(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211232275.9 (22)申请日 2022.10.10 (71)申请人 中国科学院昆明植物研究所 地址 650201 云南省昆明市盘龙区蓝黑路 132号 (72)发明人 陈纪军　何小凤　李天泽　耿长安　 马云保　张雪梅　黄晓燕　胡敬　 (74)专利代理 机构 昆明祥和知识产权代理有限 公司 53114 专利代理师 马晓青 (51)Int.Cl. C07D 307/94(2006.01) C07D 493/10(2006.01) A61K 31/365(2006.01) A61K 31/366(2006.01)A61K 31/37(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 南牡蒿内酯A-D及其药物组合物和其应用 (57)摘要 本发明提供南牡蒿内酯A –D及其药物组合物 和其应用， 属于药物技术领域。 本发明的结构式 （I）所示4个倍半萜二聚体， 南牡蒿内酯A –D （artemeriopolides  A‒D， 1–4） 对人肝癌细胞株 HepG2、 Huh 7和SK‑Hep‑1具有细胞毒活性， 能够与 可药用载体或赋型剂组成药物组合物， 可用于制 备抗肝癌药物。 权利要求书2页 说明书10页 附图2页 CN 115490660 A 2022.12.20 CN 115490660 A 1.如下结构式(I)所示的南牡蒿内酯A –D， 2.权利要求1所述的结构式(I)所示的南牡蒿内酯A –D的制备方法： 取干燥的南牡蒿地 上部分， 粉碎， 用3倍量的90％乙醇提取两次， 合并提取液减压浓缩后得到的粗浸膏分散于 水中， 用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯萃取部分； 随后， 将乙酸乙酯萃取部分过硅胶柱层析， 并用丙酮 ‑石油醚体积比0:100、 5:95、 10:90、 20:80、 40:60和100:0梯度洗脱得到8个流分 Frs.A‑1～A‑8； Fr.A‑4过MCI gel CHP 20P柱层析， 用甲醇 ‑水50:50、 70:30、 90:10和100:0 洗脱得到了四个亚流分Frs.A ‑4a‑A‑4d； Fr.A‑4c再使用硅胶柱层析， 以丙酮 ‑石油醚5:95、 10:90和20:80划分成六个流 分Frs.A‑4c‑1‑A‑4c‑6； Fr.A‑4c‑4首先经过Sepha dex LH‑20用 甲醇‑氯仿50:50洗脱， 再用Rp ‑C18柱层析， 以甲醇 ‑水50:50、 60:40、 70:30和80:20处理， 最后 经半制备高效液相HPLC在安捷伦XDB ‑C18柱上以80:20甲醇 ‑水和53:47的乙腈 ‑水依次纯化 得到化合物1南牡蒿内酯A； Fr.A ‑4c‑6经Sephadex  LH‑20柱层析， 甲醇 ‑氯仿50:50洗脱， 再 用Rp‑C18柱层析， 以甲醇 ‑水50:50、 60:40、 70:30和80:20处理， 最后经半制备 高效液相HPLC 在安捷伦XDB ‑C18柱上以78: 22甲醇‑水和60:40的乙腈 ‑水依次纯化 得到化合物4南牡蒿内酯 D； Fr.A‑5经MCI gel CHP 20P柱层析， 甲醇 ‑水50:50、 70:30、 9 0:10和100:0洗脱得到了四个 流分Frs.A ‑5a‑A‑5d； Fr.A‑5c进一步用反相Rp ‑C18柱层析， 用甲醇 ‑水50:50、 60:40、 70:30和 100:0梯度洗脱得到四个亚流分Frs.A ‑5c‑1‑A‑5c‑4； Fr.A‑5c‑2经过硅胶柱层析， 以丙酮 ‑ 氯仿5:95和10:90洗脱得到了五个流分Frs.A ‑5c‑2a‑A‑5c‑2e； Fr.A‑5c‑2a经过Sephadex   LH‑20柱层析， 用甲醇 ‑氯仿50:50处理之后， 再使用半制备HPLC在Agilent  XDB‑C18柱用以 68:32的乙腈 ‑水纯化得到化合物2南牡蒿内酯B； Fr.A ‑5c‑3经反复的硅胶柱层析以丙酮 ‑氯 仿10:90和 20:80洗脱之后， 再过Sephadex  LH‑20柱层析用甲醇 ‑氯仿50:50处理， 最后使用 半制备HPLC在安捷伦XDB ‑C18柱以乙腈 ‑水68:32纯化得到化 合物3南牡蒿内酯C 。 3.权利要求1所述的结构式(I)所示的南牡蒿内酯A –D在制备抗 肝癌药物中的应用。 4.包括权利要求1所述的结构式(I)所示的南牡蒿内酯A –D的至少一种和药学上可接受 的载体的药物组合物。 5.权利要求 4所述的药物组合物在制备抗 肝癌药物中的应用。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115490660 A 26.权利要求4所述的药物 组合物的制备方法： 取干燥的南牡蒿地上部分， 粉碎， 用3倍量 的90％乙醇提取两次， 合并提取液减压浓缩后得到的粗浸膏分散于水中， 用乙酸乙酯萃取 得到乙酸乙酯萃取部分； 随后， 将乙酸乙酯萃取部分过硅胶柱层析， 并用丙酮 ‑石油醚体积 比0:100、 5:95、 10:9 0、 20:80、 40:60和100:0梯度洗脱得到8个流 分Frs.A‑1～A‑8； Fr.A‑4过 MCI gel CHP 20P柱层析， 用甲醇 ‑水50:50、 70:30、 90:10和100:0洗脱得到了四个亚流分 Frs.A‑4a‑A‑4d； Fr.A‑4c再使用硅胶柱层析， 以丙酮 ‑石油醚5:95、 10:90和20:80划分成六 个流分Frs.A ‑4c‑1‑A‑4c‑6； Fr.A‑4c‑4首先经过Sephadex  LH‑20用甲醇 ‑氯仿50:50洗脱， 再用Rp‑C18柱层析， 以甲醇 ‑水50:50、 60:40、 70:30和80:20处理， 最后经半制备高效液相 HPLC在安捷伦XDB ‑C18柱上以80:20甲醇 ‑水和53:47的乙腈 ‑水依次纯化得到 化合物1南牡蒿 内酯A； Fr.A‑4c‑6经Sephadex  LH‑20柱层析， 甲醇 ‑氯仿50:50洗脱， 再用Rp ‑C18柱层析， 以甲 醇‑水50:50、 60:40、 70:30和80:20处理， 最后经半制备高效液相HPLC在安捷伦XDB ‑C18柱上 以78:22甲醇 ‑水和60:40的乙腈 ‑水依次纯化得到化合物4南牡蒿内酯D； Fr.A ‑5经MCI gel  CHP 20P柱层析， 甲醇 ‑水50:50、 70:30、 9 0:10和100:0洗脱得到了四个流 分Frs.A‑5a‑A‑5d； Fr.A‑5c进一步用反相Rp ‑C18柱层析， 用甲醇 ‑水50:50、 60:40、 70:30和100:0梯度洗脱得到 四个亚流分Frs.A ‑5c‑1‑A‑5c‑4； Fr.A‑5c‑2经过硅胶柱层析， 以丙酮 ‑氯仿5:95和10:90洗 脱得到了五个流分Frs.A ‑5c‑2a‑A‑5c‑2e； Fr.A‑5c‑2a经过Sephadex  LH‑20柱层析， 用甲 醇‑氯仿50:50处理之后， 再使用半制备HPLC在Agilent  XDB‑C18柱用以68:32的乙腈 ‑水纯化 得到化合物2南牡蒿内酯B； Fr.A ‑5c‑3经反复的硅胶柱层析以丙酮 ‑氯仿10:90和20:80洗脱 之后， 再过Sephadex  LH‑20柱层析用甲醇 ‑氯仿50:50处理， 最后使用半制备HPLC在安捷伦 XDB‑C18柱以乙腈 ‑水68:32纯化得到化合物3南牡蒿内酯C； 然后取化合物1 –4即南牡蒿内酯 A‑D中的其中一种或其任意组合， 加入可 药用载体。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115490660 A 3