(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211082618.8 (22)申请日 2022.09.06 (71)申请人 江阴天江药业有限公司 地址 214429 江苏省无锡市江阴高新区新 胜路1号 (72)发明人 祝倩倩　石海培　陈盛君　李松　 王协和　浦香兰　袁健　李淑娟　 周海琴　王琪　王慧敏　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 柏尚春 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/54(2006.01)G01N 30/74(2006.01) G01N 30/88(2006.01) (54)发明名称 枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建及应 用 (57)摘要 本发明公开了一种枳实薤白桂枝汤UPLC特 征图谱方法的构建及应用， 该特征图谱采用超高 效液相， 通过优化检测方法， 对枳实薤白桂枝汤 样品的整体概貌进行表征和归属分析， 充分展现 了枳实薤白桂枝汤中各药味的色谱信息， 充分体 现了处方药味质量与产品质量的有效追溯和全 面控制。 其次， 将该方法应用于处方中5个药味的 药材和饮片检测及质量控制， 实现药材到饮片到 复方制剂样品的特征传递， 达到质量传递和质量 追溯的目的。 该方法操作简便、 省时高效， 特征组 分色谱信息全面、 成分专属性强， 为枳实薤白桂 枝汤复方制剂开发和产品质量的过程控制提供 科学有效的研究依据。 权利要求书2页 说明书10页 附图8页 CN 115372517 A 2022.11.22 CN 115372517 A 1.一种枳实薤白桂枝汤UPLC特 征图谱的构建方法， 其特 征在于， 包 含以下步骤： (1)对照品加入溶剂制成对照品溶 液； (2)取枳实薤白桂枝汤作为供 试品， 加入溶剂处 理后制成供 试品溶液； (3)液相色谱检测； (4)特征图谱的建立： 呈现22个共有峰， 通过对照品指认出10个特征峰， 分别为尿苷、 腺 苷、 鸟苷、 芸香柚皮苷、 柚皮苷、 橙皮苷、 新 橙皮苷、 桂皮醛、 和厚朴酚、 厚朴酚。 2.根据权利要求1所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 步骤 (4)中所述各共有峰的相对保留时间如下： 以鸟苷为基准峰S1， 8个共有峰的相对保留时间如下： 0.68( ±10％)、 0.75( ±10％)、 0.94(±10％)、 1.00、 1.10( ±10％)、 1.82( ±10％)、 2.34( ±10％)、 3.01( ±10％)， 分别 对 应峰1～峰8； 以柚皮苷为基准峰S2， 14个共有峰的相对保留时间如下： 0.81( ±10％)、 0.85( ± 10％)、 0.88( ±10％)、 0.94( ±10％)、 1.00、 1.06( ±10％)、 1.13( ±10％)、 1.23( ±10％)、 1.33(±10％)、 1.37( ±10％)、 1.44( ±10％)、 1.47( ±10％)、 1.52( ±10％)、 1.56( ± 10％)， 分别对应峰9 ～峰22。 3.根据权利要求1所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 步骤 (1)中所述对照品及其溶液浓度如下： 尿苷10 ‑50 μg/mL、 腺苷5 ‑50 μg/mL、 鸟苷5 ‑50 μg/mL、 芸 香柚皮苷30 ‑100 μg/mL、 柚皮苷0.1 ‑1.0mg/mL、 橙皮苷0.1 ‑1.0mg/mL、 新橙皮苷0.1 ‑1.0mg/ mL、 桂皮醛5 ‑50 μg/mL、 和厚朴酚10 ‑50 μg/mL、 厚朴酚10 ‑100 μg/mL。 4.根据权利要求1所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 所述 供试品为枳实薤白桂枝汤提取 液、 基准样品、 制剂中间产品或制剂成品。 5.根据权利要求1所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 步骤 (2)中所述加入溶剂处理的具体步骤为： 以水或甲醇 ‑水溶液为溶剂， 每30～50mL溶剂加入 1g供试品， 超声处 理， 溶解。 6.根据权利要求1所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 步骤 (3)中所述色谱条件具体为： 十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱， 流动相A： 乙腈、 流动相B： 0.05％～1％体积分数的酸性溶液， 检测波长： 210～360nm， 流速： 0.25～ 0.35mL/min； 柱温： 20℃～40℃； 按如下的洗脱梯度进行洗脱： 7.根据权利要求5所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 所述权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115372517 A 2色谱柱柱长为10 0～150mm， 色谱柱填料 粒径为1.7～1.9 μm。 8.根据权利要求1所述的枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法， 其特征在于， 所述 供试品溶液检测的进样量 为1～2 μL。 9.一种权利要求2所述枳实薤白桂枝汤UPLC特征图谱的构建方法用于表征瓜蒌、 薤白、 枳实、 厚朴和桂枝5个药味对应药 材和饮片色谱信息中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述22个共有峰中， 峰2 ‑4,6,8归属于薤 白， 峰2‑8归属于瓜蒌， 峰1 ‑4,6,8‑15,17‑20归属于枳实， 峰21 ‑22归属于厚朴， 峰16归属于 桂枝； 其中， 峰5,7为瓜蒌专属成分、 峰1,9 ‑15,17‑20为枳实专属成分、 峰21 ‑22为厚朴专属 成分、 峰16为桂枝专属成分。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115372517 A 3