(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210840152.7 (22)申请日 2022.07.18 (71)申请人 北京云鹏 鹏程医药 科技有限公司 地址 102600 北京市大兴区中关村科技园 区大兴生物医药产业基地永旺路2 2号 (72)发明人 杜威　梁通达　范晶　席丽娟　 赵文普　张家琦　 (74)专利代理 机构 太原荣信德知识产权代理事 务所(特殊普通 合伙) 14119 专利代理师 彭富国 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/34(2006.01) (54)发明名称 一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的 检测方法 (57)摘要 本发明涉及药物分析技术领域， 更具体而 言， 涉及一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂 质的检测方法。 3种遗传毒杂质为杂质K、 杂质L和 杂质M； 检测方法使用高效液相色谱仪进行， 流动 相由流动相A和流动相B组成， 采用梯度洗脱。 具 体操作步骤为： 供试品溶液： 溶液A； 对照品溶液： 溶液B、 C和D； 系统适用性溶液： 溶液E； 调节仪器： 色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 流 动相A， 流动相B， 调节柱温， 调节流动相流速和检 测波长， 采用梯度洗脱； 测定： 精密量取S1～S4制 成的各溶液， 分别注入液相色谱仪， 记录色谱图。 本发明根据产品结构特点及化合物 性质， 提供了 一种采用高效液相色谱仪即可同时测定利奈唑 胺中3种遗传毒杂质的检测方法。 权利要求书1页 说明书8页 附图3页 CN 115047117 A 2022.09.13 CN 115047117 A 1.一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特征在于： 所述3种遗传毒 杂质为杂质K、 杂质L和杂质M； 所述检测方法使用高效液相色谱仪进 行， 流动相由流动相A和 流动相B组成， 采用梯度洗脱。 2.根据权利要求1所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特征 在于： 所述检测方法的具体操作步骤为： S1.供试品溶液： 取利奈唑胺， 精密称定， 加溶剂溶解并定量稀释制成溶 液A； S2.对照品溶液： 取杂质K、 杂质L和杂质M对照 品， 分别精密称定， 加溶剂溶解并定量稀 释制成溶 液B、 C和D； S3.系统适用性溶液： 取利奈唑胺与杂质K、 杂质L、 杂质M， 分别精密称定， 加溶剂溶解并 定量稀释制成溶 液E； S4.调节仪器： 色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 流动相A， 流动相B， 调节柱 温， 调节流动相流速， 调节检测波长， 采用梯度洗脱； S5.测定： 精密量取S1～S4制成的各 溶液， 分别注入液相色谱仪， 记录色谱图。 3.根据权利要求2所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特征 在于： 所述S1中溶 液A的浓度为1.8～ 2.2mg/ml。 4.根据权利要求2所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特征 在于： 所述S2中溶 液B、 C和D的浓度均为0.025～0.0 35 μg/ml。 5.根据权利要求2所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特征 在于： 所述S3中溶 液E每1ml中含杂质K、 杂质L和杂质M各0.0 3 μg含利奈唑胺 2mg。 6.根据权利要求2所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特征 在于： 所述S1～S3中溶剂为10％乙腈。 7.根据权利要求2所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特征 在于： 所述S4中色谱柱的规格为150 ×4.6mm， 5 μm， 优选YMC ‑Pack ODS‑AM C18 150×4.6mm， 5 μm。 8.根据权利要求2所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特征 在于： 所述的流动相A为磷酸二氢钾缓冲液， 磷酸盐缓冲液浓度为0.02mol/L， 用磷酸调节pH 值至2.1， 所述流动相B为10％乙腈； 调节柱温为25～35℃， 调节流动相流速为0.9ml/min～ 1.1ml/min， 调节 检测波长分别为218n m～222nm检测杂质L和杂质M， 2 38nm～242nm检测杂质 K。 9.根据权利要求1或2所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其 特征在于： 所述采用梯度洗脱， 流动相的总体积为10 0％计， 在0～20分钟， 流动相A的体积由9 2％递减为85％， 流动相B的体积由8％递增为15％； 在20～30分钟， 流动相A的体积由85％递减为70％， 流动相B的体积由15％递增为3 0％； 在30～45分钟， 流动相A的体积由70％递减为3 0％， 流动性B的体积由3 0％递增为70％。 10.根据权利要求2所述的一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法， 其特 征在于： 所述S5中取 溶液100 μl， 注入液相色谱仪测量。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115047117 A 2一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及药物分析技术领域， 更具体而言， 涉及一种同时测定利奈唑胺中3种遗 传毒杂质的检测方法。 背景技术 [0002]利奈唑胺是第一个用于治疗革兰阳性球菌感染的噁唑烷酮类新型抗菌药物， 具有 良好的组织穿透力， 给药后在组织和体液中分布广泛， 具有独特的作用机制， 由于本品的特 殊结构， 与其他抗菌药多无交叉耐药现象， 在治疗多重耐药革兰阳性菌感染时具有很高的 有效性和安全性， 尤其对MRSA、 耐万古霉素肠球菌(VREF)有良好的抗菌作用， 是治疗耐万古 霉素肠球菌感染的唯一药物。 口服吸收迅速而且完全,F为 100％， Tmax为 1～2h， 具有重要的 临床地位。 [0003]然而， 利奈唑胺原料合成工艺会引入多个遗传毒性杂质， 遗传毒杂质在很低的浓 度下即可诱导基因突变并导致染色体的断裂和重排， 具有潜在的致癌性， 可能会危害病 人 的健康， 因此需要进行严格控制 。 原料药中微量的反应试剂或副产物等会作为杂质存在于 终产品中， 均需要子以关注。 现有技术中常用液相质谱联用仪方法进行检测， 检测成本高、 耗时长且灵敏度不高给制药企业带来成本上的问题， 不利于推广和使用。 发明内容 [0004]本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一， 为此， 本发明的一个方面 的目的在于， 提供一种同时测定利奈唑胺中3种遗传毒杂质的检测方法。 [0005]本发明所述3种遗传毒杂质为杂质K、 杂质L和杂质M； 所述检测方法使用高效液相 色谱仪进行， 流动相由流动相A和流动相B组成。 采用高效液相色谱法对利奈唑胺杂质进行 测定时， 流动相中流动相的比例对杂质的分离有较大影响， 当采用固定比例的流动相A与流 动相B进行检测时， 难以将杂质很好的分离 。 [0006]杂质K化学名称为3 ‑氟‑4‑(4‑吗啉基)‑苯胺， 结构式为 [0007]杂质L化学名称为(S) ‑N‑缩水甘油邻苯二甲酰 亚胺， 结构式为 [0008]杂质M化学名称为2,3 ‑二氢‑酞嗪‑1,4‑二酮， 结构式为 [0009]本发明所述检测方法的具体操作步骤为： [0010]S1.供试品溶液： 取利奈唑胺， 精密称定， 加溶剂溶解并定量稀释制成溶 液A；说　明　书 1/8 页 3 CN 115047117 A 3