(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210960923.6 (22)申请日 2022.08.11 (71)申请人 唯智医药 科技 （北京） 有限公司 地址 100176 北京市大兴区经济技 术开发 区凉水河二 街8号院5号楼6层6 02 (72)发明人 季子建　王朋宇　田赛　左伟　 张建楼　 (74)专利代理 机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权 代理有限公司 2321 1 专利代理师 张勇 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/04(2006.01) G01N 30/14(2006.01) G01N 30/34(2006.01)G01N 30/74(2006.01) G01N 30/86(2006.01) B01J 20/29(2006.01) (54)发明名称 6-甲醛基-2,2二甲基-1,3-二氧六环-4- 乙 酸叔丁酯异构体杂质检测 (57)摘要 本发明公开了6 ‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二 氧六环‑4‑乙酸叔丁酯异构体杂质检测， 属于药 物分析领域。 本发明方法包括如下步骤： 1)配制 (4R‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑ 4‑乙酸叔丁酯供试品溶液、 对照溶液、 异构体杂 质定位溶液； 2)使用高效液相色谱仪测定杂质定 位的色谱图， 各杂质峰之间的分离度≥1.5； 3)使 用高效液相色谱仪测定对照溶液的色谱图； 4)使 用高效液相色谱仪测定供试品溶液的色谱图， 依 据对照溶液的色谱图， 确定供试品溶液中异构体 杂质的含量。 本发明的方法能将(4R ‑cis)‑6‑甲 醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑4‑乙酸叔丁酯 和各异构体进行有效分离， 为(4R ‑cis)‑6‑甲醛 基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑4‑乙酸叔丁酯异 构体杂质的控制提供了可靠的依据， 有利于保证 下游产品的质量。 权利要求书2页 说明书8页 附图3页 CN 115389655 A 2022.11.25 CN 115389655 A 1.一种(4R ‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑4‑乙酸叔丁酯异构体杂质的分 离检测方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)样品液配制： 将(4R ‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑4‑乙酸叔丁酯样品 分散在乙腈中， 溶解、 稀释， 得到样品贮备液； 将1 ‑(5‑肼基‑2,4‑二硝基苯基) ‑4‑甲基哌嗪 分散在无 水乙醇中， 然后加入样品贮备 液， 混匀， 膜过 滤， 得到样品液； (2)杂质定位溶液配制： 取(4R ‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑4‑乙酸叔丁 酯异构体杂质， 分别用乙腈稀释成相应 混合溶液， 得到各杂质定位贮备液； 将1 ‑(5‑肼基‑2, 4‑二硝基苯基) ‑4‑甲基哌嗪分散在无水乙醇中， 分别加入相应的杂质定位贮备液； 混匀， 膜 过滤， 得到杂质定位溶 液； (3)高效液相 色谱检测： 以正己烷 ‑无水乙醇作为流动相， 对杂质定位溶液进行高效液 相色谱检测， 实现杂质分离， 获得相应的色谱信息； 然后再对样品液进行高效液相色谱检 测， 对照杂质定位溶 液的色谱信息分离检测样品中的杂质。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 样品贮备液中样品浓度为 50mg/mL。 3.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 样品液中1 ‑(5‑肼基‑2,4‑二硝 基苯基)‑4‑甲基哌嗪相对无 水乙醇的浓度为2mg/mL。 4.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 样品液中供试品贮备液与无水 乙醇的体积比为0.3:10 。 5.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， (4R ‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧 六环‑4‑乙酸叔丁酯异构体杂质包括： 6.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤( 2)中， 各杂质定位贮备液的浓度为 1mg/mL。 7.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(3)中， 流动相中正己烷与无水乙醇的 体积比为80:20 。 8.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(3)中， 高效液相色谱的色谱柱为 CHIRALCEL AY‑3手性4.6mm×250mm， 5 μm。 9.根据权利 要求1‑8任一项所述的方法， 其特征在于， 高效液相色谱中的流速为1.0mL/ min； 色谱柱温为3 5℃。 10.一种(4R ‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑4‑乙酸叔丁酯异构体杂质的 含量测定方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： S1配制供试品溶液： 将(4R ‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑4‑乙酸叔丁酯 样品分散在乙腈中， 溶解、 稀释制成供试品贮备液； 将1 ‑(5‑肼基‑2,4‑二硝基苯基) ‑4‑甲基 哌嗪分散在无 水乙醇中， 加入供 试品贮备 液， 混匀， 膜过 滤， 得到供 试品溶液； S2配制对照溶液： 取用S1中供试品贮备液， 稀释， 作为自身对照贮备液； 将1 ‑(5‑肼基‑ 2,4‑二硝基苯基) ‑4‑甲基哌嗪分散在无水乙醇中， 加入自身对照 贮备液， 混匀， 膜过滤， 得 到对照溶 液；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115389655 A 2S3配制杂质定位溶液： 取(4R ‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基 ‑1,3‑二氧六环 ‑4‑乙酸叔丁 酯异构体杂质， 分别用乙腈稀释成相应 混合溶液， 得到各杂质定位贮备液； 将1 ‑(5‑肼基‑2, 4‑二硝基苯基) ‑4‑甲基哌嗪分散在无水乙醇中， 分别加入相应的杂质定位贮备液； 混匀， 膜 过滤， 得到杂质定位溶 液； S4高效液相色谱测定： 分别将S1所得供试品溶液、 S2所得对照溶液、 S3所得杂质定位溶 液进行高效液相色谱检测， 其中流动相为正己烷 ‑无水乙醇； 通过杂质定位溶液对各杂质进 行分离定位； 再分别采集供试品溶液中各杂质的峰面积， 对照溶液中主成分峰面积， 通过自 身对照法， 测定各杂质的含量。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115389655 A 3