(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211080269.6 (22)申请日 2022.09.05 (71)申请人 广东省农业科 学院植物保护研究所 地址 510640 广东省广州市天河区金颖路7 号 (72)发明人 王思威　肖勇　王潇楠　尹飞　 彭争科　李振宇　 (74)专利代理 机构 佛山粤进知识产权代理事务 所(普通合伙) 44463 专利代理师 耿鹏 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/14(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 超高效液相色谱串联质谱测定草地贪夜蛾 农药含量的方法 (57)摘要 本发明公开了一种环溴虫酰胺、 氯氟氰虫酰 胺、 四唑虫酰胺和四氯虫酰胺在草地贪夜蛾中的 超高效液相色谱串联质谱检测方法， 该方法包括 以下步骤： (1)提取； (2)净化； (3)超高效液质联 用仪测定： 采用液相色谱分离柱分离所述待测样 液中的环溴虫酰胺、 氯氟氰虫酰胺、 四唑虫酰胺 和四氯虫酰胺残留， 质谱进行检测， 即得到草地 贪夜蛾中环溴虫酰胺、 氯氟氰虫酰胺、 四唑虫酰 胺和四氯虫酰胺的残留含量。 本发 明方法的前处 理操作简单方便， 净化效果好， 具有回 收率高、 重 现性好、 有机 溶剂用量少的优点， 4种农药的最低 检测浓度均较低， 适合于环溴虫酰胺、 氯氟氰虫 酰胺、 四唑虫酰胺和四氯虫酰胺在草地贪夜蛾中 的分析检测。 权利要求书2页 说明书7页 附图8页 CN 115406994 A 2022.11.29 CN 115406994 A 1.一种草地贪夜蛾中环溴虫酰胺、 氯氟氰虫酰胺、 四唑虫酰胺和四氯虫酰胺的超高效 液相色谱串联质谱分析 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： S1提取： 将草地贪夜蛾试样匀质后与提取溶剂和提取盐混合， 经振荡提取得到提取液， 取上清液I； S2净化： 将步骤S1中得到的上清液I与净化剂混合进行净化， 收集上清液II， 经过滤得 到待测样液； S3超高液质联用仪测定： 采用液相色谱分离柱分离所述待测样液中的环溴虫酰胺、 氯 氟氰虫酰胺、 四 唑虫酰胺和四氯虫酰胺残留， 质谱进 行检测， 即得到草地贪夜蛾中环溴虫酰 胺、 氯氟氰虫酰胺、 四唑虫酰胺和四氯虫酰胺的残留含量。 2.根据权利要求1所述的一种 超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述步 骤S1中， 提取 溶剂为乙腈、 含0.5％甲酸的乙腈、 含0.5％乙酸的乙腈中的一种或多种。 3.根据权利要求2所述的一种 超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述步 骤S1中， 提取 溶剂为含0.5％乙酸的乙腈。 4.根据权利要求1所述的一种 超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述步 骤S1中， 草 地贪夜蛾试样的质量与所述 提取溶剂的体积比为1:5～10 。 5.根据权利要求1所述的一种 超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述步 骤S1中， 提取盐为无 水硫酸镁、 氯化钠的混合物。 6.根据权利要求1所述的一种 超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述步 骤S1中， 振荡提取的条件为在转速为5000～10000r/min、 时间为5～10min、 温度为0～ 5℃条 件下对所述 提取液进行离心。 7.根据权利要求1所述的一种 超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述步 骤S2中， 净化剂选自十八烷基键合硅胶吸附剂(C18)、 石墨化碳黑吸附剂(GCB)、 N ‑丙基乙二 胺吸附剂(P SA)、 多壁 碳纳米管、 纳米氧化锆、 正己烷液 液分配中的一种或多种。 8.根据权利要求7所述的一种 超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述步 骤S2中， 先使用正己烷进行 液液分配后， 再用P SA、 C18、 纳米氧化锆分散吸附剂联合净化。 9.根据权利要求1所述的一种 超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述步 骤S2中， 所述上清液I与所述净化剂混合后进行涡旋以实现净化， 然后在转速为5000～ 10000r/min、 时间为5～10min、 温度为0～5℃条件下进行离心， 得到所述上清液II， 采用 0.22 μm滤膜进行 过滤。 10.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱分析方法， 其特征在于， 所述 步骤S3中， 所述液相色谱法采用的色谱柱为Poroshell  120SB‑C18， 具体规格可以为75mm × 2.1mm,2.7 ‑μm； 所述色谱条件如下： 流动相为A： 含0.1％甲酸的2mmol/L乙酸铵水溶液， 流动 相B： 乙腈； 采用的梯度洗脱程序为80％A(0.5min),0.5～2.0min  40％A,40％A(1min),3.0 ～4.0min  15％A,15％A(0.5min),4.5～ 6.5min 80％A,80％A(1min)； 流速设为0.3mL/min； 柱温： 35℃， 进样量2 μL； 所述质谱条件如下： 电喷雾负 离子模式(ESI ‑)； 毛细管电压： 4KV； 雾 化气流量3.0mL/min， 干燥气和加热气流量均为10.0mL/min， 接口温度300℃， 脱溶剂温度 526℃， 加热块温度400℃； 检测方式： 多反应离子监测 模式(MRM)， 环溴虫酰胺定量离子对： 601.95＞258.2， 定性离子对601.95＞147.1； 氯氟氰虫酰胺定量离子对： 522.05＞254.15， 定性离子对522.05＞214.1； 四唑虫酰胺定量离子对： 545.15＞376， 定性离子对545.15＞权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115406994 A 2111.9； 3四氯虫酰胺定量离 子对： 537.85＞204.2， 定性离 子对537.85＞147.2。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115406994 A 3