毒中， 其中重组溶瘤单纯疱疹病毒是一种大有发展潜力的  用于癌症免 疫治疗手段的溶瘤病毒， 如人GM ‑CSF溶瘤II型单纯疱疹病  毒(后简称 “OH2病毒”)， 它能选 择性地感染肿瘤细胞， 并在肿瘤细胞  中复制， 最 终裂解、 杀死肿瘤细胞， 并释放出子代病毒 颗粒进一步感染  周围的肿瘤细胞， 此过程还有助于肿瘤相关抗原的释放。 OH2病毒的抗  肿 瘤效应不仅表现在病毒的复制直接杀伤肿瘤细胞或病毒蛋白的直接毒  性作用； 最近越来 越多的证据 表明OH2病毒 可以调节免疫抑制性肿瘤微  环境， 有利于 打破免疫耐受而激发抗 肿瘤免疫反应。 肿瘤细胞的裂解导  致肿瘤相关抗原(TAA)的释放， 诱导体内系统性的抗肿 瘤免疫反应。 [0005]目前， 溶瘤病毒的制备方法主要是通过培养细胞， 再在细胞培养到  一定阶段后接 毒， 然后收获并纯化溶瘤病毒， 然而现行的溶瘤病毒制备  方法存在工艺繁琐、 成本较高、 批 间差较大、 微 生物污染风险较高等问  题。 [0006]具有复制能力的溶瘤病毒在临床系统给药极具挑战， 溶瘤病毒作为  抗肿瘤药物， 在对患者进 行静脉注射时， 溶瘤病毒会引起先天及获得免  疫强烈的抗病毒作用， 从而导致 患者产生非特异性炎症反应， 且产生的  中和溶瘤病毒抗体会阻止溶瘤病毒对肿瘤细胞 的 感染及溶解作用， 降低  了抗肿瘤的效果。 [0007]在本领域中， 具有复制能力的、 有效抗肿瘤的溶瘤病毒或相关疫苗、  药品仍然处 于未满足的需求， 因此， 亟需提供全新的用于抗肿瘤物质和/  或组合物， 及生产该物质和/ 或组合物的方法。 发明内容 [0008]本申请发明人提供了一种全新的生产抗肿瘤物质及其方法， 所述的  抗肿瘤物质说　明　书 1/9 页 3 CN 115227674 A 3