(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211075254.0 (22)申请日 2022.09.04 (71)申请人 青岛海关技 术中心 地址 266000 山东省青岛市城阳区新悦路 83号 (72)发明人 孟慧琴　吕宁　徐琴　张力　金莹　 李璐　 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 同时检测食品中4种禁用色素的液相色谱串 联质谱方法 (57)摘要 本发明公开了一种同时检测品食品中4种禁 用色素的液相色谱串 联质谱方法， 食品经碱化甲 醇溶液提取， 经离心、 过滤后， 用LC/MS/MS测定， 采用阴性样品基质标准曲线， 外标法定量。 本发 明的方法操作简便、 定性定量能力较强， 可作为 检测固体糖果类和液体饮料类食品中4种色素含 量的可靠方法。 权利要求书2页 说明书11页 附图3页 CN 115436512 A 2022.12.06 CN 115436512 A 1.一种同时检测食品中4种禁用色素的液相色谱串联质谱方法， 其特征在于， 食 品经碱 化甲醇溶液提取， 经离心、 过滤后， 用LC/MS /MS测定， 采用阴性样品基质标准曲线， 外标法定 量。 2.根据权利要求1所述的同时检测食 品中4种禁用色素的液相色谱串联质谱方法， 其特 征在于， 具体包括下列步骤： (一)样品前处 理 称取样品5g置于50mL离心管中， 加碱化甲醇提取液定容至50mL， 涡旋混匀30s， 振荡提 取1.5h， 4℃下5000r/min离心3min， 取1mL上清液过0.22μm滤膜， 观察滤膜的颜色， 若有吸 附， 取3‑5次后的滤 液， 然后置 于进样小瓶中， 供LC /MS/MS分析； (二)LC‑MS/MS检测 (1)色谱条件如下： a)色谱柱： Porshel l 120， EC‑C18， 3.0m m×100mm， 填料粒径2.7 μm； b)流动相： A相： 水(0.025％的 甲酸+2mM的乙酸铵)， B相： 乙腈； c)流速： 0.4mL/mi n； d)柱温： 3 5℃； e)进样量： 5 μL f)梯度洗脱程序如下： 时间(min) A相[％] B相[％] 0.00 80 20 0.50 80 20 1.00 70 30 4.00 50 50 5.00 5 95 7.00 5 95 8.00 80 20 (2)质谱条件 a)离子源： 电喷雾(AJS  ESI)离子源； b)扫描模式： 负离 子扫描； c)检测方式： 多反应监测(MRM)； c)喷雾电压(Capi llary)：‑3000V； d)离子源温度(Gas  Temp)： 300℃； e)气流速度(Gas  Flow)： 7L/mi n； f)雾化气(Nebul izer)： 40psi； g)鞘气温度(Sheath  Gas Temp)： 350℃； h)鞘气流 量(Sheath  Gas Flow)： 11L/min； i)其他质谱条件权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115436512 A 2(3)定性测定 按照上述液相色谱 ‑质谱/质谱条件测定样品和基质标准工作溶液， 如果样品的质量色 谱峰保留时间与标准品一致， 所有选择离子均应出现， 则根据定性选择离子对的种类及其 相对丰度比， 对其进行阳性确证； 定性时， 其相对丰度允许偏差不超过下表规定的范围， 则 可判定样品中存在对应的被测物； (4)定量测定 以程序进样方式， 取6点阴性样品基质标准工作液各5μL自动进样； 以化学工作站建立 标准工作液 的响应值与相当于样品中4种色素含量的线性方程， 并对样液 的质谱数据进行 处理。 3.根据权利要求2所述的同时检测食 品中4种禁用色素的液相色谱串联质谱方法， 其特 征在于， 所述碱化甲醇提取液提取液的配置方法为： 分别量取100mL甲醇、 900mL水、 200 μL氨 水混匀。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115436512 A 3