(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210781929.7 (22)申请日 2022.07.05 (71)申请人 新羿制造科技 （北京） 有限公司 地址 102299 北京市昌平区科技园区超前 路甲1号8号楼101室 (72)发明人 苏世圣　夏雷　刘金伟　杨文军　 (51)Int.Cl. C12Q 1/6837(2018.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/16(2006.01) C12M 1/00(2006.01) C12M 1/38(2006.01) C12M 1/36(2006.01) C12M 1/24(2006.01) C12M 1/12(2006.01) (54)发明名称 基于一体式微液滴芯片的微液滴多指标检 测方法 (57)摘要 本发明提供一种基于一体式微液滴芯片的 微液滴多指标检测方法， 包括： 控制对存储于一 级反应腔内的一级体系进行加热， 以使一级体系 中检测样 本由第一浓度扩增为第二浓度； 控制一 级反应腔与加样腔之间形成第一压力差， 以使具 有第二浓度的检测样本与加样腔内的二级体系 混合形成混合检测样本； 将混合检测样本在油液 的作用下分割为多个微液滴； 控制对存储于二级 反应腔内的微液滴加热形成二级扩增； 之后进行 多指标的荧光检测。 本发明提高浓度后的检测样 本能够在一分多混合及反应结构的作用下被划 分为更多检测样本份数而保证每份检测样本皆 具有较高的浓度， 实现了低浓度 样本的多指标检 测， 保证了样本检测的灵敏度， 提高了检测结果 的准确性。 权利要求书2页 说明书9页 附图7页 CN 115094120 A 2022.09.23 CN 115094120 A 1.一种基于一体式微液滴芯片的微液滴多指标检测方法， 其特征在于， 所述一体式微 液滴芯片包括芯片本体(1)， 所述芯片本体(1)上构造有至少一组一分多混合及反应结构、 与每个所述一分多混合及反应结构对应设置的微液滴生成结构及荧光检测区(16)， 每一所 述一分多混合及反应结构包括一级反应腔(11)、 多个加样腔(12)以及多个二级反应腔 (13)； 所述微液滴多指标检测方法包括如下步骤： 一级扩增反应步骤， 控制对存储于所述一级反应腔(11)内的一级体系进行加热， 以使 所述一级体系中检测样本由第一浓度扩增为第二浓度， 所述第二浓度高于所述第一浓度； 样本分流及混合步骤， 控制所述一级反应腔(11)、 所述加样腔(12)分别与所述二级反 应腔(13)之间形成第一压力差， 以使所述具有第二浓度的检测样 本与所述加样腔(12)内的 二级体系混合形成混合检测样本； 微液滴生成步骤， 于所述微液滴生成结构内将所述混合检测样本在油液的作用下分割 为多个微液滴(5)， 并控制形成的所述 微液滴(5)进入所述 二级反应腔(13)内； 二级扩增反应步骤， 控制对存储于所述二级反应腔(13)内的所述微液滴(5)加热形成 二级扩增； 微液滴荧光检测步骤， 于所述荧光检测区(16)处对二级扩增后的所述混合检测 样本进 行多指标的荧 光检测。 2.根据权利要求1所述的微液滴多指标检测方法， 其特征在于， 所述一级反应腔(11)具 有多个并联的第一出液管道(31)， 每个所述加样腔(12)分别具有第二出液管道(32)， 每个 所述加样腔(12)的所述第二出液管道(32)与多个所述第一出液管道(31)分别一一对应地 汇总于混合管道(33)， 多个所述混合管道(33)分别与多个所述二级反应腔(13)一一对应可 控连通； 每一所述一分多混合及反应结构还包括多个流体流动 驱动结构， 所述流体流动 驱 动结构的数量与所述混合管道(33)的个数相等， 每个所述流体流动驱动结构包括构 造于所 述芯片本体(1)上的气液接口(14)， 所述第一压力差由所述气液接口(14)产生。 3.根据权利要求2所述的微液滴多指标检测方法， 其特征在于， 每个所述流体流动驱动 结构还包括构造于所述芯片本体(1)上的油液接口(15)， 所述油液接口(15)通过油液管道 (35)与所述混合管道(3 3)形成交叉， 所述 微液滴生成步骤具体包括： 控制所述加 样腔(12)与所述气液接口(14)之间形成第二压力差， 并控制所述油液接口 (15)与所述气液接口(14)之间形成第三压力差， 所述第二压力差以及第三压力差 分别驱动 所述混合管道(33)内的混合检测样本及生成油在所述油液管道(35)及混合管道(33)的交 叉位置形成所述 微液滴(5)， 并驱动形成的所述 微液滴(5)进入所述 二级反应腔(13)内。 4.根据权利要求3所述的微液滴多指标检测方法， 其特征在于， 以所述芯片本体(1)的 第一侧面处于水平方位为参照， 所述二级反应腔(13)与所述加样腔(12)处于所述第一侧面 上， 在所述 二级扩增反应步骤之前， 在微液滴 生成步骤之后还 包括： 芯片翻转 步骤， 控制所述芯片本体(1)上 下翻转180 °。 5.根据权利要求4所述的微液滴多指标检测方法， 其特征在于， 在控制所述芯片本体 (1)上下翻转180 °后， 还包括： 微液滴反向流动控制步骤， 控制向所述二级反应腔(13)内注入检测推动油(6)， 以使所 述二级反应腔(13)内的微液滴(5)被驱动流入所述混合管道(33)内， 并能够在所述微液滴权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115094120 A 2(5)完成微液滴 荧光检测步骤之后存 储于所述加样 腔(12)内。 6.根据权利要求5所述的微液滴多指标检测方法， 其特征在于， 所述加样腔(12)设置有 滤膜或者 排气孔。 7.根据权利要求2所述的微液滴多指标检测方法， 其特征在于， 所述混合管道(33)具有 多个连续的弯折部； 和/或， 所述 荧光检测区(16)处于所述混合管道(3 3)上。 8.根据权利要求1所述的微液滴多指标检测方法， 其特征在于， 所述芯片本体(1)上还 具有与所述 一级反应腔(1 1)临近设置的加热凹槽， 在所述 一级扩增反应步骤之前还 包括： 控制所述芯片本体(1)移动以使所述加热凹槽套于一级扩增加热模块(4)具有的加热 凸起件(41)上， 并控制所述 一级扩增 加热模块(4)按照预设循环加热扩增。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115094120 A 3