(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210990118.8 (22)申请日 2022.08.18 (71)申请人 江西国药有限责任公司 地址 330000 江西省南昌市南昌县小蓝技 术开发区河泊路38 8号 申请人 江西济民可信集团有限公司 (72)发明人 詹业奇　杨明　余喜玉　刘娜　 骆祖文　刘乐云　曹铃娜　 (74)专利代理 机构 南昌贤达专利代理事务所 (普通合伙) 36136 专利代理师 董艳 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) (54)发明名称 一种发酵虫草菌粉Cs-4中染料木素的检测 方法 (57)摘要 本发明涉及医药技术领域， 提供了一种发酵 虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 包括染料 木素的提取及含量测定， 染料木素采用甲醇水溶 液提取并过微孔滤膜， 含量测定方法为高效液相 色谱法。 本发 明的检测方法对产品的质量控制更 为有效， 准确度、 灵敏度、 稳定性均较高。 权利要求书1页 说明书5页 附图4页 CN 115078596 A 2022.09.20 CN 115078596 A 1.一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 以高效液相色谱法测 定， 包括： 供试品溶液的制备： 取发酵虫草菌粉Cs ‑4， 精密称定， 加入 甲醇水溶液使溶解， 过微孔 滤膜， 取续滤 液作为供 试品溶液； 对照品溶液的制备： 取染料木素对照品， 精密称定， 加甲醇 ‑水流动相溶解， 得到对照品 溶液； 测定法： 分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液， 注入液相色谱仪， 以甲醇 ‑水为流动 相， 检测波长260~265nm， 测定得到色谱图， 根据色谱图计算发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素 的含量。 2.根据权利要求1所述的一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 所述供试品溶液的制备中： 甲醇水 溶液的浓度为5 0‑100wt%。 3.根据权利要求1所述的一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 所述供试品溶液的制备中： 使发酵虫草菌粉Cs ‑4溶解的方法包括超声30 ‑120min或加热回 流30‑120min。 4.根据权利要求1所述的一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 所述供试品溶液的制备中： 微 孔滤膜的直径为0.3~0.6 μm。 5.根据权利要求1所述的一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 所述对照品溶 液的制备中： 对照品溶 液的浓度为每1ml含染料木素5 ‑20 μg。 6.根据权利要求1所述的一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 所述对照品溶 液的制备中： 甲醇 ‑水流动相的体积比为3 0~90:70~10。 7.根据权利要求1所述的一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 所述测定法中， 色谱 条件如下： 柱温为20 ‑50℃， 以甲醇 ‑水体积比30~90:70~10为流动相， 流 动相的流速为0.5 ‑1.5ml/mi n； 进样量 为5‑50 μl。 8.根据权利要求7所述的一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 所述测定法中， 以甲醇 ‑水体积比5 0:50为流动相， 流速为1.0ml/mi n； 检测波长262nm。 9.根据权利要求1所述的一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 其特征在于， 所述供试品溶液的制备具体为： 取发酵虫草菌粉C s‑4， 精密称 定， 加入75%的甲醇溶液， 称 定 重量， 超声1小时， 放冷， 再称定重量， 用75%的甲醇溶液补足减失的重量， 过0.45μm微孔滤 膜， 取续滤 液作为供 试品溶液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115078596 A 2一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及医药技术领域， 尤其涉及一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方 法。 背景技术 [0002]发酵虫草菌粉 （Cs ‑4） 系从新鲜冬虫夏草  Cordycepssinensis （Ber k） Sace 中分离 所得的虫草菌 —蝙蝠蛾拟青霉 （Paecilomyc es hepiali Chen et Dai） Cs‑4 经深层发酵培 养， 将发酵产 物过滤， 干燥制成。 发酵虫草菌粉Cs ‑4具有补肾保肺， 秘精益气功能。 用于慢 性 支气管炎， 高血脂症， 阳痿、 遗精、 早泄、 性欲减退、 妇女月经不调、 腰酸腹痛、 白带清稀等性 功能低下症， 腰膝酸软、 畏寒肢冷、 头晕眼花、 耳鸣等老年虚症及晚期血吸血病肝硬化等症 状。 [0003]染料木素是发酵虫草菌粉Cs ‑4发酵原料大豆中的重要成分， 是评价发酵虫草菌粉 Cs‑4发酵程度的重要指标。 目前对虫草及其制品中染料木素检测技术有薄层色谱法、 HPLC 等， 但是薄层色谱法适用于定性分析、 无法准确定量分析， HPLC法对染料木素的提取率较 低、 准确度较差， 不利于对产品的质量控制。 目前还未见关于发酵虫草菌粉Cs ‑4 中染料木 素含量测定方法的相关报道， 有必 要建立一种科学的质量检测方法对发酵虫草菌粉C s‑4的 质量进行评价。 发明内容 [0004]本发明旨在至少克服上述现有技术的缺点与不足其中之一， 提供一种发酵虫草菌 粉Cs‑4中染料木素的检测方法。 本发明目的基于以下技 术方案实现： 本发明提供了一种发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料木素的检测方法， 以高效液相色谱法 测定， 包括： 供试品溶液的制备： 取发酵虫草菌粉Cs ‑4， 精密称定， 加入甲醇水溶液使溶解， 过 微孔滤膜， 取续滤 液作为供 试品溶液； 对照品溶液的制备： 取染料木素对照品， 精密称定， 加流动相溶解， 得到对照品溶 液； 测定法： 分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液， 注入液相色谱仪， 以甲醇 ‑水为 流动相， 检测波长260~265nm， 测定得到色谱图， 根据色谱图计算发酵虫草菌粉Cs ‑4中染料 木素的含量。 [0005]优选地， 所述供 试品溶液的制备中： 甲醇水 溶液的浓度为5 0‑100wt%。 [0006]优选地， 所述供试 品溶液的制备中： 使发酵虫草菌粉Cs ‑4溶解的方法包括超声30 ‑ 120min或加热回流3 0‑120min。 [0007]优选地， 所述供 试品溶液的制备中： 微 孔滤膜的直径为0.3~0.6 μm。 [0008]优选地， 所述供试 品溶液的制备具体为： 取发酵虫草菌粉Cs ‑4， 精密称定， 加入75% 的甲醇溶液， 称定重量， 超声1小 时， 放冷， 再称定重量， 用75%的甲醇溶液补足减失的重量，说　明　书 1/5 页 3 CN 115078596 A 3