(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211058781.0 (22)申请日 2022.08.31 (71)申请人 汉瑞药业 （荆门） 有限公司 地址 448000 湖北省荆门市掇刀区兴化 三 路1号 (72)发明人 柴金柱　胡进　梅青　关丹荧子 　 (74)专利代理 机构 武汉凌达知识产权事务所 (特殊普通 合伙) 42221 专利代理师 刘念涛 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/56(2006.01) G01N 30/60(2006.01) B01D 15/38(2006.01) (54)发明名称 一种乳酸乙酯及其对映异构体手性纯度的 HPLC检测方法 (57)摘要 本发明公开了一种乳酸乙酯及其对映异构 体手性纯度的HPLC检测方法， 取乳酸乙酯， 用乙 醇溶解， 配制成样品溶液， 取5μL样品溶液注入 液相色谱仪， 完成乳酸乙酯及其对映异构体的分 离， 检测手性纯度ee%值； 本方法采用涂敷型多糖 衍生物手性柱， 正己烷/乙醇正相色谱体系， 等度 洗脱进行分离， 可以快速的分离乳酸乙酯与其对 映异构体， 保证了乳酸乙酯化学纯度ee%值的准 确可靠性。 权利要求书1页 说明书3页 附图2页 CN 115436511 A 2022.12.06 CN 115436511 A 1.一种乳酸乙酯及其对映异构体 手性纯度的HPLC检测方法， 其特 征在于， 检测条件为： 色谱柱： DAICEL  CHIRALCEL  AD‑H， 4.6*250mm， 5 μm涂敷型多糖衍生物手性柱， 柱温为20 ℃； 流动相： 乙醇： 正己烷= 5： 95(v/v)， 流速为1.0  mL/min； 洗脱程序： 5%乙醇等度洗脱15mi n； 检测波长： 210nm； 包括以下步骤： （1） 取乳酸乙酯， 用乙醇溶解， 配制成每1mL乙醇含乳酸乙酯3 0mg的样品溶 液； （2） 取5μL样品溶液注入液相色谱仪， 完成乳酸乙酯及其对映异构体的分离， 检测手性 纯度ee%值。 2.根据权利要求1所述的一种乳酸乙酯及其对 映异构体手性纯度的HPLC检测方法， 其 特征在于， 所述的色谱柱是固定相表面涂敷了直链淀粉 ‑三 （3,5‑二甲基苯基氨基甲酸酯） 的球形硅胶色谱柱。 3.根据权利要求1或2所述的一种乳酸乙酯及其对映异构体手性纯度的HPLC检测方法， 其特征在于， 所述的液相色谱仪为Thermo  Ultimate 3000， DAD检测器。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115436511 A 2一种乳酸乙酯及其 对映异构体手性纯度的HPL C检测方法 技术领域 [0001]本发明属于高效液相色谱 （High  Performance  Liquid Chromatograph y， HPLC） 方 法， 尤其是一种用HPLC检测乳酸乙酯与其对映异构体分离的方法。 背景技术 [0002]乳酸乙酯是我国规定允许使用的食用香料， 常用于调制果香型、 乳酸型食用和酒 用香精。 [0003]乳酸乙酯的化学结构式为 ， 分子式为C5H10O3,分子量为118.13， 其有1 个手性碳原子， 其异构 体含量是产品的重要质量指标， 截止目前为止， 市场上没有分离该异 构体的方法。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种分离乳酸乙酯与其对映异构体的HPLC检测方法， 用于 测定乳酸乙酯的手性纯度e e%值。 [0005]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是： 一种乳酸乙酯及 其对映异构体手性 纯度的HPLC检测方法， 检测条件为： 色谱柱： DAICEL  CHIRALCEL  AD‑H， 4.6*250mm， 5 μm涂敷 型多糖衍生物手性柱， 柱温为20℃； 流动相： 乙醇： 正己烷=5： 95(v/v)， 分离度最佳， 流速为 1.0 mL/min； 洗脱程序： 5%乙醇等度洗脱15mi n； 检测波长： 210nm； 包括以下步骤： （1） 取乳酸乙酯适量， 用乙醇溶解样品， 配制成每1mL乙醇含乳酸乙酯约30mg的样 品溶液； （2） 取步骤 （1） 的5μL样品溶液注入液相色谱仪， 完成乳酸乙酯及其对映异构体的 分离， 进行检测记录色谱图， 从而检测手性纯度e e%值。 [0006]进一步， 所述的色谱柱是固定相表面涂敷了直链淀粉 ‑三 （3,5‑二甲基苯基氨基甲 酸酯） 的球形硅胶色谱柱。 [0007]进一步， 所述的液相色谱仪为Thermo  Ultimate 3000， DAD检测器。 [0008]本发明的有益效果是： 本发明采用DAICEL  CHIRALCEL  AD‑H， 4.6*250mm， 5 μm手性柱， 不仅提高了色谱峰 的对称性， 而且能有效分离 乳酸乙酯及其对映异构体； 柱温选择20℃， 缩短了分析时间。 [0009]本发明选择乙醇溶解样品， 能有效避免样品溶液在高比例的非极性流动相正己烷 中析出的可能性。 [0010]本发明进样体积5 μL， 该体积可根据样品浓度大小适当调整， 流速选择1.0mL/min， 有效的节省了分析时间及试剂的消耗。 [0011]本发明方法能简单、 快速、 准确的测定乳酸乙酯的手性纯度ee%值， 解决了乳酸乙 酯及其对映异构体的分离问题， 从而保证了 乳酸乙酯化学 纯度ee%值的准确可靠性。说　明　书 1/3 页 3 CN 115436511 A 3