(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210897216.7 (22)申请日 2022.07.28 (71)申请人 海南通用三洋药业有限公司 地址 570312 海南省海口市秀英区海力路8 号 (72)发明人 陈海刚　张红卫　刘超　宋光文　 李宏仁　邝素梅　 (74)专利代理 机构 北京汇智英财专利代理有限 公司 11301 专利代理师 赵翠璞 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种他唑巴坦钠中水合 肼杂质的检测方法 (57)摘要 本发明公开了一种他唑巴坦钠中水合肼杂 质的检测方法， 采用衍生法制备供试品溶液和对 照品溶液， 再采用高效液相色谱法对其衍生产物 进行检测。 本发明先通过制备肼的衍生物， 再采 用高效液相色谱法测定该衍生物， 从而实现他唑 巴坦钠中水合肼的检查， 该方法测定水合肼的成 本较低且准确度较高。 权利要求书1页 说明书7页 附图6页 CN 115266980 A 2022.11.01 CN 115266980 A 1.一种他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方法， 其特征在于， 采用衍生法制备供试品溶 液和对照品溶 液， 再采用高效液相色谱法对其 衍生产物进行检测。 2.根据权利要求1所述的他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方法， 其特征在于， 所述高效 液相色谱法的检测条件如下： 以十八烷基硅烷键合硅胶为 填充剂； 流动相A： 0.0 5%三氟乙酸溶 液； 流动相B： 乙腈； 检测波长40 6nm； 流速1.0ml/mi n； 进样体积20 μl； 柱温30℃； 洗脱方式： 线性梯度洗脱。 3.根据权利要求2所述的他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方法， 其特征在于， 所述洗脱 梯度的程序为： 0min， 流动相A的体积分数为5 0%， 流动相B的体积分数为5 0%； 5min， 流动相A的体积分数为10%， 流动相B的体积分数为90%； 20min， 流动相A的体积分数为10%， 流动相B的体积分数为90%； 21min， 流动相A的体积分数为5 0%， 流动相B的体积分数为5 0%。 4.根据权利要求2所述的他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方法， 其特征在于， 所述十八 烷基硅烷键合硅胶色谱柱的型号 为： COSMOSI L 5C18‑MS‑II， 规格为 4.6mm×250mm。 5.根据权利要求2所述的他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方法， 其特征在于， 包括以下 检测步骤： S1:称取2 ‑羟基‑1‑萘甲醛100mg， 置10ml量瓶中， 加甲醇溶解并稀释至刻度， 摇匀， 接着 再精密量取5.0ml， 置 50ml量瓶中， 加甲醇稀释至刻度， 摇匀， 得到2 ‑羟基‑1‑萘甲醛储备 液； S2:精密量取2 ‑羟基‑1‑萘甲醛储备液2.5ml， 置50ml量瓶中， 加甲醇稀释至刻度， 摇匀， 得到2‑羟基‑1‑萘甲醛溶液； S3： 称取水合肼适量， 加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含0.1mg的水合 肼溶液； S4： 精密量取水合肼溶液0.2ml和2 ‑羟基‑1‑萘甲醛储备液1.0ml， 置20ml量瓶中， 加甲 醇稀释至刻度， 摇匀， 接着再精密量取2.0ml， 置西林瓶中密封， 水浴加热， 放冷， 即得对照品 溶液； S5： 称取唑巴坦钠100mg， 置顶空瓶中， 精密加入2ml的2 ‑羟基‑1‑萘甲醛溶液， 密封后， 超声使溶解， 水浴加热后放冷， 滤 过， 即得供试品溶液； S6： 精密量取对照品溶 液和供试品溶液， 分别注入液相色谱仪中， 测定， 即得。 6.根据权利要求5所述的他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方法， 其特征在于， 所述步骤 S4和步骤S5中， 水浴加热的温度为10 0℃， 时间为6 0min。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115266980 A 2一种他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方 法 技术领域 [0001]本发明属于化学物质检测分析技术领域， 涉及一种他唑巴坦钠中水合肼杂质的检 测方法。 背景技术 [0002]水合肼是由肼与溶剂中的水分结合而生成， 水合肼在药物合成中广泛使用， 但其 在人体内经代谢能形成高活性甲基中间体， 与DNA分子结合， 导致基因突变， 因此， 是一种已 知的基因毒性杂质， 需对药品中残留的水合 肼进行严格控制。 [0003]目前对水合肼的检测主要采用高效液相色谱 ‑串联质谱法(HPLC ‑MS)、 气相色谱 法‑串联质谱法(GC ‑MS)以及气相色谱法(GC)， 但是上述方法中采用高效液相色谱 ‑串联质 谱法(HPCL ‑MS)、 气相色谱法 ‑串联质谱法(GC ‑MS)测定水合肼时成本过高， 而采用气相色谱 法(GC)测定水合 肼时准确度过低。 发明内容 [0004]本发明的目的是提供一种他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方法， 先通过制备肼的 衍生物， 再采用高效液相色谱法测定该衍生物， 从而实现他唑巴坦钠中水合肼的检查， 该方 法测定水合 肼的成本较低且准确度较高。 [0005]为了完成上述目的， 本发明采用以下技 术方案： [0006]一种他唑巴坦钠中水合肼杂质的检测方法， 采用衍生法制备供试品溶液和对照品 溶液， 再采用高效液相色谱法对其 衍生产物进行检测。 [0007]优选地， 所述高效液相色谱法的检测条件如下： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充 剂； 流动相A： 0.05％三氟乙酸溶液； 流动相B： 乙腈； 检测波长406nm； 流速1.0ml/min； 进样体 积20 μl； 柱温3 0℃； 洗脱方式： 线性梯度洗脱。 [0008]优选地， 所述洗脱梯度的程序为： [0009]0min， 流动相A的体积分数为5 0％， 流动相B的体积分数为5 0％； [0010]5min， 流动相A的体积分数为10％， 流动相B的体积分数为90％； [0011]20min， 流动相A的体积分数为10％， 流动相B的体积分数为90％； [0012]21min， 流动相A的体积分数为5 0％， 流动相B的体积分数为5 0％。 [0013]优选地， 所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的型号为： COSMOSIL5C18 ‑MS‑II， 规格 为4.6mm×250mm。 [0014]优选地， 包括以下检测步骤： [0015]S1:称取2 ‑羟基‑1‑萘甲醛100mg， 置10ml量瓶中， 加甲醇溶解并稀释至刻度， 摇匀， 接着再精密量取5.0ml， 置50ml量瓶中， 加甲醇稀释至刻度， 摇匀， 得到2 ‑羟基‑1‑萘甲醛储 备液； [0016]S2:精密量取2 ‑羟基‑1‑萘甲醛储备液2.5ml， 置50ml量瓶中， 加甲醇稀释至刻度， 摇匀， 得到2 ‑羟基‑1‑萘甲醛溶液；说　明　书 1/7 页 3 CN 115266980 A 3