ICS71.100.70 CCSY42 中华人民共和国国家标准 GB/T45213—2025 化妆品中阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因 的测定 液相色谱-串联质谱法 Determiantionofamylocaine,butanilicaineandpramocaineincosmetics— Liquidchromatography-tandemmassspectrometry 2025-01-24发布 2025-08-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中国轻工业联合会提出。 本文件由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。 本文件起草单位:天津海关动植物与食品检测中心。 本文件主要起草人:陈旭艳、马兴、章骅、常春艳、李淑静。 ⅠGB/T45213—2025 引 言 本文件的被测物质是我国《化妆品安全技术规范(2015年版)》规定的禁用原料。 禁用原料是指不得作为化妆品原料使用的物质。《化妆品安全技术规范(2015年版)》规定:若技术 上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时,国家有限量规定的应符合其规定;未规定限量的,应进行 安全性风险评估,确保在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害。 目前我国尚未规定这些物质的限量值,本文件的制定,仅为化妆品中测定这些物质提供检测方法。 ⅡGB/T45213—2025 化妆品中阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因 的测定 液相色谱-串联质谱法 警示———使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问 题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关规定的条件。 1 范围 本文件描述了化妆品中阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因3种卡因类物质的液相色谱-串联质谱测定 法的原理、试剂和材料、仪器设备、试样制备和试验步骤、试验数据处理、回收率和精密度等内容。 本文件适用于水剂类、液态油剂类、膏霜类、乳液类、粉类化妆品中阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因3 种卡因类物质的测定。 本文件方法的检出限和定量限:阿米卡因检出限为1μg/kg,定量限为3μg/kg;布坦卡因检出限为 6μg/kg,定量限为20μg/kg;普莫卡因检出限为0.3μg/kg,定量限为1μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 水剂类、膏霜类、乳液类、粉类试样经甲醇涡旋振荡(液态油剂类试样经四氢呋喃涡旋振荡),甲醇定 容,超声提取,离心过滤后,得到目标物待测溶液,将目标物待测溶液注入液相色谱-串联质谱仪,采用液 相色谱分离,质谱检测器检测,保留时间和质谱的相对离子丰度定性,外标法定量。 5 试剂和材料 除非另有规定,仅使用分析纯试剂。 5.1 水:GB/T6682,一级。 5.2 甲醇:色谱纯。 5.3 乙腈:色谱纯。 5.4 四氢呋喃:色谱纯。 5.5 甲酸:色谱纯。 5.6 标准物质/标准样品:纯度不小于96%。阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因的英文名称、CAS号、分子 1GB/T45213—2025 式、相对分子质量和结构式见附录A中表A.1。 5.7 0.1%(体积分数)甲酸水溶液:准确量取1mL甲酸(5.5)至1000mL容量瓶中,用水定容至刻度。 5.8 阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因标准储备溶液(1mg/mL):分别准确称取阿米卡因、布坦卡因、普莫 卡因标准物质/标准样品(5.6)(精确至0.1mg)用甲醇(5.2)溶解并定容至10mL,于4℃避光保存,保 存期为3个月。 5.9 滤膜:孔径为0.22μm的有机过滤膜。 6 仪器设备 6.1 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(LC-MS/MS):配电喷雾离子源(ESI)。 6.2 分析天平:感量0.001g和0.00001g。 6.3 离心机:最高转速不低于8000r/min。 6.4 超声波清洗仪:频率不低于40kHz。 6.5 涡旋振荡器。 7 试样制备和试验步骤 7.1 试样制备 7.1.1 取样 取样前应将试样充分混匀。水剂类、液态油剂类试样将试样摇匀后取样;乳液类和膏霜类试样将试 样挤出、混匀后取样;散粉类试样搅拌混匀后取样,粉饼状试样碾碎后搅拌混匀取样。 7.1.2 水剂类、膏霜类、乳液类、粉类化妆品试样处理 称取试样约1g(精确至0.01g)于15mL带刻度离心管中,加甲醇(5.2)8mL,涡旋振荡1min使基 质均匀分散,用甲醇(5.2)定容至10mL,超声提取20min,混匀,于5000r/min下离心5min,上清液 经0.22μm有机滤膜过滤,滤液作为试样溶液备用。 7.1.3 液态油剂类化妆品试样处理 称取试样约1g(精确至0.01g)于15mL带刻度离心管中,加四氢呋喃(5.4)3mL,涡旋振荡1min 使基质均匀分散,用甲醇(5.2)定容至10mL,超声提取20min,混匀,于5000r/min下离心5min,上 清液经0.22μm有机滤膜过滤,滤液作为试样溶液备用。 7.2 测定参考条件 7.2.1 液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下: a) 色谱柱:C18,100mm×2.1mm(内径),1.9μm(粒径)或相当者; b) 流动相:A为乙腈(5.3),B为0.1%(体积分数)甲酸水溶液(5.7),梯度洗脱,梯度洗脱程序见 表1; c) 柱温:30℃; d) 流速:0.3mL/min; e) 进样量:10μL。 2GB/T45213—2025 表1 液相色谱梯度洗脱程序 时间/min A/% B/% 0.0 10 90 0.1 10 90 2 80 20 5 80 20 6 10 90 7 10 90 7.2.2 质谱参考条件 质谱参考条件如下: a) 离子源:电喷雾离子源(ESI); b) 扫描方式:正离子扫描; c) 电喷雾电压:5500V; d) 离子源温度:650℃; e) 气帘气:0.28MPa(40psi); f) 喷雾气:0.38MPa(55psi); g) 辅助加热气:0.41MPa(60psi); h) 检测方式:多反应监测(MRM)模式,阿米卡因、布坦卡因和普莫卡因的质谱参数见表2。 表2 阿米卡因、布坦卡因和普莫卡因的质谱参数 化合物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 去簇电压/V 碰撞能量/V 阿米卡因 236.1114.1a 85.060 6017 40 布坦卡因 255.086.1a 57.080 8017 46 普莫卡因 294.1100.0a 128.190 9035 28 a定量离子。 7.3 定性测定 每种被测组分选择1个母离子、2个子离子,在相同试验条件下,试样中待测物质的保留时间与标 准溶液中对应的保留时间偏差在±2.5%之内;且试样中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准 溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较,若偏差不超过表3规定的范围,可判定为试样中含有对应 的待测物。 3GB/T45213—2025 表3 定性确证时相对离子丰度允许的相对偏差 相对离子丰度K/% K>50 20<K≤50 10<K≤20 K≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 7.4 定量测定 7.4.1 基质加标标准工作曲线绘制 分别准确吸取阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因标准储备溶液(5.8)0.30mL、2.00mL、0.10mL于 10mL容量瓶中,用甲醇(5.2)定容,制得阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因混合标准储备溶液,溶液中阿米 卡因、布坦卡因、普莫卡因质量浓度分别为30μg/mL、200μg/mL、10μg/mL。 分别准确吸取阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因混合标准储备溶液0.01mL、0.02mL、0.05mL、 0.10mL、0.20mL、0.50mL于10mL容量瓶中,用甲醇(5.2)定容,制得阿米卡因、布坦卡因、普莫卡因 混合标准系列工作溶液,溶液中阿米卡因质量浓度分别为0.03μg/mL、0.06μg/mL、0.15μg/mL、 0.30μg/mL、0.60μg/mL和1.50μg/mL;布坦卡因质量浓度分别为0.20μg/mL、0.40μg/mL、 1.00μg/mL、2.00μg/mL、4.00μg/mL和10.00μg/mL;普莫卡因质量浓度分别为0.01μg/mL、 0.02μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL和0.50μg/mL。 分别称取6份空白样品1g(精确至0.01g)于6只15mL带刻度离心管中,分别准确加入阿米卡 因、布坦卡因、普莫卡因混合标准系列工作溶液0.10mL,其余操作同7.1,制得基质加标标准系列工作 溶液。溶液中阿米卡因质量浓度分别为0.3ng/mL、0.6ng/mL、1.5ng/mL、3.0ng/mL、6.0ng/mL和 15.0ng/mL;布坦卡因质量浓度分别为2.0ng/mL、4.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL 和100.0ng/mL;普莫卡因质量浓度分别为0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、1.0ng/mL