(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210874291.1 (22)申请日 2022.07.22 (71)申请人 北京豪思生物科技股份有限公司 地址 102200 北京市昌平区回龙观镇科 学 园路7号院1号楼1层102-2 申请人 江苏豪思睦可生物科技有限公司 　 湖南豪思生物科技有限公司 (72)发明人 栗琳　王倩倩　李小侠　秦于杰　 吴政晖　周立　丁亮　张新星　 应洪波　 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 专利代理师 张金铭 (51)Int.Cl. G01N 30/06(2006.01)G01N 30/02(2006.01) (54)发明名称 维生素A和维生素E的检测试剂盒、 检测方法 及应用 (57)摘要 本发明提供了一种维生素A和维生素E的检 测试剂盒、 检测方法及应用， 涉及维生素检测技 术领域， 本发 明提供的试剂盒包括用于高效液相 色谱分析的校准品、 质控品、 样本萃取液和稀释 液， 能同时检测维生素A和维生素E， 达到单样本 多指标同步检测功能。 其中选用维生素A乙酸酯 和维生素E乙酸酯作为样本萃取液， 无需进行氮 吹等操作， 且所需要样本量少， 具有操作简单、 成 本可控的优点。 并且样本萃取液中的维生素A乙 酸酯和维生素E乙酸酯作为高效液相色谱分析中 的内标物质使用， 可 以排除内源性干扰， 减少误 差。 该试剂盒能满足相关法规对试剂盒的线性、 重复性、 批间差、 准确度、 稳定性等的要求， 对监 测人体维生素AE有重要作用。 权利要求书2页 说明书28页 附图2页 CN 115236254 A 2022.10.25 CN 115236254 A 1.一种维生素A和维生素E的检测试剂盒， 其特 征在于， 包括： 用于高效液相色谱分析的校准品、 质控品、 样本萃取 液和稀释液； 所述校准品包括6个浓度稀释梯度的含有维生素A和维生素E的混合液； 所述质控品包括2个浓度稀释梯度的含有维生素A和维生素E的混合液； 所述样本萃取 液包括维生素A乙酸酯和维生素E乙酸酯； 所述稀释液为含有牛 血清蛋白的溶 液。 2.据权利 要求1所述的检测试剂盒， 其特征在于， 所述校准品包括校准品S1、 校准品S2、 校准品S3、 校准品S4、 校准品S5和校准品S6； 校准品S1～S6中维生素A的浓度依次为0.6 μg/mL、 1.2 μg/mL、 2.4μg/mL、 6 μg/mL、 12 μg/ mL和30 μg/mL； 维生素E的浓度依次为10 μg/mL、 2 0 μg/mL、 40 μg/mL、 100 μg/mL、 200 μg/mL和500 μg/mL； 优选地， 所述校准品以甲醇为溶剂。 3.根据权利要求1所述的检测试剂 盒， 其特征在于， 所述质控 品包括低 值质控品和高值 质控品； 优选地， 所述低值质控品和高值质控品均以甲醇为溶剂。 4.根据权利要求3所述的检测试剂盒， 其特征在于， 所述低值质控品中维生素A 的浓度 为2 μg/mL， 维生素E的浓度为3 3.3 μg/mL； 所述高值质控品中维生素A的浓度为12 μg/mL， 维生素E的浓度为20 0 μg/mL。 5.根据权利要求1所述的检测试剂盒， 其特 征在于， 所述样本萃取 液的溶剂为甲醇； 优选地， 所述样本萃取液中维生素A乙酸酯的浓度为0.30～0.50 μg/mL， 维生素E乙酸酯 的浓度为 45～55 μg/mL。 6.根据权利要求1所述的检测试剂 盒， 其特征在于， 所述稀释液为含有牛血清蛋白的生 理盐水溶液； 优选地， 所述稀释液为含有3～8％w/v牛血清蛋白的生理盐水溶液， 优选含有5 ％w/v牛 血清蛋白。 7.权利要求1 ‑6任一项所述的检测试剂盒在非诊断和治疗目的的检测血清中维生素A 和维生素E中的应用。 8.一种维生素A和维生素E的检测方法， 其特征在于， 对权利要求1 ‑6任一项所述的检测 试剂盒中的校准品、 质控品和待测样本进行处理后， 采用高效液相色谱方法对待测样本中 的维生素A和维生素E进行检测。 9.根据权利要求8所述的检测方法， 其特征在于， 所述处理包括如下(A) ‑(C)中的至少 一种： (A)分别将校准品和质控品与稀释液混合， 所述校准品和质控品与稀释液的体积比分 别独立地为1:9； (B)将待测样本与样本萃取 液混合， 所述待测样本与样本萃取 液的体积比为1:5； (C)将处理后的校准品、 质控品和待测样本进行震荡并离心后， 进行高效液相色谱检 测； 优选地， 所述待测样本包括血清。 10.根据权利要求8 或9所述的检测方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱的条件包括如权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115236254 A 2下(a)‑(e)中的至少一项： (a)色谱柱为C18色谱柱； 优选地， 色谱柱的规格为5 μm粒径， 4.6 ×100mm； (b)色谱柱的温度为3 5～45℃， 优选为 40℃； (c)进样量 为45～55 μL， 优选为5 0 μL； (d)流动相为10 0％甲醇； (e)流速为0.5～1.5mL/mi n， 优选1mL/mi n。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115236254 A 3