(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111617377.8 (22)申请日 2021.12.28 (71)申请人 西南民族大 学 地址 610041 四川省成 都市侯区一环路南 四段16号 (72)发明人 阎新佳　刘圆　杨正明　张绍山　 黄艳菲　李文兵　李莹　 (74)专利代理 机构 成都科奥专利事务所(普通 合伙) 51101 代理人 苏亚超 (51)Int.Cl. C07H 15/18(2006.01) C07H 1/08(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种抗癌化 合物的制备方法 (57)摘要 本发明方法， 从连翘中纯化制备出了一种具 有抗癌活性的天然化合物， 不仅为该化合物的制 备提供了一种可行的方法， 同时， 还为连翘的进 一步深入开发利用提供了新的思路和途径。 权利要求书1页 说明书6页 CN 114014899 A 2022.02.08 CN 114014899 A 1.如式III所示的化 合物的制备 方法， 其特 征在于： 它包括如下步骤： (1)连翘果实乙醇提取物， 依次用氯仿、 乙酸乙酯萃取； (2)乙酸乙酯萃取部位， 通过非极性或弱极性大孔树脂柱， 依次用 5‑15％、 25‑35％甲 醇‑水溶液洗脱， 收集5 ‑35％甲醇‑水溶液洗脱部位； (3)5‑35％甲醇 ‑水溶液洗脱部位上正相硅胶柱， 依次以二氯甲烷 ‑甲醇42‑38:1、 32‑ 28:1、 22‑18:1洗脱， 收集 二氯甲烷 ‑甲醇22‑18:1洗脱部位； (4)二氯甲烷 ‑甲醇22‑18:1洗脱部位上聚酰胺柱， 依次采用二氯甲烷 ‑甲醇27‑23:1、 22‑18:1洗脱， 收集 二氯甲烷 ‑甲醇22‑18:1洗脱部位； (5)步骤(4)的二氯 甲烷‑甲醇22‑18:1洗脱部位， 上述反相硅胶柱， 依次用37 ‑43％、 47‑ 53％、 57‑63％、 67‑73％、 77‑83％、 87‑93％甲醇 ‑水、 纯甲醇洗脱， 收集纯甲醇洗脱部位； (6)纯甲醇洗脱部位， 上制备液相色谱或半制备液相色谱， 流动相为40 ‑60％甲醇水洗 脱， 得到式I II化合物。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 步骤(1)所述乙醇提取物， 为70 ‑80％ 乙醇提取物。 3.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于： 步骤(1)所述乙醇提取物为75％乙醇 提取物。 4.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 步骤(2)中， 乙酸乙酯萃取部位， 通过 HP‑20色谱柱， 依次用10％、 3 0％甲醇‑水溶液洗脱， 收集3 0％甲醇‑水溶液洗脱部位。 5.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 步骤(3)中， 30％甲醇 ‑水溶液洗脱部 位上正相硅胶柱， 依次以二氯甲烷 ‑甲醇40:1、 30:1、 20:1洗脱， 收集二氯甲烷 ‑甲醇20:1洗 脱部位。 6.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于： 步骤(4)中， 二氯甲烷 ‑甲醇20:1洗脱 部位上聚酰胺柱， 依次采用二氯甲烷 ‑甲醇25:1、 20:1洗脱， 收集二氯甲烷 ‑甲醇20:1洗脱部 位。 7.根据权利 要求1所述的制备方法， 其特征在于： 步骤(5)中， 步骤(4)的二氯甲烷 ‑甲醇 20:1洗脱部位， 上述反相硅胶柱， 依次用40％、 50％、 60％、 70％、 80％、 90％甲醇 ‑水、 纯甲醇 洗脱， 收集纯甲醇洗脱部位。 8.根据权利要求1所述的制备 方法， 其特 征在于： 步骤(6)中， 流动相为5 0％甲醇水。 9.根据权利要求8所述的制备 方法， 其特 征在于： 式I II化合物的保留时间为约4 4min。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114014899 A 2一种抗癌化合物的制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及具有抗癌活性的天然化 合物的制备 方法。 背景技术 [0002]癌症指的是恶性肿瘤及其一些来自于间叶组织的肉瘤。 起源于上皮组织的恶性肿 瘤， 是恶性肿瘤中最常见的一类。 相对应的， 起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。 有少 数恶性肿瘤不按 上述原则命名， 如肾母细胞瘤、 恶性畸胎瘤等。 一般人们所说的 “癌症”习惯 上泛指所有 恶性肿瘤。 [0003]在癌症的治疗过程中， 通常使用化疗、 放疗、 免疫治疗等手段。 而目前常规的手段 毒副作用较强， 多数患者皆因无法承受治疗中的毒副作用而放弃治疗或治疗失败。 [0004]天然植物药物， 是从天然植物中寻找到 的具有特定治疗活性的药物。 天然植物药 物在中国发展历程数千年， 各天然植物药物的毒副作用也基本了解， 若能从中纯化制备得 到具备抗癌活性的化 合物， 或将为癌症治疗带来 新的尝试。 发明内容 [0005]连翘(Forsythia  suspensa)是 我国的传统中药， 早在 《本草图经》 中就有记载， 其 味苦， 性微寒， 归肺， 心， 小肠经， 具有清热解毒， 消肿散结之功效， 常用于风热感冒、 温病初 起、 温热入营、 高热烦渴、 热淋尿闭、 痈疽、 瘰疬、 乳痈、 丹毒和肿毒等症。 主要分布于我国山 西、 陕西、 山 东、 安徽西部、 河南 等地。 本发明拟从连翘中寻找可对癌症有效的活性成分。 [0006]本发明在研究中， 对连翘果实的75％乙醇提取物经多种柱色谱分离纯化， 运用高 分辨质谱、 核磁共振等波谱技术对各种分离部位进行结构确证， 分离得到了1个新化合物 (式III结构所示)。 [0007] [0008]通过细胞试验发现， 本发明化合物对乳腺癌、 恶性黑色素瘤等细胞有显著的抑制 活性。 [0009]基于本发明研究， 提供了如式I II所示的化 合物的制备 方法， 它包括如下步骤：说　明　书 1/6 页 3 CN 114014899 A 3