(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210625323.4 (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 中山大学 地址 510275 广东省广州市海珠区新港西 路135号 (72)发明人 高艳锋　胡争　李琬琼　郑丹露　 陈丹虹　徐冉　周秀曼　陈少梦　 杨欣　李淑贞　 (74)专利代理 机构 深圳市创富知识产权代理有 限公司 4 4367 专利代理师 范伟民 (51)Int.Cl. C07K 7/06(2006.01) A61K 38/08(2019.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种具有CD47/SIRPα阻断效果的母体肽或 衍生肽及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种具有CD47/SIRPα阻断效 果的母体肽或衍生肽及其应用， 属于生物医药领 域。 本发明制备了一种母体肽序列WSMTWWNYW (SEQ ID NO.1)， 并将母体肽序列的3， 6， 8位任 一 氨基酸突变为Q， M， Y， W， R或使用脂肪 酸修饰母体 肽N端得到其衍生肽， 制得的母体肽或衍生肽能 有效阻断CD47与SIRPа蛋白结合， 消除肿瘤的免 疫抑制作用， 促使巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬来 达到了抑制肿瘤的生长， 而且制备方法简单易 行、 成本低廉、 实用性强， 另外， 多肽分子量小、 特 异性强、 完全避免CD47抗体易产生的血液毒性， 具有良好生物 安全性和较高的应用价值， 有助于 肿瘤早期诊断和免疫 治疗。 权利要求书1页 说明书8页 序列表4页 附图3页 CN 115043907 A 2022.09.13 CN 115043907 A 1.一种母体肽或衍生肽， 其特征在于， 所述母体肽的氨基酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 所述衍生肽是由所述母体肽序列中的3， 6， 8位任一氨基酸突变为Q， M， Y， W， R或对母体肽的N 端使用脂肪酸 修饰得到 。 2.根据权利要求1所述的母体肽或衍生肽， 其特征在于， 所述母体肽的氨基酸构型独立 地选自D型或L型。 3.根据权利要求1所述的母体肽或衍生肽， 其特征在于， 由母体肽突变所得的衍生肽包 括SEQ ID NO.2、 SEQ  ID NO.3、 SEQ  ID NO.4、 SEQ  ID NO.5、 SEQ  ID NO.6、 SEQ  ID NO.7、 SEQ  ID NO.8、 SEQ ID NO.9、 SEQ ID NO.10所示的多肽。 4.根据权利要求1所述的母体肽或衍生肽， 其特征在于， 对母体肽进行脂肪酸修饰为使 用PEG4在母体肽的N端连接脂肪酸Fmoc ‑Lys(Pal‑Glu‑OtBu)‑OH， 母体肽经脂肪酸修饰后得 到的衍生肽具有以下 结构式： 5.根据权利要求1所述的母体肽或衍生肽， 其特征在于， 所述母体肽或衍生肽还包括母 体肽或衍 生肽在药学上可接受的盐。 6.权利要求1 ‑5所述的母体肽或衍 生肽在制备抗肿瘤药物中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述抗肿瘤药物的剂型包括注射液、 口服 液、 粉剂、 片 剂、 丸剂、 气雾剂、 软膏剂、 胶囊剂。 8.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述抗肿瘤药物可添加一种或多种药学上 可接受的辅料， 所述辅料包括药学领域常规的稀释剂、 填充剂、 粘合剂、 湿润剂、 吸收促进 剂、 表面活性剂、 润滑剂或稳定剂。 9.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述肿瘤为CD47高表达相关的一系列肿 瘤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115043907 A 2一种具有C D47/SIRPα阻断效果 的母体肽或衍生肽及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药领域， 特别涉及一种具有CD 47/SIRPα 阻断效果的母体肽或衍 生肽及其应用。 背景技术 [0002]先天免疫反应是机体抵抗感染和恶性肿瘤的第一道防线， 而巨噬细胞作为先天免 疫系统的关键组成成分之一， 是通过识别暴露于目标细胞表面的 “吃我”信号和“别吃我”信 号来调节的吞噬作用， 其中， 充当 “别吃我”信号的是跨膜蛋白CD47， CD47通过与受体信号调 节蛋白α(SIRPα )结合向循环中的巨噬细胞传递 “别吃我”的信号， 从而避免被吞噬细胞清 除。 然而， 肿瘤细胞利用表面过度表达CD47来阻断吞噬作用从而逃避免疫监视进行免疫逃 逸。 现在越来越多的研究表明CD47表达与肿瘤患者的临床特征以及预后关系密切， 例如， 在 Ki‑67>40％的高危肺神经内分泌肿瘤患者中， CD47的高表达预示着较差的无进展生存期。 而且CD47的表达也与结直肠腺癌的不良临床病理特征和不良预后呈正相关。 因此， CD47分 子在肿瘤免疫过程中传递的关键负性免疫信号成为了研究热点。 [0003]SIRPα 胞质结构域内含有免疫受体酪氨酸基抑制基序(ITIMs)， 这些基序被磷酸化 后会招募含有Src同源2结构域(SH2)的蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP) ‑1和SHP‑2。 CD47与SIRPα 的 结合触发了对下游磷酸酶的招募， 传递负性调节信号， 从而阻止了巨噬细胞的吞噬。 目前， 有研究表明使用CD47阻断抗体干扰CD47/SIRPα相互作用可显著增强巨噬细胞在体外吞噬 肿瘤细胞的能力， 在治疗实体瘤或血液恶性肿瘤展现出良好的抗肿瘤疗效， 这些研究结果 极大促使了全人源化CD47抗体、 可溶性SIRPα 二聚体融合蛋 白、 去除Fc段的高亲和力SIRPα 单体以及羊驼来源的CD47纳米抗体在内的多种CD47/SIRPα 阻断剂的开发。 但是， 具有 高分 子量的抗体和蛋白类药物的组织渗透性较差， 在实体瘤内发挥的阻断作用有限， 而且正常 的健康血细胞也表达高水平的CD47， 使其成为了治疗性抗体的潜在靶标， 已有一些动物和 临床实验还报道了贫血和血小板的减少与CD47抗体的剂量限制性毒性有关。 如何减少潜在 的副作用， 让CD47/SIRPα 阻断剂在安全性和有效性之间保持良好的平衡， 成为了临床肿 瘤 治疗面临的迫切任务。 [0004]近年来， 随着多肽合成技术的发展和成熟以及多肽药物的稳定性较好， 加快了对 多肽药物的研制以及临床应用， 使得多肽药物在抗肿瘤治疗领域中越来越重要， 已成为新 药研发的重要方向之一。 另外， 全世界已有80多种多肽药物被批准上市， 还有200 ‑300种处 于临床实验中， 有着广阔的开 发前景， 而且阻断肽在抑制蛋白质相互作用方面， 具有 特异性 强、 合成方便的特点， 并由于在价格、 免疫原性和安全性等方面的优势， 常被作为候选化合 物的首选， 广泛应用于肿瘤、 肝炎、 糖尿病、 艾滋病等的预防、 诊断和治疗。 针对在外周循环 广泛表达的CD47靶点， 阻断肽相比抗体缺失IgG1 ‑Fc片段的多肽， 能避免触发抗体依赖的细 胞介导的细胞毒作用(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)， 在保持优良阻断效果的同时能 有效减弱红细胞的靶外清除。 因此， 如果能开发一种可以阻断CD47和受体信号调节蛋白α (SIRPα )结合的多肽， 有望在消除肿 瘤免疫抑制作用的同时避免渗透性差以及CD47抗体易说　明　书 1/8 页 3 CN 115043907 A 3