(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210985598.9 (22)申请日 2022.08.17 (71)申请人 中央民族大 学 地址 100081 北京市海淀区中关村南大街 27号 (72)发明人 周帜　再帕尔·阿不力孜 　王纪阳　 谢冰　 (74)专利代理 机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 王春霞 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 新疆一枝蒿中生长关键成分及生长期判别 方法 (57)摘要 本发明公开了新疆一枝蒿中生长关键成分 及生长期判别方法。 本发明通过植物代谢组学分 析方法确定新疆一枝蒿中的生长关键成分， 用于 判别新疆一枝蒿的生长期， 生长关键成分指的是 仅与该药用植物生长发育过程密切相关而不受 生态环境的影 响的成分。 本发明中生长关键成分 包括由液相色谱 ‑质谱联用分析方法得到的新疆 一枝蒿中的组分1 ‑22。 本发明生长期判别方法是 基于代谢 组学技术开发的， 并且研究了新疆一枝 蒿两个主要产区新疆阿勒泰富 蕴和新疆哈密， 保 证了生长关键成分信息全面、 可靠； 新疆一枝蒿 通常在夏秋季即盛花期及之后采集入 药， 对于无 法直观鉴别的新疆一枝蒿来源药材， 例如一小 段 植物茎、 植物粉末， 可以采用本发明方法简便、 快 速地判别是否为盛花期采收。 权利要求书2页 说明书8页 附图1页 CN 115308333 A 2022.11.08 CN 115308333 A 1.新疆一枝蒿中生长关键成分在判别或辅助判别新疆一枝蒿的生长期中的应用； 所述生长期包括幼苗期、 发育期和盛花期； 所述生长关键成分包括由液相色谱 ‑质谱联用分析方法得到的新疆一枝蒿中的如下组 分1‑组分22： 组分1： m/z  503.1257， 17.48min； 组分2： m/z  263.1282， 12.39min； 组分3： m/z   179.0580， 1.06min； 组分4： m/z  287.0557， 13.75min； 组分5： m/z  287.0478， 13.49min； 组分 6： m/z 287.0494， 15.66min； 组分7： m/z  315.0545， 13.72min； 组分8： m/z  353.0327， 15.69min； 组分9： m/z  370.0226， 13.49 min； 组分10： m/z  397.2259， 16.99min； 组分11： m/z   431.1975， 8.36min； 组分12： m/z  474.2694， 2 3.57min； 组分13： m/z  502.2995， 23.65min； 组 分14： m/z  514.118， 11.09min； 组分15： m/z  542.2557， 23.57min； 组分16： m/z  562.3216， 23.65min； 组分17： m/z  567.2154， 14.82min； 组分18： m/z  267.1595， 15.62min； 组分19： m/z   271.0608， 15.65min； 组分20： m/z  287.0557， 15.57min； 组分21： m/z  465.1035， 9.44min； 组 分22： m/z 609.1325， 12.14mi n； 所述液相色谱 ‑质谱联用分析 方法的条件如下： 液相色谱条件如下： 液相色谱柱： Acquity  UPLC HSS T3； 流动相由A相和B相组成， 所述A相为含有甲酸体积含量为0.1％的水， B相为含有甲酸体 积含量为0.1％的乙腈； 洗脱梯度如下： 0至20min， 所述B相的体积含量为5％～50％， 其余为所述A相； 大于 20min至27min， 所述B相的体积含量为50％～98％， 其余为所述A相； 大于27min至30min， 所 述B相的体积含量 为98％， 其 余为所述A相； 质谱条件如下： 离子源为电喷雾 离子源， 采用正、 负离 子检测模式， 各路气路均使用氮气； 扫描模式： Ful l scan； 扫描范围： m/ z 100～1000； 喷雾电压： 3.5 /‑3kV。 2.一种新疆一枝蒿生长期的判别方法， 包括如下步骤： 采用液相色谱 ‑质谱联用分析方法检测待测新疆一枝蒿中的生长关键成分， 得到所述 生长关键成分的峰面积， 并分别代入式(1)、 式(2)和式(3)中， 按照下述1 ‑3)即实现生长期 的判别： 1)若式(1)的计算 值最高， 则待测新疆一枝蒿样本的采收时期为幼苗期； 2)若式(2)的计算 值最高， 则待测新疆一枝蒿样本的采收时期为发育期； 3)若式(3)的计算 值最高， 则待测新疆一枝蒿样本的采收时期为盛花期； y1＝3.03×10‑6A1+4.57×10‑7A2‑1.36×10‑7A3‑8.00×10‑6A4+3.35×10‑6A5‑9.32×10 ‑6A6‑7.19×10‑7A7‑1.80×10‑5A8+2.02×10‑5A9+9.49×10‑6A10‑1.92×10‑6A11+4.80 ×10‑ 6A12‑2.90×10‑5A13+3.03 ×10‑6A14‑2.78×10‑5A15+1.82×10‑5A16+1.12 ×10‑5A17+2.63 × 10‑6A18+2.23 ×10‑7A19+5.32 ×10‑9A20‑5.23×10‑8A21‑3.17×10‑6A22‑55.21；  (1) y2＝5.51×10‑6A1+9.16×10‑7A2‑1.12×10‑7A3‑2.71×10‑6A4+2.91×10‑6A5‑1.17× 10‑5A6‑1.65×10‑7A7‑4.53×10‑5A8+1.69×10‑6A9+8.58×10‑6A10‑5.63×10‑6A11+8.60 ×权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115308333 A 210‑6A12‑4.06×10‑6A13+5.23 ×10‑6A14+1.75 ×10‑6A16+2.53 ×10‑5A17+1.08 ×10‑6A18+ 2.00×10‑7A19+3.70 ×10‑9A20‑8.94×10‑8A21‑3.74×10‑6A22‑40.41；               (2) y3＝1.58×10‑6A1+1.12×10‑6A2‑4.85×10‑7A3‑1.09×10‑5A4‑6.65×10‑6A5+2.48× 10‑5A6+5.78×10‑7A7+4.90×10‑5A8+2.26×10‑5A10+3.26 ×10‑5A11+1.01 ×10‑6A12‑5.83× 10‑5A13‑5.68×10‑7A14+1.68 ×10‑5A15+3.36 ×10‑5A16+4.84 ×10‑5A17+1.73 ×10‑6A18+2.58 × 10‑7A19+1.97 ×10‑8A20+3.96×10‑9A21‑1.64×10‑5A22‑273.94；               (3) 各式中， A1‑A22表示所述 生长关键成分组分1 ‑组分22的峰面积。 3.根据权利要求1所述的应用或权利要求2所述的判别方法， 其特征在于： 检测所述新 疆一枝蒿之前， 对所述 新疆一枝蒿进行如下处 理： 将新疆一枝蒿样本制备成冻干粉末； 采用甲醇与水的混合液对所述冻干粉末进行提取； 所述甲醇与所述水的体积比为3～5： 1； 所述冻干粉末与所述混合液的用量比为： 45～5 5mg： 1mL所述混合液。 4.根据权利要求1或2所述的应用或权利要求2或3所述的判别方法， 其特征在于： 在冰 浴条件下进行 所述提取； 首先在高速分散器中进行提取， 然后再在超声仪中进行超声辅助提取， 再经离心、 浓缩 以及乙腈 ‑水复溶， 离心后的上清液 过滤后用于所述液相色谱 ‑质谱联用分析。 5.根据权利要求4所述的应用或判别方法， 其特征在于： 在高速分散器中的提取条件如 下： 依次在下述条件下进行提取： 25000rpm下提取1min， 3000rpm下提取1min， 25000rpm下 提取1min； 所述超声辅助提取的时间为10mi n。 6.一种新疆一枝蒿生长期的判别系统， 包括处理器和存储有计算机程序的存储器； 所 述处理器被配置成执 行所述计算机程序以实现如权利要求2 ‑5中任一项所述的判别方法。 7.一种计算机存储介质， 其特征在于： 所述计算机存储介质上存储有计算机程序， 当所 述计算机程序被处 理器执行时实现如权利要求2 ‑5中任一项所述判别方法。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115308333 A 3