(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211042111.X (22)申请日 2022.08.29 (71)申请人 上海复活石医药 科技有限公司 地址 201700 上海市青浦区外 青松公路 5655号1幢2层S区280室 (72)发明人 杨茗橘　程芬　 (74)专利代理 机构 北京乾成律师事务所 1 1949 专利代理师 郑希元 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种包含蚕茧壳的中药组合物的质量控制 方法及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种包含蚕茧壳的中药复方 的检测方法， 其包括如下步骤： 取中药复方供试 品溶液和对照品溶液进行检测， 其中该中药复方 包括蚕茧壳、 玉米须、 黄芪和川芎， 该对照品为阿 魏酸、 黄芪甲苷、 丝氨酸和甘氨酸， 该检测的色谱 条件为： 采用填料为十八烷基硅烷键合硅胶的色 谱柱， 流动相A 选自乙腈、 甲醇和四氢呋喃中的一 种或多种， 流动相B为酸水溶液、 碱水溶液和/或 缓冲盐水溶液， 流速为0.6～1.5mL/min， 柱温为 30～50℃， 检测波长为200～360nm； 根据检测结 果， 获得该中药复方的成分信息， 或者成分信息 和含量信息。 该方法具备良好的线性关系， 精密 度高， 稳定性强， 重复性好， 加样回收率高， 简单 易行， 特别适用于该组合物的产业化中的质量控 制。 权利要求书4页 说明书19页 附图3页 CN 115406986 A 2022.11.29 CN 115406986 A 1.一种包 含蚕茧壳的中药复方的检测方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 取中药复方供试品溶液和对照品溶液进行检测， 其中所述中药复方包括蚕茧壳、 玉米 须、 黄芪和川芎， 所述对照品为阿魏酸、 黄芪甲苷、 丝氨酸和甘 氨酸， 所述检测的色谱条件为： 采用填料为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱， 流动相A选自乙 腈、 甲醇和四氢呋喃中的一种或多种， 流动相B为酸水溶液、 碱水溶液和 /或缓冲盐水溶液， 流速为0.6～1.5mL/mi n， 柱温为3 0～50℃， 检测波长为20 0～360nm； 其中， 检测所述黄芪甲苷的梯度洗脱程序为： 0～25min， 15％～25％A； 25～30min， 25％ ～45％A， 其中， 检测所述丝氨酸和所述甘氨酸的梯度洗脱程序为： 0～10min， 5％～10％A； 10～ 15min， 10％～ 20％A； 15～3 0min， 20％～ 23％A； 30～35min， 23％～5 5％A， 其中， 检测所述阿魏酸的洗脱程序为： 0～40mi n， 15％A； 根据检测结果， 获得 所述中药复方的成分信息， 或者成分信息和含量信息 。 2.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述信 息为根据 所记录的所述中药复 方供试品溶液的色谱图和所述对照品溶液的色谱图中的相应峰面积， 按照外标法计算所述 中药复方中以下成分中一种或多种的含量： 阿魏酸、 黄芪甲苷、 丝氨酸和甘 氨酸。 3.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述中药复方供试品溶液的制备方法 包括： (1)制备中药复方干膏粉； 以及(2)将所述中药复方干膏粉分别制备成用于丝氨酸和 甘氨酸检测的衍生化的供试品溶液、 用于阿魏酸检测的供试品溶液和/或用于黄芪甲苷检 测的供试品溶液。 4.根据权利要求3所述的检测方法， 其特征在于， 所述中药复方干膏粉的制备方法包括 以下步骤： (1)按照以下重量份配比分别称取各原料药： 蚕茧壳25～35份、 玉米须25～35份、 黄芪6 ～12份和川芎12 ～18份； (2)称取上述重量份的黄芪、 川芎和玉米须， 加水加热提取， 过 滤， 得到第一滤 液； (3)称取上述重量份的蚕茧壳， 加水加热提取， 过 滤， 得到第二滤 液； (4)将所述第一滤 液和所述第二滤 液合并， 浓 缩， 得到所述中药组合物； 以及 (5)将所述中药组合物与一种或多种药学上可接受的辅料混合， 干燥， 粉碎过筛， 得到 所述中药复方干膏粉。 5.根据权利要求4所述的检测方法， 其特征在于， 所述中药复方干膏粉的制备方法的步 骤(2)和/或步骤(3)进一 步包括所述原料 药加水浸泡的步骤； 优选地， 所述黄芪、 所述川芎和所述玉米须加水浸泡的时间为30～180min， 更优选地30 ～100min， 又优选地90～10 0min， 例如约90mi n； 优选地， 所述蚕茧壳加水浸泡的时间为30～180min， 更优选地30～90min， 又优选地60 ～90min， 例如约6 0min； 优选地， 按照以下重量份配比分别称取各原料药： 蚕茧壳28～35份、 玉米须28～35份、 黄芪8～12份和川芎13～18份； 优选地， 按照以下重量份配比分别称取各原料药： 蚕茧壳28.5～31.5份、 玉米须28.5～ 31.5份、 黄芪8.5 5～9.45份和川芎14.25～15.75份； 优选地， 按照以下重量份配比分别称取各原料药： 蚕茧壳约30份、 玉米须约30份、 黄芪权　利　要　求　书 1/4 页 2 CN 115406986 A 2约9份和川芎约15份； 特别优选地， 所述中药复方干膏粉 的制备方法的步骤(2)包括如下的[1]～[6]项中的 任意一项或者多 项： [1]所述水为蒸馏水或去离子水， 优选地所述水为冷水， 更优选地所述冷水没过原料药 表面2～5cm； [2]所述加热提取的操作重复2 ～4次， 例如2次； [3]所述加热为武火加热至沸， 文火 保持微沸； [4]所述水的用量为1～80倍量(L/kg)， 优选为5～30倍量， 更优选为8～14倍量， 例如约 12倍量； [5]所述加热提取的时间为15～180mi n， 优选为3 0～120mi n， 例如约90mi n； [6]所述过 滤为100～300目滤布单层过 滤， 例如3 00目滤布单层过 滤； 尤其优选地， 所述中药复方干膏粉 的制备方法的步骤(3)包括如下的[1]～[5]项中的 任意一项或者多 项： [1]所述水为蒸馏水或去离子水， 优选地所述水为冷水， 更优选地所述冷水没过原料药 表面2～5cm； [2]所述加热提取的操作重复2 ～4次， 例如3次； [3]所述水的用量为1～80倍量(L/kg)， 优选为5～30倍量， 更优选为12～16倍量， 例如 约16倍量； [4]所述加热提取的时间为15～180mi n， 优选为3 0～120mi n， 例如约6 0min； [5]所述过 滤为100～300目滤布单层过 滤， 例如10 0目滤布单层过 滤； 又尤其优选地， 所述中药复方干膏粉 的制备方法的步骤(4)包括如下的[1]～[3]项中 的任意一项或者多 项： [1]所述浓 缩为减压浓 缩； [2]所述浓 缩的温度为6 0～90℃， 例如约80℃； [3]所述浓 缩之后的浓 缩液的相对密度为1.02 ～1.35g/ml， 例如1.02 ～1.05g/ml。 6.根据权利要求4所述的检测方法， 其特征在于， 在所述中药复方干膏粉的制备方法的 步骤(5)中， 所述干燥 为喷雾干燥、 减压真空干燥或真空冷冻干燥； 更优选地， 所述喷雾干燥的条件为： 料液预热温度为60～120℃， 进风温度为100～180 ℃， 进样速度为5～ 25rpm， 雾化压力为0.5～3 MPa， 通针压力为0.5～3 MPa； 又优选地， 所述喷雾干燥的条件为： 料液预热温度为85.5～94.5℃， 进风温度为152～ 168℃， 进样速度为19 ～21rpm， 雾化压力为1.9 ～2.1MPa， 通针压力为1.9 ～2.1MPa； 尤其优选地， 所述喷雾干燥的条件为： 料液预热温度 为约90℃， 进风温度 为约160℃， 进 样速度为约20rpm， 雾化压力为约2MPa， 通针压力为约2Mpa； 特别优选地， 所述混合的步骤包括将所述浓缩之后的浓缩液的重量换算为理论干膏粉 的重量， 再按所述辅料与所述理论干膏粉的重量比为0.05～0.25∶1加入所述辅料， 充分溶 解， 混合均匀。 7.根据权利要求3所述的检测方法， 其特征在于， 用于丝氨酸和甘氨酸检测的衍生化的 供试品溶液的制备方法包括： 称取适量的中药复方干膏粉， 加入一定量的3～8mol/L盐酸溶 液， 120～200℃水解0.5～1.5小时， 放冷， 蒸干， 加入0.1～0.5mol/L盐酸溶液溶解， 再加入权　利　要　求　书 2/4 页 3 CN 115406986 A 3