(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210951139.9 (22)申请日 2022.08.09 (71)申请人 河北省药品医疗器 械检验研究院 （河北省化妆品检验研究中心） 地址 050227 河北省石家庄市鹿泉区玉泉 路219号 (72)发明人 王晓蕾　刘永利　王常顺　苏建　 (74)专利代理 机构 石家庄君联专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 13125 专利代理师 高宝新 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) (54)发明名称 一种同时测定北沙参中3种核苷类成分含量 的方法 (57)摘要 本发明属于中药检测技术领域， 具体是一种 同时测定北沙参中3种核苷类成分含量的方法。 具体包括以下步骤： 制备对照品溶液； 制备供试 品溶液； 精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl， 注入液相色谱仪， 测定， 即得； 本发明采用 0.1％磷酸溶液进行提取， 确保北沙参中核苷类 成分的稳定性与准确性， 并采用HPLC法进行含量 测定， 解决了使用同一提取方法、 在同一测定系 统完成北沙参中核苷类成分含量测定的关键问 题。 权利要求书1页 说明书10页 附图7页 CN 115508465 A 2022.12.23 CN 115508465 A 1.一种同时测定北沙参中3种核苷类成分含量的方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： A、 制备对照品溶 液； B、 制备供试品溶液： 取北沙参粉末1g， 称定， 置具塞锥形瓶中， 加入0.1％磷酸溶液 25ml， 密塞， 称 定重量， 超声处理50分钟， 放冷， 再称 定重量， 用0.1％磷酸溶液补足减失的重 量， 摇匀， 滤 过， 即得； C、 吸取对照品溶 液与供试品溶液各10 μl， 注入液相色谱仪， 测定， 即得； 色谱条件： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 以甲醇为流动相A， 以0.1％磷酸溶液为 流动相B， 进行梯度洗脱； 检测波长为253nm； 柱温为30℃。 理论板数按尿苷峰计算不低于 10000。 2.根据权利要求1所述的一种同时测定北沙参中3种 核苷类成分含量的方法， 其特征在 于： 所述对照品溶液的制备方法为： 取尿苷对照品、 腺苷对照品、 鸟苷对照品， 称定， 加0.1％ 磷酸溶液制成每1ml含尿苷 20 μg、 腺苷10 μg、 鸟苷 20 μg的混合溶 液， 即得。 3.根据权利要求1所述的一种同时测定北沙参中3种 核苷类成分含量的方法， 其特征在 于： 所述步骤B中， 超声处 理功率为500W， 频率为40kHz； 水温在3 0℃以下。 4.根据权利要求1所述的一种同时测定北沙参中3种 核苷类成分含量的方法， 其特征在 于： 所述梯度洗脱程序如下： 权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115508465 A 2一种同时测定北 沙参中3种核 苷类成分含量的方 法 技术领域 [0001]本发明属于中药检测技术领域， 具体是一种同时测定北沙参中3  种核苷类成分含 量的方法。 背景技术 [0002]北沙参为伞形科植物珊瑚菜GlehniaLittoralis  Fr.Schmidt  ex Miq. 的干燥 根， 《神农本草经》 列其为上品， 为我国常用大宗中药材之一。 甘， 微苦， 微寒， 归肺、 胃经， 具 有养阴清肺， 益胃生津的功效， 用于肺燥干咳、 劳嗽痰血、 胃阴不足、 热病津伤、 咽干口渴等 症。 野生北沙参为我国二级重点保护野生植物， 市场主流栽培种， 主产于河北安国、 山东莱 阳、 内蒙古赤峰等地。 北沙参现行质量标准收载于 《中 国药典》 2020年版一部， 仅有性状和横 切面显微鉴别的方法。 北沙参中主要活性 成分为多糖类、 核苷类、 香豆素类、 聚炔类等 成分， 文献多为北沙参中多糖、 香豆素类、 聚炔类成分的研究， 未见有对北沙参中核苷类成分的研 究。 而北沙参做汤剂为用水煎煮， 制剂也多为水提工艺， 水溶性成分中的核苷类成分具有很 强的抗病毒、 抗菌、 抗内毒 素的作用， 所以可以将其作为北沙参的质量控制指标之一。 目前， 尚未有一种能够在具有良好的灵敏度、 重复性、 准确性的同时， 还能快速、 简便测定北沙参 中腺苷、 鸟苷、 尿苷的含量的方法。 发明内容 [0003]本发明针对以上问题， 提供了一种同时测定北沙参中3种核苷类成分含量的方法， 包括以下步骤： [0004]A、 制备对照品溶 液； [0005]B、 制备供试 品溶液： 取北沙参粉末1g， 称定， 置具塞锥 形瓶中， 加入0.1％磷酸溶液 25ml， 密塞， 称 定重量， 超声处理50分钟， 放冷， 再称 定重量， 用0.1％磷酸溶液补足减失的重 量， 摇匀， 滤 过， 即得。 [0006]C、 吸取对照品溶 液与供试品溶液各10 μl， 注入液相色谱仪， 测定， 即得； [0007]色谱条件： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 以甲醇为流动相  A， 以0.1％磷酸 溶液为流动相B， 进行梯度洗脱； 检测波长为253nm； 柱温为30℃。 理论板数按尿苷峰计算不 低于10000。 [0008]优选的， 所述对照品溶液的制备方法为： 取尿苷对照品、 腺苷对照品、 鸟苷对照品， 称定， 加0.1％磷酸溶 液制成每1ml含尿苷 20 μg、 腺苷10 μg、 鸟苷 20 μg的混合溶 液， 即得。 [0009]优选的， 所述 步骤B中， 超声处 理功率为500W， 频率为40kHz； 水温在3 0℃以下。 [0010]优选的， 所述梯度洗脱程序如下：说　明　书 1/10 页 3 CN 115508465 A 3