(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111639275.6 (22)申请日 2021.12.2 9 (71)申请人 中山大学附属第一医院 地址 510080 广东省广州市中山 二路58号 (72)发明人 郭宇　 (74)专利代理 机构 广州致信 伟盛知识产权代理 有限公司 4 4253 代理人 彭玲 (51)Int.Cl. A61K 9/52(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 47/10(2006.01) A61K 47/68(2017.01) A61K 47/60(2017.01) A61K 47/52(2017.01)A61K 47/69(2017.01) A61K 31/56(2006.01) A61K 31/7105(2006.01) A61P 15/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (54)发明名称 一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其制 备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种微环境巨噬细胞调控递 送系统及其制备方法和应用， 具有核 ‑壳双层结 构， 以在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下 靶向崩解的酶底物多肽 ‑PEG修饰的脂质双分子 膜作为外壳;以胎盘巨噬细胞表 面特异性高表达 的标志物 抗体修饰的药物载体作为内核， 所述药 物载体中负载超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒 子、 调控胎盘巨噬细胞功能的小分子药物、 治疗 基因或其组合。 本发明的微环境巨噬细胞调控递 送系统可有效避免母体和胎儿非特异性药物吸 收， 进而实现对胎盘内巨噬细胞特异性药物的递 送和功能调控。 权利要求书1页 说明书12页 附图1页 CN 114366724 A 2022.04.19 CN 114366724 A 1.一种微环境巨噬细胞调控递送系统， 其特征在于， 所述微环境巨噬细胞调控递送系 统具有核 ‑壳双层结构， 以在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物多 肽‑PEG修饰的脂质双分子膜作为外壳， 所述胎盘组织间液高表达的酶为酪氨酸激酶TK、 溶 菌酶、 激肽酶、 组胺酶、 催产素酶 或基质金属蛋白酶中的一种或几种； 以胎盘巨噬细胞表面特异性高表达的标志物抗体修饰的药物载体作为内核， 所述药物 载体为聚乙二醇修饰的聚阳离子载体与疏水性可降解聚酯形成的共聚物； 所述的胎盘巨噬 细胞表面特异性高表达的标志 物抗体为E MR1抗体的Fab段； 所述药物载体 中负载超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒子、 调控胎盘巨噬细胞功能的小 分子药物、 治疗基因或其组合。 2.根据权利要求1所述的微环境巨噬细胞调控递送系统， 其特征在于， 所述胎盘组织间 液高表达的酶为酪氨酸激酶TK。 3.根据权利要求1所述的微环境巨噬细胞调控递送系统， 其特征在于， 所述共聚物为 聚 乙二醇‑聚乙烯亚胺 ‑聚己内酯PEG ‑PEI‑PCL、 聚乙二醇 ‑聚乙烯亚胺 ‑聚乳酸PEG ‑PEI‑PLA或 聚乙二醇 ‑聚乙烯亚胺 ‑聚乳酸‑羟基乙酸PEG ‑PEI‑PLGA中的一种或几种， 优选聚乙二醇 ‑聚 乙烯亚胺 ‑聚己内酯 PEG‑PEI‑PCL。 4.根据权利要求1所述的微环境巨噬细胞调控递送系统， 其特征在于， 所述小分子药物 为Betulinic acid， 所述治疗基因为抑制P PARγ基因表达的siRNA。 5.根据权利要求1所述的微环境巨噬细胞调控递送系统， 其特征在于， 所述微环境巨噬 细胞调控递送系统的平均粒径为80nm ‑300nm， 优选为10 0nm‑205nm。 6.权利要求1 ‑5任一项所述的微环境巨噬细胞调控递送系统 的制备方法， 其特征在于， 包括以下步骤： S1、 将超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒子、 调控胎盘巨噬细胞功能的小分子药物和/或 基因负载到共聚物， 得到复合纳米粒子； S2、 将胎盘巨噬细胞表面标志 物抗体链接 到复合纳米粒子， 得到抗体复合纳米粒子； S3、 将促进胎盘中特异性高表达的酶底 物多肽链接PEG， 得到多肽 ‑PEG； S4、 将多肽 ‑PEG和脂质体混合形成多肽 ‑PEG修饰的脂质双分子膜； S5、 将多肽 ‑PEG修饰的脂质双分子膜与抗体复合纳米粒子组装成微环境巨噬细胞调控 递送系统。 7.权利要求6所述的微环境巨噬细胞调控递送系统的制备方法， 其特征在于， 步骤S1 中， 共聚物和超顺磁性四氧化 三铁SPIO纳米粒子的质量比为5 ‑15:1。 8.权利要求1 ‑5任一项所述的微环境巨噬细胞调控递送系统在制备调控胎盘巨噬细胞 功能失调疾病药物中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述调控胎盘巨噬细胞功能失调疾病为妊 娠合并滋养细胞肿瘤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114366724 A 2一种微环境巨噬细胞调控递 送系统及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及 生物医学工程领域， 具体涉及 一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其 制备方法和应用。 背景技术 [0002]既往妊娠期间发生的恶性肿瘤并不常见， 但随着近年来平均妊娠年龄 的推迟， 以 及辅助生殖技术的发展， 妊娠合并恶性肿瘤的发病率逐渐升高％。 妊娠合并恶性肿瘤进入 孕产妇死亡原因前五位， 给母儿安全 带来巨大影响 【冯 玲,何梦舟,王少帅.妊娠合并恶性肿 瘤对孕产妇死亡的影 响[J].实用妇产科杂志,2021,37(03):178 ‑180. 】 。 在妊娠合并恶性肿 瘤中， 处理最为棘手的是发病于孕妇胎盘部位的妊娠合并滋养细胞肿瘤。 此类肿瘤的病理 学特点为， 肿瘤发生于胎盘种植部位， 为体积大小不一的实体肿瘤， 瘤体可局限于子宫， 也 可突向宫腔呈息肉状， 或侵入肌层甚至穿破浆膜， 形成转移 【虞海燕.足月妊娠合并胎盘部 位滋养细胞肿瘤3例误诊分析[J].实用妇产科杂志,2 006(09):548 ‑549. 】 。 该类肿瘤存在于 胎盘中， 与胎盘组织密不可分， 无法采用手术手段进行处理， 如果采用药物治疗， 往往伤及 胎儿导致流产。 但是， 目前缺乏能够直接杀伤胎盘中滋养细胞来源肿瘤细胞的药物， 需要寻 找包括免疫 治疗在内的其 他疗法， 实现对此类肿瘤的杀伤。 [0003]巨噬细胞(m acrophage)是恶性实体肿瘤组织中最多的免疫细胞， 在肿瘤微环境中 多为接近M2表型的促肿 瘤的表型， 此类巨噬细胞在肿 瘤发生发展中起到重要作用 【Bioact   Mater. 2020 Dec 26； 6(7): 1973‑1987.】 。 包括滋养细胞肿瘤等生殖系统肿瘤的发生发展 中， 巨噬细胞同样起到重要的免疫调节作用 【Ev ol Med Public Health.2018 Apr 14； 2018 (1):106‑115.】 在胎盘相关肿瘤中， 这一作用尤其显著。 这是因为， 胎盘巨噬细胞是胎盘内 最先出现和含量最高的免疫细胞 【Annu  Rev Immunol.2013； 31:387 ‑411.】 。 巨噬细胞在肿 瘤微环境中和胎盘中， 均可能出现M1型和M2型等表型， 一般在胎盘微环 境中， 多为可以促进 肿瘤、 抑制免疫杀伤的M2  表型 【Arch  Immunol Ther Exp(Warsz).2019  Oct； 67(5):295 ‑ 309.】 。 所以， 如果能够对胎盘中肿 瘤组织里的M2型巨噬细胞表型进行调控， 使其转换为具 有抗肿瘤作用的M1表型， 将可以有效地抑制肿瘤的生长， 使患者获得较好的预后 【Front   Biosci.2008 Jan 1； 13:453‑61. 】 。 [0004]如何实现胎盘内肿瘤中巨噬细胞M2表型向M1表型的转变？ 我们在前期研究中发 现， 如果能够促进M2型巨噬细胞NF ‑κB通路活性， 可以起到向M1表型转化的作用。 同时， 如果 能抑制巨噬细胞PPARγ(Perox isome Proliferator  Activated  Receptor Gamma)活性， 也 可以促进向M1表型转化 【Eur  J Pharmacol.2020  Jun 15； 877:173090.】 。 联合应用NF ‑κB/ PPARγ两种调控手段， 将会起到协同促进M2型巨噬细胞向抗肿瘤的M1表型转化的效果 【Int   J Mol Sci.2020  Dec 16； 21(24):9605； Annu  Rev Physiol.2010； 72:219 ‑46. 】 。 我们在前 期已经证实单独或联合应用NF ‑κB激活剂(如Betulinic  acid)和PPARγ抑制剂(如siRNA)， 可以实现有效的M2巨噬细胞再极化为M1细胞的效果， 并且证明这种转化可以产生肿瘤杀伤 效果。 所以， 如果能够实现体内联合应用Betulinic  acid和PPARγ ‑siRNA， 促进胎盘内确切说　明　书 1/12 页 3 CN 114366724 A 3