(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210738506.7 (22)申请日 2022.06.28 (71)申请人 江苏亦文生物科技有限公司 地址 223600 江苏省 宿迁市沭阳县高创园 实训楼南楼四楼407/408室 (72)发明人 张军　武建　 (74)专利代理 机构 南京文宸知识产权代理有限 公司 325 00 专利代理师 何苗 (51)Int.Cl. C12Q 1/6851(2018.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) (54)发明名称 一种微流控PCR定量检测方法 (57)摘要 本发明涉及PCR检测技术领域， 且公开了一 种微流控PCR定量检测方法， 包括主板， 所述主板 的底侧壁处贯穿连接有弹夹机构， 所述弹夹机构 的内部包括有连接条、 弹压板和连接轴， 所述弹 压板的侧壁处贯穿连接于连接条的侧壁之间， 所 述连接轴的侧壁贯穿连接于弹压板的侧壁之间， 所述弹夹机构的侧壁前端顶部贯穿连接有插接 机构。 通过设置亲水坑和PCR芯片连接， 腔体内可 设置定量的溶液可供检测， 在检测的过程中可保 持数据的稳定， 两片卡片侧壁之间的空气气压加 强， 将此处的卡片 的两片之间挤压拉开， 那么即 可将活动板侧壁之间产生的热气给去除， 弹力架 的侧壁拉伸时会扯动排孔处， 可加速内部的气体 挤压， 减少气体堆积影响检测结果。 权利要求书2页 说明书4页 附图2页 CN 115094123 A 2022.09.23 CN 115094123 A 1.一种微 流控PCR定量检测方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1、 将待检测的样品取适当的份量， 进行待检测处 理； S2、 配置PCR水相， 其中包括1％ ‑3％上游引物、 1％ ‑3％下游引物、 0.3％ ‑0.5％PCR模 板、 15％‑25％PCRmix依次均匀混合， 将由导热材质制备成的基体制成腔体状态， 形成一头 尖端， 另一头圆头光滑状； S3、 将形成腔体状态基体侧面， 设置有亲水坑， 在亲水坑处连接有出样孔， 将PCR芯片的 基体材料和亲水坑处连接在一 起， 在腔体内滴入S2中配置的PCR水相混合物； S4、 往PCR水相混合物中滴入70％ ‑85％的甘油， 15％ ‑25％的甘油酯混合， 获得混合后 的溶液； S5、 将S4中混合后的溶液一同注入到S3中的腔体中， 由于此时腔体侧壁处的亲水坑和 PCR芯片连接在一起， 在P CR芯片的侧壁启动时， 其热量和腔 体之间混合转换， 热量传递至腔 体内； S6、 腔体内的热量通过内部的混合溶液转换吸收， 将亲水坑部位进行干燥处理， 对接 PCR定量检测设备采集信号； S7、 PCR反应后， 通过吸水坑处吸取腔体内混合溶液微滴， 有荧光信号为阳性， 无荧光信 号为阴性。 2.一种微流控PCR定量检测辅助设备， 应用于权利要求1中所述的一种微流控PCR定量 检测方法， 包括主板(1)， 其特征在于： 所述主板(1)的底侧壁处贯穿连接有弹夹机构(2)， 所 述弹夹机构(2)的内部包括有连接条(211)、 弹压板(212)和连接轴(213)， 所述弹压板(212) 的侧壁处贯穿连接于连接条(211)的侧壁之间， 所述连接轴(213)的侧壁贯穿连接于弹压板 (212)的侧壁之间， 所述弹夹机构(2)的侧壁前端顶部贯穿连接有插接机构(3)， 所述插接机 构(3)的底端贯穿连接有弹压机构(4)， 所述弹压机构(4)的内部包括复位 弹簧(411)和支撑 杆(412)， 所述复位弹簧(411)的侧壁处贯穿并环绕连接于支撑杆(412)的外侧壁处， 所述支 撑杆(412)的底侧壁处贯穿连接有转筒机构(5)， 所述转筒机构(5)的底部贯穿并活动连接 有拼接机构(6)， 所述拼接机构(6)的内部包括卡片(611)和活动板(612)， 所述卡片(611)的 底侧壁处贯 穿连接于活动板(612)的内侧壁处。 3.根据权利 要求1所述的一种微流控PCR定量检测方法， 其特征在于： 所述连接轴(213) 的侧壁处贯 穿连接于弹压板(212)的侧壁轴心处。 4.根据权利 要求1所述的一种微流控PCR定量检测方法， 其特征在于： 所述插接机构(3) 的内部包括活动柱(311)、 齿柱(312)和套圈(313)， 所述齿柱(312)的侧壁顶端贯穿连接于 活动柱(311)的侧壁顶端， 所述套圈(313)的内圈贯穿连接于活动柱(311)的外侧壁处， 所述 齿柱(312)的外侧端卡接于套圈(313)的内圈侧壁处， 所述支撑杆(412)的外侧壁顶端贯穿 连接于齿柱(312)的内侧壁处。 5.根据权利 要求1所述的一种微流控PCR定量检测方法， 其特征在于： 所述转筒机构(5) 的内部包括有罐体(511)和活动筒(512)， 所述活动筒(512)的内侧壁处贯穿连接于罐体 (511)的外侧壁处， 所述活动筒(512)的底侧壁处贯 穿连接于卡片(61 1)的内侧壁处。 6.根据权利 要求1所述的一种微流控PCR定量检测方法， 其特征在于： 所述主板(1)的侧 壁中间贯 穿连接有活动页(7)， 所述活动页(7)的侧壁顶端贯 穿连接有对接杆(8)。 7.根据权利 要求1所述的一种微流控PCR定量检测方法， 其特征在于： 所述主板(1)的侧权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115094123 A 2壁中间贯 穿连接有弹力架(10)， 所述弹力架(10)的侧壁处设置有排 孔(9)。 8.根据权利 要求1所述的一种微流控PCR定量检测方法， 其特征在于： 所述转筒机构(5) 的底侧外侧壁处滑动连接 于卡片(61 1)的侧壁间隙之间。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115094123 A 3