(19)国家知识产权局
(12)发明 专利申请
(10)申请公布号
(43)申请公布日
(21)申请 号 202210919212.4
(22)申请日 2022.08.02
(71)申请人 成都普康生物科技有限公司
地址 610000 四川省成 都市新津 县工业园
区A区青年 (大 学生) 创业园
(72)发明人 舒娟 徐春梅 吴涛
(74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务
所(特殊普通 合伙) 11463
专利代理师 宋南
(51)Int.Cl.
G01N 30/02(2006.01)
G01N 30/34(2006.01)
(54)发明名称
Boc-His(Trt)-Aib-OH及其异构体的分离检
测方法
(57)摘要
本发明公开了Boc ‑His(Trt) ‑Aib‑OH及其异
构体的分离检测方法, 涉及医药中间体检测技术
领域。 本采用反相色谱条件进行分离, 通过对色
谱条件进行优化, 特别是优化流动相的组成, 能
够显著提升Boc ‑His(Trt)‑Aib‑OH和及其异构体
[Boc‑D‑His(Trt) ‑Aib‑OH]的分离效果, 主成分
峰与异构体峰间分离度大于1.5, 且峰型较好, 故
能对异构体进行准确定量。
权利要求书1页 说明书6页 附图3页
CN 115494169 A
2022.12.20
CN 115494169 A
1.一种Boc ‑His(Trt)‑Aib‑OH及其异构体的分离检测方法, 其特 征在于, 包括:
利用流动相将待测试样溶解得到待测溶 液;
利用反相高效液相色谱法对所述待测溶液进行检测, 所述流动相采用乙腈、 甲醇、 冰醋
酸和三乙胺形成的混合物, 乙腈、 甲醇、 冰醋酸和三乙胺的体积比为260 ‑300:100‑140:0.5‑
2:0.05‑0.2;
按照面积归一 化法计算Boc ‑His(Trt)‑Aib‑OH及其异构体的含量。
2.根据权利要求1所述的分离检测方法, 其特征在于, 在所述流动相中, 乙腈、 甲醇、 冰
醋酸和三乙胺的体积比为270 ‑290:110‑130:1.0‑1.5:0.1‑0.2。
3.根据权利要求1或2所述的分离检测方法, 其特征在于, 所述待测溶液中待测样品的
浓度为1‑3mg/mL。
4.根据权利 要求1所述的分离检测方法, 其特征在于, 采用色谱柱的内径为4 ‑5mm, 长度
为150mm, 填料粒径为3‑6 μm。
5.根据权利要求4所述的分离检测方法, 其特征在于, 采用色谱柱的型号为CHIRALPAK
QD‑AX, 色谱柱的内径为 4.6mm, 长度为15 0mm, 填料粒径为5 μm。
6.根据权利要求4所述的分离检测方法, 其特征在于, 所述色谱柱的填料选自含奎纳啶
衍生物键合硅胶中的任意 一种。
7.根据权利要求4 ‑6中任一项所述的分离检测方法, 其特征在于, 色谱条件: 柱温为23
℃‑27℃, 流速为0.4 ‑0.6mL/mi n, 检测波长为252 ‑256nm。
8.根据权利 要求7所述的分离检测方法, 其特征在于, 进样体积为5 ‑15 μL; 优选为9 ‑11μ
L。
9.根据权利要求7 所述的分离检测方法, 其特 征在于, 测试时等度运行20 ‑40min。
10.根据权利要求1所述的分离检测方法, 其特 征在于, 按照如下公式计算异构体含量:
异构体含量
式中, Ai表示异构体峰面积;
A表示主成分峰面积。权 利 要 求 书 1/1 页
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CN 115494169 A
2Boc‑His(Trt) ‑Aib‑OH及其异构体的分离检测方 法
技术领域
[0001]本发明涉及医药中间体检测技术领域, 具体而言, 涉及Boc ‑His(Trt) ‑Aib‑OH及其
异构体的分离检测方法。
背景技术
[0002]Boc‑His(Trt) ‑Aib‑OH是目前较常用的氨基酸衍生物, 其存在异构体Boc ‑D‑His
(Trt)‑Aib‑OH。 由于对映异构体间的性质十 分相似, 普通的反相色谱条件 下, 异构体间难以
分离, 故大多数物质间异构体的分离检测主 要采取正相色谱 模式。
[0003]但本品种(Boc ‑His(Trt) ‑Aib‑OH)在现有的正相色谱条件下, 构型易翻转导致测
得的异构 体值不准确, 且色谱峰拖尾严重, 异构体间难以达到基线分离, 从而难以对本品种
中的异构体进行准确定量检测。 目前文献中暂未见有效解决该品种异构体分离的相关报
道。
[0004]鉴于此, 特提出本发明。
发明内容
[0005]本发明的目的在于提供Boc ‑His(Trt) ‑Aib‑OH及其异构体的分离检测方法, 旨在
解决Boc‑His(Trt)‑Aib‑OH及其异构体峰型较差、 难分离 定量的难题。
[0006]本发明是这样实现的:
[0007]第一方面, 本发明提供一种Boc ‑His(Trt) ‑Aib‑OH及其异构体的分离检测方法, 包
括:
[0008]利用流动相将待测试样溶解得到待测溶 液;
[0009]利用反相高效液相色谱法对待测溶液进行检测, 流动相采用乙腈、 甲醇、 冰醋酸和
三乙胺形成的混合物, 乙腈、 甲醇、 冰醋酸和三乙胺的体积比为260 ‑300:100‑140:0.5‑2:
0.05‑0.2;
[0010]按照面积归一 化法计算Boc ‑His(Trt)‑Aib‑OH及其异构体的含量。
[0011]在可选的实施方式中, 在流动相中, 乙腈、 甲醇、 冰醋酸和三乙胺的体积比为270 ‑
290:110‑130:1.0‑1.5:0.1‑0.2。
[0012]在可选的实施方式 中, 待测溶 液中待测样品的浓度为1 ‑3mg/mL。
[0013]在可选的实施 方式中, 采用色谱柱的内径为4 ‑5mm, 长度为150mm, 填料粒径为3 ‑6 μ
m。
[0014]在可选的实施方式中, 采用色谱柱的型号为CHIRALPAK QD‑AX, 色谱柱的内径为
4.6mm, 长度为15 0mm, 填料粒径为5 μm。
[0015]在可选的实施方式中, 色谱柱的填料选自含奎纳啶衍生物键合硅胶中的任意一
种。
[0016]在可选的实施方式中, 色谱条件: 柱温为23℃ ‑27℃, 流速为0.4 ‑0.6mL/min, 检测
波长为252 ‑256nm。说 明 书 1/6 页
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CN 115494169 A
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专利 Boc-His(Trt)-Aib-OH及其异构体的分离检测方法
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