(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210849228.2 (22)申请日 2022.07.19 (71)申请人 江苏农牧科技职业学院 地址 225300 江苏省泰州市凤 凰东路8号 (72)发明人 王莹　黄陈　贾纪萍　杨海峰　 (74)专利代理 机构 南京禾祁专利代理事务所 (普通合伙) 32462 专利代理师 孟捷 (51)Int.Cl. G01N 1/34(2006.01) G01N 1/40(2006.01) G01N 21/31(2006.01) G01N 21/64(2006.01) G01N 27/62(2021.01) G01N 30/02(2006.01)G01N 30/06(2006.01) G01N 30/14(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/74(2006.01) (54)发明名称 一种四环素类抗 生素的检测方法 (57)摘要 本发明提供一种四环素类抗生素的检测方 法， 涉及四环素类抗生素检测技术领域。 该四环 素类抗生素的检测方法， 包括以下步骤S1、 提取： 将动物组织解冻， 均质， 称取5.0g样品， 加入 4.8％的高浓度溶液20mL， 漩涡混合30S， 超声提 取振荡20min， 3000r /min离心5min， 取上清液， 待 净化， 使用滴管对放置四环素类抗生素容器瓶进 行取样提取， 将提取的四环素类抗生素滴入进净 化瓶中进行储存； S2、 净化： 将净化瓶内的提取液 倒入进萃取器中， 使液体样品溶液通过吸附剂， 保留其中被测物质， 再选用适当强度溶剂冲去杂 质。 通过滤网与滤布可对提取液中不同大小的固 体杂质进行过滤， 使四环素类抗生素在过滤时较 为彻底， 从而保障了四环素类抗 生素萃取浓度。 权利要求书1页 说明书2页 CN 115184125 A 2022.10.14 CN 115184125 A 1.一种四环素类抗 生素的检测方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1、 提取： 将动物组织解冻， 均质， 称取5.0g样品， 加入4.8％的高浓度溶液20mL， 漩涡混合30S， 超 声提取振荡20min， 3000r/min离心5min， 取上清液， 待净化， 使用滴管对放置 四环素类抗生 素容器瓶进行 取样提取， 将提取的四环素类抗 生素滴入进净化 瓶中进行储 存； S2、 净化： 将净化瓶内的提取液倒入进萃取器中， 使液体样品溶液通过吸附剂， 保留其中被测物 质， 再选用适当强度溶剂冲去杂质， 然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质， 从而达到快速 分离 净化与浓 缩的目的； S3、 过滤： 利用滤网与滤布将萃取后的提取液进行双重过滤， 使其提高四环素类抗生素净化质 量； S4、 检测： 将过滤完毕的四环素类抗生素放置在检测片上， 采用分光光度、 荧光或质谱检测系统 进行定量测定， 配合高效液相色谱系统可 再次对四环素类抗 生素进行检测。 2.根据权利要求1所述的一种四环素类抗生素的检测方法， 其特征在于： 所述S1中漩涡 混合时速控制在6 0‑80。 3.根据权利要求1所述的一种四环素类抗生素的检测方法， 其特征在于： 所述S2中强度 溶剂配比 比例为1： 3 0。 4.根据权利要求1所述的一种四环素类抗生素的检测方法， 其特征在于： 所述S3 中滤网 位于滤布的上 方设置， 使其可对不同大小的萃取杂质进行 过滤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115184125 A 2一种四环素类抗生素的检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及四环素类抗生素检测技术领域， 具体为一种四环素类抗生素的检测方 法。 背景技术 [0002]环素类抗生素是一种被广泛使用的药物， 包括四环素、 金霉素、 土霉素和强力霉素 等， 被广泛用于人体的抗菌治疗药剂以及畜禽养殖和水产养殖的促增长剂。 由于具有很好 的水溶性和迁移性， 水体内的抗生素类污染物质会进一步迁移至大气和土壤中， 导致更广 的污染辐射范围。 其次， 由于抗生素在人体与动物体内具有毒性与准持久性， 当摄入过多的 抗生素后， 会在体内不断累积并对健康造成影响。 再次， 由于抗生素具有难生物降解特性， 导致很难在自然界中被自然降解， 因此会导致环境中出现抗药性强的 “超级细菌 ”， 进而提 高后续感染的治疗难度， 为了确保四环素类抗生素 的治疗效果， 使其需要使用检测 技术对 四环素类抗 生素进行检测。 [0003]当四环素类抗生素的检测在萃取净化后， 提取液 中细小杂质过多容易影响四环素 类抗生素 的检测萃取浓度影响检测效果， 同时在对净化好的提取液进行检测时， 通常只进 行一次检测， 导 致四环素类抗 生素的检测准确性和灵敏度较差 。 发明内容 [0004](一)解决的技 术问题 [0005]针对现有技术的不足， 本发明提供了一种四环素类抗生素的检测方法， 解决了提 取液中萃取浓度以及准确性、 灵敏度的问题。 [0006](二)技术方案 [0007]为实现以上目的， 本发明通过以下技术方案予以实现： 一种四环素类抗生素的检 测方法， 包括以下步骤： [0008]S1、 提取： [0009]将动物组织解冻， 均质， 称取5.0g样品， 加入4.8％的高浓度溶液20mL， 漩涡混合 30S， 超声提取振荡20min， 3000r/min离心5min， 取上清液， 待净化， 使用滴管对放置 四环素 类抗生素容器瓶进行 取样提取， 将提取的四环素类抗 生素滴入进净化 瓶中进行储 存； [0010]S2、 净化： [0011]将净化瓶内的提取液倒入进萃取器中， 使液体样品溶液通过吸附剂， 保留其中被 测物质， 再选用适当强度溶剂冲去杂质， 然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质， 从而达到快速 分离净化与浓 缩的目的； [0012]S3、 过滤： [0013]利用滤网与滤布将萃取后的提取液进行双重过滤， 使其提高四环素类抗生素净化 质量； [0014]S4、 检测：说　明　书 1/2 页 3 CN 115184125 A 3