(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210879004.6 (22)申请日 2022.07.25 (71)申请人 广西壮族自治区食品药品检验所 地址 530021 广西壮 族自治区南宁市青秀 区青湖路9号 (72)发明人 谭菊英　朱健萍　何虹　蒋洁　 曾庆花　王娟　孙煜　邓鸣　 卢日刚　 (74)专利代理 机构 南宁市来 来专利代理事务所 (普通合伙) 45118 专利代理师 来光业 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/34(2006.01) (54)发明名称 小檗碱甲氧苄啶胶囊 有关物质的测定方法 (57)摘要 本发明公开了一种小檗碱甲氧苄啶胶囊有 关物质的测定方法， 该方法采用梯度洗脱HPLC 法， 采用KROMASIL ‑C18色谱柱， 以含0.1%三乙胺 的0.05mol/L磷 酸二氢钾溶液为流动相A， 以体积 比为4:1的乙腈 ‑四氢呋喃为流动相B， 进行梯度 洗脱； 采用紫外检测器， 检测波长为280nm， 对小 檗碱甲氧苄啶胶囊的有关物质进行测定， 属于药 物检测技术领域。 本发明一种小檗 碱甲氧苄啶胶 囊有关物质的测定方法， 该方法操作简便， 灵敏 度高， 专属性好， 结果准确， 可快速同时测定小檗 碱甲氧苄啶胶囊的多个杂质， 弥补了该品种质量 标准缺陷， 采用该方法能进一步有效控制小檗碱 甲氧苄啶胶囊的药品质量和提高其质量水平， 确 保临床用药安全。 权利要求书1页 说明书4页 附图5页 CN 115219630 A 2022.10.21 CN 115219630 A 1.一种小檗碱甲氧苄啶胶囊有关物质的测定方法， 其特征在于， 采用梯度洗脱HPLC法 对小檗碱甲氧苄啶胶囊的有关物质进行测定， 具体包括以下步骤： （1） 色谱条件： 色谱柱: KROMASIL ‑C18， 250mm ×4.6mm， 5μm； 以含0.1%三乙胺的 0.05mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相A， 以体积比为4:1的乙腈 ‑四氢呋喃为流动相B， 进行梯 度洗脱； 梯度洗脱 程序： 0‑40分钟， A 85%， 40 ‑42分钟， A 85 →75， 42‑52分钟， A 75%， 52 ‑54分 钟， A 75% →85%， 54‑70分钟， A 85%； 进样量 为10 μl； （2） 溶液制备： 对照品溶 液： 取盐酸小檗碱对照品用流动相配制浓度为10 μg/ml的溶 液； 供试品溶液： 取本 品10粒内容物， 精密称定， 研细， 称取相当于10mg盐酸小檗碱的量， 置 10ml量瓶中， 加入流动相超声并不时振摇 使溶解， 冷却至 室温， 用流动相稀释至刻度， 摇匀， 以0.45 μm滤膜滤 过， 取续滤 液， 即得； 上述对照品溶液和供试品溶液的制备中， 所用的流动相为流动相A和B按照85:15的体 积比进行混合得到的溶 液； （3） 测定： 精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μL， 分别注入液相色谱仪， 按上述的 色谱条件进行测定， 记录色谱图， 供试品溶液中如检出杂质， 以对照品外标法计算， 单个杂 质不能过盐酸小檗碱标示 量的0.5%， 杂质总量 不能过盐酸小檗碱标示 量的1.0%。 2.根据权利要求1所述的小檗碱甲氧苄啶胶囊有关物质的测定方法， 其特征在于， 采用 紫外检测器， 检测波长为280nm。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115219630 A 2小檗碱甲氧苄啶胶囊有关物质的测定方 法 技术领域 [0001]本发明属于药物检测技术领域， 具体涉及 一种小檗碱甲氧苄啶胶囊有关物质的测 定方法。 背景技术 [0002]小檗碱甲氧苄啶胶囊曾用名为增效黄连素胶囊， 该品种为复方制剂， 每粒含盐酸 小檗碱100毫克， 甲氧苄啶50毫克， 主要用于敏感菌所致的胃肠炎、 细菌性痢疾等疾病。 不良 反应有恶心、 呕吐、 药疹、 腹泻等。 小檗碱甲氧苄啶胶囊现行标准为 《国家药品标准》 化学药 品地方标准上升国家标准第十一册， 在国家标准中盐酸小檗碱的含量测定方法为HPLC法， 甲氧苄啶的含量测定方法为萃 取‑紫外分光光度法； 现行标准设置有缺陷： 对有关物质未进 行控制； 对溶出度未进行控制； 现有的盐酸小檗碱HPLC含量测定方法无法将主成分和杂质 有效分开； 甲氧苄啶含量测定方法操作繁琐， 准确度低、 误差较大。 [0003]有关物质是指在生产过程中带入的起始原料、 中间体、 聚合体、 副反应产物， 以及 贮藏过程中的降解产 物等。 有关物质与药品质量、 安全性及疗效密切相关， 含有杂质的化学 药物在人体内的药 理活性、 代谢过程及毒性存在着显著的差异； 因此， 药物有关物质的控制 极其重要。 有关物质是绝大多数药物必须要检测的项目， 小檗碱甲氧苄啶胶囊的现行标准 中未收录有有关物质检查项， 不利于产品的质量控制。 因此， 建立一种小檗 碱甲氧苄啶胶囊 有关物质的测定方法， 有效、 全面的检测小檗 碱甲氧苄啶胶囊中的有关物质， 对于小檗 碱甲 氧苄啶胶囊的进一 步质量控制具有十分重要的意 义。 发明内容 [0004]本发明的目的在于针对现有技术的不足而提供的一种小檗碱甲氧苄啶胶囊有关 物质的测定方法， 该方法操作简 便， 灵敏度高， 专属性好， 结果准确， 可快速同时测定小檗碱 甲氧苄啶胶囊的多个杂质， 有效、 全面， 弥补了该品种质量标准缺陷， 采用该方法能进一步 有效控制小檗碱甲氧苄啶胶 囊的药品质量和提高其质量水平， 对提高该药品的安全性有积 极的作用。 [0005]为实现上述目的， 本发明采用如下的技 术方案： 一种小檗碱甲氧苄 啶胶囊有关物质的测定方法， 采用梯度洗脱HPLC法对小檗碱甲 氧苄啶胶囊的有关物质进行测定， 具体包括以下步骤： （1） 色谱条件： 色谱柱: KROMASIL ‑C18 ( 250mm ×4.6mm， 5 μm) ， 以含0.1%三乙胺 的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相A， 以体积比为4:1的乙腈 ‑四氢呋喃为流动相B， 进行 梯度洗脱； 梯度洗脱 程序： 0‑40分钟， A 85%， 40 ‑42分钟， A 85 →75， 42‑52分钟， A 75%， 52 ‑54 分钟， A 75% →85%， 54‑70分钟， A 85%； 进样量 为10 μl； 采用紫外检测器， 检测波长为280nm； （2） 溶液制备： 对照品溶 液： 取盐酸小檗碱对照品用流动相配制浓度为10 μg/ml的溶 液； 供试品溶液： 取本品10粒内容物， 精密称定， 研细， 称取相当于10mg盐酸小檗碱的说　明　书 1/4 页 3 CN 115219630 A 3