(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111641434.6 (22)申请日 2021.12.2 9 (71)申请人 福建省山河药业有限公司 地址 351100 福建省莆田市涵江区赤港华 侨经济开发区涵港西路789号 (72)发明人 徐镜　郑永标　谢必峰　 (74)专利代理 机构 泉州凯迪知识产权代理事务 所(普通合伙) 35256 专利代理师 杨雪冰 (51)Int.Cl. C07C 69/738(2006.01) C07C 67/48(2006.01) C07C 67/56(2006.01) C12P 7/62(2022.01) C12P 7/649(2022.01)A61P 35/00(2006.01) C12R 1/365(2006.01) (54)发明名称 一种抗肿瘤霉菌酸类化合物及其制备方法、 应用 (57)摘要 一种抗肿瘤霉菌酸类化合物及其制备方法、 应用， 一种抗肿瘤霉 菌酸类化 合物， 结构式如下： 该霉菌酸类化合 物可用于抗肿瘤药物的制备。 权利要求书1页 说明书4页 附图1页 CN 114478257 A 2022.05.13 CN 114478257 A 1.一种抗肿瘤霉菌酸类化 合物， 其特 征在于： 结构式如下： 2.根据权利要求1所述的一种抗肿瘤霉菌酸类化合物的制备方法， 其特征在于： 包括以 下步骤： 步骤一， 将红色诺卡氏放线菌(Nocardia  rubra)活化后进行液体深层发酵， 发酵结束 后， 用离心法将菌丝体与发酵液分离， 获得菌丝体； 其中， 液体深层发酵的培养基配方按重 量比为： 马铃薯16 ‑25％， 葡萄糖1.5 ‑2.5％， 余量为水； 培养条件为： pH自然， 0.1Mpa、 121℃ 灭菌30min， 置于25－28℃， 180－23 0r/min恒温摇床中培 养10‑15天； 步骤二， 将步骤一获得的菌丝体， 加入四丁基氢氧化铵， 50 ‑100℃下水浴4 ‑24h， 用等体 积的水和二氯甲烷萃取1 ‑3次， 二氯甲烷相浓 缩， 获得有机粗 提物； 步骤三， 将步骤二获得的有机粗提物， 采用反相硅胶柱层析， 用甲醇/丙酮： 水梯度 (0％‑100％:100％ ‑0％)洗脱， 流速控制5 ‑30mL/min， 分部收集， 每份浓缩后进行薄层层析 分析， 用碘和硫酸等显 色剂观察， 根据Rf值和显 色情况合并目标 组分， 并浓缩得到含有目标 成分的组分； 步骤四， 将步骤三得到的组分， 进行凝胶柱层析， 用甲醇、 丙酮、 氯仿为洗脱剂， 控制流 速5‑30s/滴， 分部收集， 每份收集3 ‑10ml， 进行薄层层析分析， 用碘和硫酸等显色剂观 察， 根 据Rf值和显色情况合并目标组分； 步骤五， 将步骤四得到的组分， 进行正相硅胶柱层析， 用石油醚/二氯甲烷/氯仿： 丙酮/ 乙酸乙酯/甲醇比为500 ‑10:10‑1为梯度洗脱剂， 分部收集， 每份收集3 ‑10ml， 进行薄层层析 分析， 用碘和硫酸 等显色剂观察， 根据Rf值和显色情况合并， 得到所述的霉菌酸类化 合物。 3.根据权利要求2所述的一种抗肿瘤霉菌酸类化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤三 中， 薄层层析时， 展层剂为石油醚/正己烷： 丙酮/乙酸乙酯＝10 ‑30:1‑5。 4.根据权利要求2所述的一种抗肿瘤霉菌酸类化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤四 中， 薄层层析时， 展层剂为石油醚/正己烷： 丙酮/乙酸乙酯＝10 ‑30:1‑5。 5.根据权利要求2所述的一种抗肿瘤霉菌酸类化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤五 中， 薄层层析时， 展层剂为石油醚/正己烷： 丙酮/乙酸乙酯＝10 ‑30:1‑5。 6.根据权利要求2所述的一种抗肿瘤霉菌酸类化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤四 中， 凝胶柱为Sephadex  LH‑20凝胶柱。 7.根据权利要求2所述的一种抗肿瘤霉菌酸类化合物的制备方法， 其特征在于： 步骤三 中， 反相硅胶柱为S P‑120‑40/60‑ODS‑RPS反相硅胶柱。 8.根据权利要求1所述的一种抗肿瘤霉菌酸类化 合物在制备抗肿瘤药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114478257 A 2一种抗肿瘤霉菌酸类化合物及其制备方 法、 应用 技术领域 [0001]本发明属于霉菌酸制备领域， 具体涉及一种抗肿瘤霉菌酸类化合物及其制备方 法、 应用。 背景技术 [0002]霉菌酸是α ‑烷基β‑羟基的高级支链脂肪酸。 最初是由安得松(R.J.Anderson)等从 人结核菌中分离出来的。 霉菌酸的化学结构复杂， 根据碳数和基团的不同， 分为3种类型： ① 胆碱型霉菌酸： R＝CH3(CH2)14， R′＝C14H29； 胆碱型霉菌烯酸： R＝CH3(CH2)5CH＝CH(CH2)7， R′ ＝C14H29；②诺卡氏菌中来源的霉菌酸碳数有50个； ③分枝杆菌中来源的霉菌酸碳数有80 个。 [0003]据报道， 霉菌酸具有抗肿瘤等生物活性； 霉菌酸与细胞壁紧密结合， 且极性较小， 目前采用的提取纯化方法是先将细胞壁降解， 通常采用四丁基氢氧化铵、 氢氧化钠、 氢氧化 钾等碱性物质进行 处理， 接着采用正己烷、 石油醚等低极性有机溶剂萃 取， 再用正相硅胶层 析、 薄层层析来制备。 但已报道的方法， 较难纯化结构类似的霉菌酸。 发明内容 [0004]本发明的目的是克服现有技术的缺点， 提供一种抗肿瘤霉菌酸类化合物， 另一目 的是提供一种上述 化合物的制备 方法及应用。 [0005]本发明采用如下技 术方案： [0006]一种抗肿瘤霉菌酸类化 合物， 结构式如下： [0007] [0008]一种抗肿瘤霉菌酸类化 合物的制备 方法， 包括以下步骤： [0009]步骤一， 将红色诺卡氏放线菌(Nocardia  rubra)活化后进行液体深层发酵， 发酵 结束后， 用离心法将菌丝体与发酵液分离， 获得菌丝体； 其中， 液体深层发酵的培养基配方 按重量比为： 马铃薯16 ‑25％， 葡萄糖1.5 ‑2.5％， 余量为水； 培养条件为： pH自然， 0.1Mpa、 121℃灭菌 30min， 置于25－28℃， 180－23 0r/min恒温摇床中培 养10‑15天； [0010]步骤二， 将 步骤一获得的菌丝体， 加入四丁基氢氧化铵， 50 ‑100℃下水浴4 ‑24h， 用 等体积的水和二氯甲烷萃取1 ‑3次， 二氯甲烷相浓 缩， 获得有机粗 提物； [0011]步骤三， 将步骤二获得的有机粗提物， 采用反相硅胶柱层析， 用甲醇/丙酮： 水梯度 (0％‑100％:100％ ‑0％)洗脱， 流速控制5 ‑30mL/min， 分部收集， 每份浓缩后进行薄层层析 分析， 用碘和硫酸等显 色剂观察， 根据Rf值和显 色情况合并目标 组分， 并浓缩得到含有目标 成分的组分； [0012]步骤四， 将步骤三得到的组分， 进行凝胶柱层析， 用甲醇、 丙酮、 氯仿为洗脱剂， 控说　明　书 1/4 页 3 CN 114478257 A 3