(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210884444.0 (22)申请日 2022.07.25 (71)申请人 山东省分析测试中心 地址 250014 山东省济南市历下区科院路 19号 (72)发明人 闫慧娇　王晓　赵恒强　王志伟　 陈龙　耿岩玲　孟兆青　 (74)专利代理 机构 济南圣达知识产权代理有限 公司 372 21 专利代理师 王磊 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 小儿消食片的指纹图谱构建方法及其成分 含量的测定方法 (57)摘要 本发明属于中药质量分析领域， 涉及 小儿消 食片的指纹图谱构建方法及其成分含量的测定 方法。 指纹图谱构建方法为， 对若干批次的小儿 消食片分别进行溶剂提取获得供试品溶液， 以熊 果酸、 齐墩果酸、 山楂酸、 橙 皮苷、 柚皮苷、 槲 皮素 作为对照品， 对 供试品溶液和对照品溶液进行超 高效液相色谱检测获得色谱图， 对色谱图进行分 析处理， 即得； 超高效液相色谱检测过程中采用 电雾式检测器进行检测。 本发明可以对 结构差异 较小的成分进行有效的分离， 可以更准确地实现 产品中有效成分含量的同时测定。 通过本发明的 方法能够保证小儿消食片的稳定性、 一致性和可 控性。 权利要求书1页 说明书18页 附图8页 CN 115166098 A 2022.10.11 CN 115166098 A 1.一种小儿消食片的指纹图谱构建方法， 其特征是， 对若干批次的小儿消食片分别进 行溶剂提取获得供试品溶液， 以熊果酸、 齐墩果酸、 山楂酸、 橙皮苷、 柚皮苷、 槲皮素作为对 照品， 对供试品溶液和对照品溶液进行超高效液相色谱检测获得色谱图， 对色谱图进行分 析处理， 即得； 超高效液相色谱检测过程中采用CAD检测器进行检测。 2.如权利要求1所述的小儿消食片的指纹图谱构建方法， 其特征是， 超高效液相色谱检 测中， 流动相中， 流动相A为甲醇， 流动相B为7.9 ～8.1mm甲酸铵的水 溶液； 或， 超高效液相色谱检测中， 采用的色谱柱为Waters  UPLC beh C18柱， 150 ×4.6mm， 1.7 μm； 或， 超高效液相色谱检测中， 柱温为2 9.0～30.0℃。 3.如权利要求1所述的小儿消食片的指纹图谱构建方法， 其特征是， 超高效液相色谱检 测中， 洗脱程序为： 0 ‑5min， 5％甲醇； 5 ‑20min， 5％ ‑20％甲醇； 20 ‑40min， 20％ ‑33％甲醇； 40‑70min， 33％ ‑55％甲醇； 70 ‑80min， 55 ‑65％甲醇； 80 ‑95min， 65 ‑65％甲醇； 95 ‑100min， 65‑76％甲醇； 100 ‑145min， 76 ％甲醇； 145 ‑148min， 76 ‑85％甲醇； 148 ‑210min， 85 ‑100％甲 醇； 体积流 量0.25～0.3 5mL/min。 4.如权利要求1所述的小儿消食片的指纹图谱构建方法， 其特征是， 分析处理过程中， 以一个批次小儿消食片的色谱图作为参照图谱， 采用平均数法， 进行多点校正和色谱 峰匹 配， 再进行全谱峰匹配获得； 利用对照品色谱指认共有峰并进行相似度评价； 优选地， 相似 度评价中， 相似度为0.971～0.9 99之间。 5.如权利要求1所述的小儿消食片的指纹图谱构建方法， 其特征是， 溶剂提取获得供试 品溶液的方法为超声提取； 或， 溶剂提取采用甲醇作为溶剂。 6.一种小儿消食片指纹图谱， 其特征是， 由权利要求1～5任一所述的指纹图谱构建方 法获得。 7.如权利要求6所述的小儿消食片 指纹图谱， 其特 征是， 包括44个共有特 征峰； 或， 以齐墩果 酸所在的特 征峰为参照峰。 8.一种小儿消食片成分含量的测定方法， 其特征是， 根据权利要求1～5任一所述的指 纹图谱构建方法获得小儿消食片指纹图谱， 根据小儿消食片标准指纹图谱计算得到柚皮 苷、 橙皮苷、 槲皮素、 山楂酸、 齐墩果 酸、 熊果酸含量。 9.一种存储介质， 其特征是， 存储有小儿消食片指纹图谱， 所述小儿消食片指纹图谱由 上述指纹图谱构建方法获得。 10.一种小儿消食片指纹图谱在小儿消食片 的质量控制中的应用， 所述小儿消食片指 纹图谱由权利要求1～5任一所述的指纹图谱构建方法获得。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115166098 A 2小儿消食片的指纹图谱构建 方法及其成分含量的测定方 法 技术领域 [0001]本发明属于中药质量分析领域， 涉及小儿消食片的指纹图谱构建方法及其成分含 量的测定方法。 背景技术 [0002]公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解， 而不必然 被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技 术。 [0003]小儿消食片(Xiao ’er Xiaoshi Pian)由山楂、 炒麦芽、 六神曲(炒)、 炒鸡内金、 槟 榔、 陈皮六味中药 组成。 收载于 《中国药典》 一部。 在现行2020年版 《中国药典》 的质量标准中 含量测定指标仅有 熊果酸， 且缺乏整体的质量表征 方法。 发明内容 [0004]为了解决现有技术的不足， 本发明的目的是提供小儿消食片的指纹图谱构建方法 及其成分含量的测定方法， 通过本发明的方法能够保证小儿消食片的稳定性、 一致性和可 控性。 [0005]为了实现上述目的， 本发明的技 术方案为： [0006]一方面， 一种小儿消食片的指纹图谱构建方法， 对若干批次的小儿消食片分别进 行溶剂提取获得供试品溶液， 以熊果酸、 齐墩果酸、 山楂酸、 橙皮苷、 柚皮苷、 槲皮素作为对 照品， 对供试品溶液和对照品溶液进行超高效液相色谱检测获得色谱图， 对色谱图进行分 析处理， 即得； [0007]超高效液相色谱检测过程中采用电雾式(CAD)检测器进行检测。 [0008]超高效液相色谱比高效液相及液相色谱具有更高 的检测灵敏度和分辨率。 小儿消 食片体系复杂， 含有 大量性质相近的成分， 高效液相及液相色谱难以实现完全区分， 影响定 量准确性。 [0009]超高效液相色谱的检测器包括紫外检测器、 二极管阵列(DAD)检测器、 示差折光检 测器、 ELSD检测器、 电雾式(CAD)检测器， 这些检测器中DAD检测器能够实现全波长检测， 可 以实现三 维谱图分析， 更适于指纹图谱的构建， 因而在指纹图谱的构建中优先选择DAD检测 器进行检测。 [0010]然而， 本发明经过实验发现， 采用DAD检测器， 在不同紫外检测波长下， 各成分出峰 高度不同， 而小儿消食片 中化学成分类型复杂多样， 且存在大量在紫外区只有末端吸收的 成分， 尤其是对于齐墩果酸和峰熊果酸等五环三萜类化合物DAD出峰高度较低， 难以分辨， 导致色谱峰信息较少， 难以获得稳定的标准小儿消食片的指纹图谱。 电雾式检测器， 又称荷 电气溶胶检测器(charge d aerosol detection， CAD)是一种新型的高灵敏度通用检测器， 其检测信号不依赖于被检测物质的化学结构， 对不同结构的化合物有统一的响应。 与传统 的DAD检测器比较， 其检测灵敏度高于UV的末端波长检测。 本发明经过进一步实验意外发说　明　书 1/18 页 3 CN 115166098 A 3