(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211016056.7 (22)申请日 2022.08.24 (71)申请人 华润双鹤药业股份有限公司 地址 100102 北京市朝阳区望京利泽 东二 路1号 (72)发明人 贾小兰　许俊博　刘雯雪　史晓阳　 汪夤寅　刘强　赵新　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 申素霞 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种利奈唑胺葡萄糖注射液中基因毒性杂 质的检测方法 (57)摘要 本发明属于分析检测技术领域， 提供了利奈 唑胺葡萄糖注 射液中基因毒性杂质的检测方法。 本发明采用三重四极杆液质联用方法定量检测 利奈唑胺葡萄糖注射液中三种基因毒性杂质 (S)‑N‑(2‑乙酰氧基 ‑3‑氯丙基)乙酰胺、 4 ‑(2‑ 氟‑4‑硝基苯基)吗啉和3 ‑氟‑4‑(4‑吗啉基)苯胺 的含量， 质谱检测采用多反应监测(MRM)模式， 通 过化合物离子对两级离子的选择， 排除大量干扰 离子， 使质谱的化学背景降低， 目标检测物的信 噪比显著提高， 从而实现检测的高特异性和高灵 敏度。 权利要求书3页 说明书9页 附图2页 CN 115389661 A 2022.11.25 CN 115389661 A 1.一种利奈唑胺葡萄糖注射液中基因毒性杂质的检测方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： 将待测利奈唑胺葡萄糖注射液进行三重四极杆液质联用检测， 得到待测利奈唑胺葡萄 糖注射液中基因毒性杂质的色谱图； 将所述待测利奈唑胺葡萄糖注射液中基因毒性杂质的色谱图与预定的基因毒性杂质 的标准谱图进行对比， 采用外标法计算得到待测样品中基因毒性杂质的含量； 所述基因毒性杂质 包括： (S) ‑N‑(2‑乙酰氧基 ‑3‑氯丙基)乙酰胺、 4 ‑(2‑氟‑4‑硝基苯 基)吗啉和3 ‑氟‑4‑(4‑吗啉基)苯胺； 所述三重四极杆 液质联用检测包括液相检测 和质谱检测； 所述质谱检测的参数包括： 离子源类型为ESI+； 检测模式为 正离子； 监测模式为多反应监测模式； 气帘气压力为3 0～35psi； 碰撞气压力为9 ～11psi； 喷雾电压为5 500V； 温度为650℃； 喷雾气压力为5 5～70psi； 干燥气压力为5 0～70psi； 阀事件如表1所示： 表1阀事件 化合物离子对信息如表 2所示： 表2化合物离子对信息 权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 115389661 A 22.根据权利要求1所述的检测方法， 其特 征在于， 所述液相检测的参数包括： 色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶； 流动相体系包括 流动相A和流动相B； 所述流动相A为甲酸体积分数为0.09 ～0.11％的水溶液； 所述流动相B为甲酸体积分数为0.09 ～0.11％的甲醇溶液； 洗脱方式为梯度洗脱； 所述梯度洗脱的程序如表3所示： 表3梯度洗脱的程序 流速为0.8mL/mi n； 进样量为1 μL； 柱温为40℃； 样品室的温度为15℃。 3.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述预定的基因毒性杂质的标准谱图 为基因毒性杂质对照品浓度 ‑色谱信息线性曲线。 4.根据权利要求1或3所述的检测方法， 其特征在于， 所述预定的基因毒性杂质的标准 谱图的获取 方法包括以下步骤： 将基因毒性杂质对照品溶解， 得到基因毒性杂质对照品贮备 液； 将所述基因毒性杂质对照品贮备液稀释制成5ng/mL、 20ng/mL、 50ng/mL、 100ng/mL、 150ng/mL、 20 0ng/mL、 25 0ng/mL、 3 00ng/mL和40 0ng/mL的系列线性溶 液； 对所述系列线性溶液进行所述三重四极杆液质联用检测， 得到系列线性溶液的色谱信 息；权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 115389661 A 3