(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211068032.6 (22)申请日 2022.08.31 (71)申请人 江阴天江药业有限公司 地址 214429 江苏省无锡市江阴高新区新 胜路1号 (72)发明人 袁健　王协和　祝倩倩　陈盛君　 李松　张敏　郭星宇　李媚　李媛　 王慧敏　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 叶江栩 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/86(2006.01)G01N 30/90(2006.01) (54)发明名称 一种全面控制叶下珠质量的检测方法 (57)摘要 本发明公开了一种全面控制叶下珠质量的 检测方法， 通过超高效液相色谱法建立特征图 谱， 以鞣花酸、 没食子酸、 柯里拉京为对照峰， 结 合了指标含量检测和薄层检测， 通过优化的检测 方法， 对叶下珠配方颗粒、 药材、 饮片及其炮制 品、 制剂中间体或制剂成品进行较为全面地质量 监测。 操作简单， 重现性好， 准确可靠， 节约时间， 为叶下珠的内在质量控制提供了一种新的分析 手段。 权利要求书2页 说明书22页 附图11页 CN 115420827 A 2022.12.02 CN 115420827 A 1.一种全面控制叶下 珠质量的检测方法， 其特 征在于， 包 含以下步骤： (1)制备供试品溶液； (2)取叶下珠对照药材制备得到对照药材溶液； 分别取鞣花酸对照品、 没食子酸对照 品、 柯里拉京对照品制备 得到对照品溶 液； (3)用超高效液相色谱仪分别检测供试品溶液、 对照品溶液和对照药材溶液， 得到相应 的图谱； (4)分析比较对照品溶液、 对照药材溶液和供试品溶液的特征图谱， 选择供试品溶液的 特征图谱中与对照药材溶液 的特征色谱中保留时间相对应的8个特征峰作为共有特征峰， 构建叶下珠的超高效液相特征图谱； 其中特征峰1应与没食子酸对照品溶液 的特征峰保留 时间相对应， 特征峰4应与柯里拉京对照品溶液 的特征峰保留时间相对应， 特征峰7应与鞣 花酸对照品溶 液的特征峰保留时间相对应。 2.根据权利要求1所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于： 所述步骤(3) 进样检测时色谱条件为： 十八烷基键合硅胶色谱柱， 流动相A： 乙腈、 流动相B： 0.05～0.2％ 磷酸溶液， 按以下的洗脱梯度进行洗脱： 采用紫外检测器， 检测波长： 254 nm； 流速： 0.25～0.3 5ml/min； 柱温： 3 5℃～45℃； 供试品溶液、 对照药 材溶液和对照品溶 液的进样量 为0.5～2 μl。 3.根据权利要求1所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于： 步骤(4)中所 述叶下珠的超高效液相特征图谱， 以鞣花酸对照品溶液的特征峰为S峰， 计算其他特征峰的 相对保留时间， 其相对保留时间应在规定值的 ±10％范围之内， 规定值为： 峰2： 0.58、 峰3： 0.64、 峰5： 0.78、 峰6： 0.86、 峰8： 1.2 9。 4.根据权利要求1所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于： 所述供试品溶 液和对照药材溶液的制备， 所用提取溶剂为水、 甲醇或体积浓度为 10～75％的甲醇水溶液， 提取溶剂体积为15～5 0ml， 提取 方式为加热回流， 提取时间为3 0～90分钟。 5.根据权利要求1所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于： 所述对照品溶 液的浓度为3 0～60 μg/ml， 所用提取 溶剂为体积浓度5 0％的甲醇水溶液。 6.根据权利要求1所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于， 步骤(3)还包 括： 以鞣花酸的含量作为含量指标成分， 同时对供 试品溶液中鞣花酸的含量进行检测。 7.根据权利要求1所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于： 所述供试品为 叶下珠配方颗粒、 药 材、 饮片及其炮制品、 制剂中间体或制剂成品。 8.根据权利要求1所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于， 步骤(4)后还 包括： 对供 试品进行薄层检测。 9.根据权利要求8所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于： 薄层检测步骤权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115420827 A 2包括： 取叶下珠配方颗粒加有机溶剂， 超声处理， 滤过， 蒸干， 加有机溶剂溶解制备得到供试 品溶液； 取叶下珠对照药材加水， 加热回流处理， 滤过， 蒸干， 加有机溶剂， 超声处理， 滤过， 蒸 干， 加有机溶剂溶解制备 得到对照药 材参照物溶 液； 取没食子酸对照品加有机溶剂制备 得到没食子酸对照品溶 液； 吸取供试品溶液、 对照药材参照物溶液、 没食子酸对照品溶液， 分别点于同一硅胶G薄 层板上， 展开， 取 出， 晾干， 喷显色剂显色。 10.根据权利要求9所述的全面控制叶下珠质量的检测方法， 其特征在于： 所述有机溶 剂为甲醇， 所述对照品溶液的浓度为1mg/ml， 所述展开的展开剂为三氯甲烷 ‑乙酸乙酯 ‑甲 酸＝5∶ 5∶ 1， 所述显色剂为2％三氯化铁乙醇溶 液。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115420827 A 3