(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211012108.3 (22)申请日 2022.08.23 (71)申请人 中科检测技 术服务 （广州） 股份有限 公司 地址 510000 广东省广州市天河区兴科路 368号实验楼 A房 (72)发明人 赖华杰　王浩东　刘博　李念　 赵嘉辉　肖甯兰　张淼　李强　 (74)专利代理 机构 佛山市君创知识产权代理事 务所(普通 合伙) 44675 专利代理师 张燕玲 (51)Int.Cl. B01J 20/281(2006.01) B01J 20/28(2006.01) B01J 20/30(2006.01)G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 一种两亲型磁性固相萃取材料及其制备方 法和在检测类固醇激素中的应用 (57)摘要 本发明属于环境功能材料及环境检测技术 领域， 公开了一种两亲型磁固相萃取材料及其制 备方法和在检测类固醇激素中的应用。 该两亲型 磁固相萃取材料的制备方法包括如下步骤： 将氯 化铁与氯化亚铁通过氨气进行还原制备得到四 氧化三铁磁珠， 并使用油酸进行混合包裹提高其 油溶性； 然后以N ‑乙烯基吡咯烷酮和二乙烯基苯 为主要原料、 甲苯为溶剂， 在磁珠表面聚合得到 具有两亲性的HLB层， 得到所述的两亲型磁固相 萃取材料。 本发 明中的两亲型磁固相萃取材料可 用于水体环 境中的类固醇激素如含羧基、 羟基的 甾体激素等， 萃取操作步骤简单， 萃取相与样品 易于分离， 同时还有效避免了有机溶剂的消耗， 应用前景好。 权利要求书2页 说明书6页 附图4页 CN 115487791 A 2022.12.20 CN 115487791 A 1.一种两亲 型磁性固相萃取 材料的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)将六水合氯化铁和四水合氯化亚铁搅拌溶解于超纯水中， 滴加溶有油酸的丙酮溶 液； 滴加完毕后搅拌混匀10～30min后， 在混合液中逐滴加入氨水， 加热至50～100℃进 行反 应； 反应结束后冷却至室温， 收集磁性纳米粒子， 分别用乙醇和超纯水洗涤， 然后真空干燥， 得到油酸包裹的磁性纳米粒子； (2)将十二烷基硫酸钠、 聚乙烯吡咯烷酮和羟乙基纤维素溶于超纯水中得到水相； 将步 骤(1)所得油酸包裹的磁性纳米粒子和偶氮二异丁腈溶于甲苯中得到油相； 将油相均分为 两份， 一份用于溶解 二乙烯基苯 得到X溶液， 另一份用于乙烯基吡咯烷酮得到 Y溶液； 将水相搅拌加热至20～40℃， 滴加Y溶液， 滴加完毕之后继续升温至60～80℃， 滴加X溶 液， 最终于80℃下恒温反应24～48h， 分别用乙醇和乙腈洗涤， 然后将产物在30～50℃下真 空干燥6h， 得到两亲型磁性固相萃取 材料。 2.根据权利要求1所述的两亲 型磁性固相萃取 材料的制备 方法， 其特 征在于： 步骤(1)中所述的六 水合氯化铁和四水合氯化 亚铁的摩尔比为1:1； 步骤(2)中所述的十二烷基硫酸钠、 聚乙烯吡咯烷酮和羟乙基纤维素的质量比为3:5: 3； 步骤(2)中所述的二乙烯基苯与乙烯基吡咯烷酮的摩尔比为1:1～1:2。 3.根据权利要求1所述的两亲 型磁性固相萃取 材料的制备 方法， 其特 征在于： 步骤(1)中所述的氨水的质量浓度为25％； 步骤(2)中所述的聚乙烯吡咯烷酮的平均分子量10 000， K13～18； 步骤(2)中所述的羟乙基纤维素的粘度25 0～400mpa.s； 步骤(1)中所述的搅拌转速为3 00～450rpm； 步骤(1)中所述的反应是加热至80℃进行反应； 步骤(2)中所述的搅拌转速为3 00～450rpm。 4.根据权利要求1所述的两亲型磁性固相萃取材料的制备方法， 其特征在于： 步骤(2) 中所述的二乙烯基苯与乙烯基吡咯烷酮的摩尔比为2:3； 步骤(1)中所述的搅拌转速为3 50rpm； 步骤(2)中所述的搅拌转速为 400rpm。 5.一种由权利要求1～4任一项所述的制备 方法制备 得到的两亲 型磁性固相萃取 材料。 6.根据权利要求5所述的两亲型磁性固相萃取材料在富集、 浓缩和/或检测类 固醇激素 中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于： 所述类固醇激素为化学结构中含有羟基、 羧基的甾体激素， 包括氟米龙、 氢化可的松和波尼松龙中的至少一种。 8.一种利用权利要求5所述的两亲型磁性固相萃取材料富集、 浓缩和检测类固醇激素 的方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (A)样品制备： 将待 萃取的样品调节pH值至 6.5～7.5； (B)萃取： 按照每10mL待萃取的样品使用100mg的量称取两亲型磁性固相萃取材料， 放 入待萃取 的样品中， 震荡混匀以富集浓缩目标物， 再利用磁 吸附将两亲型磁性固相萃取材 料取出， 晾干； (C)洗脱： 用甲醇对两亲 型磁性固相萃取 材料进行洗脱、 过 滤， 得到洗脱液；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115487791 A 2(D)利用液相色谱串联质谱对洗脱液进行检测； 根据相应的类固醇激素标准品的浓度 和液相色谱串联质谱的检测结果绘制的标准工作曲线， 再根据待测样品的液相色谱串联质 谱的检测结果， 换算得到待测样品中类固醇激素的浓度或含量。 9.根据权利要求8所述的方法， 其特 征在于： 步骤(A)中所述的pH值是调节至7； 步骤(A)中所述的待 萃取的样品为 地表水、 废水； 步骤(B)中所述的震荡混匀的转速为10 00～2500rpm； 步骤(B)中所述的震荡时间为3～ 20min； 步骤(C)中所述的甲醇用量与两亲型磁性 固相萃取材料的比值为1mL/100mg， 洗脱次数 为两次； 步骤(D)中所述的液相色谱串联质谱的条件如下： 色谱条件： 色谱柱为2.1 ×100mm， 1.9 μm的C18柱， 流动相A相为0.1％甲酸水溶液， B相为 乙腈， 流速为0.3mL/mi n， 柱温为 40℃， 进样量 为10 μL； 质谱条件： 离子源为电喷雾离子源(ESI)； 检测方式和扫 描方式分别设置为多反应检测 (MRM)和正离子/负离子模式； 其中雾化气流量、 加热气流量和干燥气流量分别为3L/min、 10L/min和10L/min； 接口温度、 脱溶剂温度、 DL温度、 加热块温度依次为300℃、 52 6℃、 250℃ 和400℃。 10.根据权利要求8所述的方法， 其特征在于： 所述的震荡混匀的转速为1500rpm； 所述 的震荡时间为10mi n。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115487791 A 3