(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111681616.6 (22)申请日 2021.12.2 9 (71)申请人 华道 （上海） 生物医药有限公司 地址 201616 上海市松江区鼎源路618弄 1 号29幢709室 (72)发明人 狄升蒙　冯冬歌　陈鑫　李嘉涛　 范艳秋　田琳　余学军　刘芳　 (74)专利代理 机构 北京品源专利代理有限公司 11332 代理人 赵颖 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 15/867(2006.01) C12N 5/10(2006.01)C07K 19/00(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) A61K 39/00(2006.01) (54)发明名称 一种抗IL13Ra2的纳米抗体及其应用 (57)摘要 本发明提供一种抗IL13Ra2的纳米抗体及其 应用。 所述纳米抗体的CDR3的氨基酸序列包括 SEQ ID NO.8、 SEQ  ID NO.9或SEQ  ID NO.10所示 的序列。 本发明的抗IL13Ra2的纳米抗体可特异 性的结合IL13Ra2抗原， 且亲和 力较好， 将其作为 抗原结合结构域构建嵌合抗原受体和CAR ‑T细 胞， 对IL13Ra2阳性的肿瘤细胞具有明显的杀伤 活性。 权利要求书2页 说明书15页 序列表10页 附图8页 CN 114409782 A 2022.04.29 CN 114409782 A 1.一种抗IL13Ra2的纳米抗体， 其特征在于， 所述纳米抗体的CDR1的氨基酸序列包括 SEQ ID NO.1、 SEQ ID NO.2或SEQ  ID NO.3所示的序列； 所述纳米抗体的CDR2 的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.4、 SEQ  ID NO.5、 SEQ  ID NO.6或 SEQ ID NO.7所示的序列； 所述纳米抗体的CDR3的氨基酸序列 包括SEQ ID NO.8、 SEQ  ID NO.9或SEQ  ID NO.10所 示的序列。 2.根据权利要求1所述的抗IL13Ra2的纳米抗体， 其特征在于， 所述纳米抗体的CDR1的 氨基酸序列包括SEQ  ID NO.1所示的序列， CDR2的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.4所示的序 列， CDR3的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.8所示的序列； 优选地， 所述纳米抗体的CDR1的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.2所示的序列， CDR2的氨基 酸序列包括SEQ  ID NO.5所示的序列， CDR3的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.9所示的序列； 优选地， 所述纳米抗体的CDR1的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.1所示的序列， CDR2的氨基 酸序列包括SEQ  ID NO.6所示的序列， CDR3的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.8所示的序列； 优选地， 所述纳米抗体的CDR1的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.3所示的序列， CDR2的氨基 酸序列包括SEQ  ID NO.4所示的序列， CDR3的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.8所示的序列； 优选地， 所述纳米抗体的CDR1的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.2所示的序列， CDR2的氨基 酸序列包括SEQ  ID NO.7所示的序列， CDR3的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.10所示的序列。 3.一种核酸分子， 其特征在于， 所述核酸分子包括权利 要求1或2所述的抗IL13Ra2的纳 米抗体的编码基因。 4.一种嵌合抗原受体， 其特征在于， 所述嵌合抗原受体包括信号肽、 抗原结合结构域、 铰链区、 跨膜区和信号 转导结构域； 所述抗原结合结构域包括权利要求1或2所述的抗 IL13Ra2的纳米抗体。 5.根据权利要求 4所述的嵌合 抗原受体， 其特 征在于， 所述信号肽包括CD 8α 信号肽； 优选地， 所述铰链区包括CD 8α 铰链区； 优选地， 所述跨膜区包括CD8α 跨膜区、 CD28跨膜区或DAP10跨膜区中的任意一种或至少 两种的组合； 优选地， 所述信号 转导结构域包括免疫受体酪氨酸活化基序； 优选地， 所述信号转导结构域还包括共刺激分子， 所述共刺激分子包括4 ‑1BB、 CD28胞 内区、 OX40、 ICOS或DAP10胞内区中的任意 一种或至少两种的组合； 优选地， 所述嵌合抗原受体包括CD8α信号肽、 权利要求1或2所述的抗IL13Ra2的纳米抗 体、 CD8α 铰链区、 CD 8α 跨膜区和免疫受体酪氨酸活化基序。 6.一种表达载体， 其特征在于， 所述表达载体包括权利要求4或5所述的嵌合抗原受体 的编码基因； 优选地， 所述表达载体为含有权利要求4或5所述的嵌合抗原受体的编码基因 的慢病毒 载体、 逆转录病毒载体或腺相关病毒载体中的任意 一种， 优选为慢病毒载体。 7.一种重组慢病毒， 其特 征在于， 所述重组慢病毒含有权利要求6所述的表达载体。 8.一种嵌合抗原受体免疫细胞， 其特征在于， 所述嵌合抗原受体免疫细胞表达权利要 求4或5所述的嵌合 抗原受体； 优选地， 所述嵌合抗原受体免疫细胞包括权利要求6所述的表达载体和/或权利要求7权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114409782 A 2所述的重组慢病毒； 优选地， 所述嵌合抗原受体免疫细胞包括T细胞、 B细胞、 NK细胞、 肥大细胞或巨噬细胞 中的任意 一种或至少两种的组合。 9.一种药物组合物， 其特征在于， 所述药物 组合物包括权利要求8所述的嵌合抗原受体 免疫细胞； 优选地， 所述药物组合物还 包括药学上可接受的辅料； 优选地， 所述辅料包括载体、 稀释剂、 赋形剂、 填充剂、 粘合剂、 润湿剂、 崩解剂、 乳化剂、 助溶剂、 增溶剂、 渗透压调节剂、 表面活性剂、 包衣材料、 着色剂、 pH调节剂、 抗氧剂、 抑菌剂 或缓冲剂中的任意 一种或至少两种的组合。 10.如权利 要求1或2所述的抗IL13Ra2的纳米抗体、 权利 要求3所述的核酸分子、 权利 要 求4或5所述的嵌合抗原受体、 权利要求6所述的表达载体、 权利要求7所述的重组慢病毒、 权 利要求8所述的嵌合抗原受体免疫细胞或权利要求9所述的药物组合物在制备肿瘤治疗药 物中的应用； 优选地， 所述肿瘤包括表达I L13Ra2的肿瘤。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114409782 A 3